武漢鼠尾膠原直銷價

來源: 發(fā)布時間:2024-03-13

鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞,培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率。結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接;同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的。結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑。對于生物科研汪們來說,大白鼠、小白鼠們簡直渾身是寶。武漢鼠尾膠原直銷價

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含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。合肥正規(guī)鼠尾膠原本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng)。

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三維膠原的制備:鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A.不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。

要準備的器具:組織剪2把,有齒鑷1把,無齒鑷1把,200ml燒杯1個,培養(yǎng)皿1個,帶蓋廣口瓶1個,離心管、小瓶數(shù)個,滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1%醋酸溶液。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,洗凈,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,用止血鉗夾住尾巴較高,折斷尾骨后拉出尾腱,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,稱尾腱的重量,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48小時,離心。吸取其上清,分裝至小瓶,4℃保存。上述制備過程均在無菌條件下完成。制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。

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膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋。這樣的螺旋稱為3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,這些棒狀分子首尾相連,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃)。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。鼠尾膠原醋酸溶解:稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。合肥鼠尾膠原服務(wù)電話

可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細胞前用無菌的水漂洗。武漢鼠尾膠原直銷價

除了讓細胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,讓細胞在更真實地條件下進行生長。當然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。蘇州君欣生物科技有限公司武漢鼠尾膠原直銷價