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細胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液.細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。無血清細胞凍存液存儲條件:儲存于4℃以下,質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期兩年。深圳正規(guī)無血清細胞凍存液報價
凍存細胞注意事項:凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得較佳結(jié)果。在細胞處于生長期密度達到70-90%的情況下進行培養(yǎng)細胞的凍存,并且細胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意較佳凍存條件取決于所用細胞系。細胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護劑深圳正規(guī)無血清細胞凍存液報價度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細胞沉淀中。
年連續(xù)三年成為新賽美全產(chǎn)品線中“受客戶喜歡的科研產(chǎn)品”“無血清細胞凍存液關(guān)鍵技術(shù)及產(chǎn)業(yè)化”項目成功入圍“2017年東吳科技創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)人才計劃“3優(yōu)勢分析傳統(tǒng)凍存液CELLSAVING成分“血清+培養(yǎng)基+dmso”四大類,成分明確,不含血清安全性1、微生物污染風(fēng)險2、批次不穩(wěn)定1、無微生物污染風(fēng)險險2、批次穩(wěn)定操作1、4℃(40min)→20℃(30min)→80℃→液氮2、程序性降溫盒(多人共用;異丙醇)直接凍于-80℃冰箱,長期保存效果活率偏低,批次有差異,不適用無血清細胞凍存90%以上,復(fù)蘇后幾乎看不到死細胞
干細胞無血清凍存液操作事項:使用說明:1.細胞消化和計數(shù),用胰酶對待凍存的細胞進行消化,并對細胞進行計數(shù)。2.1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘(4℃),去掉上清。3.根據(jù)細胞計數(shù)的情況,加入適量的干細胞無血清凍存液,使細胞密度在1×106左右(或根據(jù)自己希望達到的細胞密度)。4.輕輕地重懸細胞(務(wù)必重懸均勻)。5.將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管(需提前做好標(biāo)記或者貼上標(biāo)簽)中,旋緊凍存管蓋。6.將凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒直接放入-80℃。7.第二天將細胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。注意事項:1.用處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存。2.控制好胰酶的消化時間,切記消化過度,會影響復(fù)蘇效果。3.重懸細胞的過程中,請務(wù)必要輕柔,以免損傷細胞,但同時也一定要充分重懸,這樣細胞在復(fù)蘇時才不會成團。4.細胞操作請注意無菌。無血清細胞凍存液使用方法:按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。
無血清快速細胞凍存液細胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復(fù)蘇細胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當(dāng)于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。7.若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。深圳正規(guī)無血清細胞凍存液單價
根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。深圳正規(guī)無血清細胞凍存液報價
無血清快速細胞凍存液,是一種新型的快速凍存細胞的保護液,可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動物來源的血清成分,能夠有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求。注意事項:請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存;凍存液加入細胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存;3.本產(chǎn)品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上;4.若需長期凍存細胞,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存;凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套。深圳正規(guī)無血清細胞凍存液報價