品牌糖原染色試劑盒

來源: 發(fā)布時間:2023-12-22

糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應用PAS技術之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,不主張應用唾液。對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。品牌糖原染色試劑盒

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PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家供應無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化。

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糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO42H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個月,變黃則失效。

特殊染色方法選擇應遵循:染色結(jié)果對比鮮明、結(jié)果易保存、陽性突出的染色方法;突出的陽性結(jié)果在于所選擇方法表達的色調(diào)及如何進行背景的復染。結(jié)果能夠長時間保存、不褪色對于后續(xù)的調(diào)閱、科研、論文均較為有利。如顯示淀粉樣物質(zhì),甲基紫染色法雖然流程較為簡單,但結(jié)果不易保存,陽性對比度相對不突出;剛果紅染色法陽性結(jié)果明顯,長時間保存不褪色,流程簡便,更是實用的方法。如顯示彈性纖維,地衣紅染色染液雖配制較方便,但結(jié)果對比度相對欠佳,與其他幾個染色法相比,多不選擇使用。糖原的固定要及時,而且標本要新鮮。

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特染的應用價值:現(xiàn)代病理學中免疫組織化學技術、電子顯微鏡技術以及其它細胞及分子生物學技術應用日益普遍,但由于這些技術要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學技術則具有無需復雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢,在臨床病理學診斷中具有重要的應用價值。比如,當細胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當組織中出現(xiàn)均一化學物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學技術區(qū)別起來很簡單,所以組織化學技術,雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個很有實用價值的技術。自早幼粒階段以后的粒細胞和幼單核細胞可呈弱陽性反應。上海品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家供應

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染色的一般原則:因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導處理的細胞做單陽對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。標記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號較強;檢測某些弱表達的抗原,推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細胞儀相關試劑盒。品牌糖原染色試劑盒