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外泌體與肺病預(yù)后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵。長(zhǎng)沙正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生長(zhǎng)與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血?。ˋML)細(xì)胞的增殖、遷移和壓制細(xì)胞凋亡。治病靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞,以明顯降低RAS活化、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。免疫。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動(dòng)脈硬化。分子標(biāo)記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。預(yù)后標(biāo)志長(zhǎng)沙正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法,由于離心步驟繁瑣。
為了分離外泌體,研究人員用兩個(gè)這樣的單元串聯(lián)構(gòu)建了一個(gè)裝置。首先,使用聲波從血液樣品中除去細(xì)胞和血小板。一旦細(xì)胞和血小板被去除,樣品進(jìn)入第二個(gè)微流體單元,然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細(xì)胞外囊泡分開。這項(xiàng)工作的通訊作者之一,麻省理工學(xué)院材料科學(xué)與工程系科學(xué)家MingDao博士說:“聲波更溫和。而且在分離時(shí),這些囊泡受處理的時(shí)間只有1秒鐘或更短。這是一個(gè)很大的優(yōu)勢(shì)。”使用該設(shè)備,處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘?!斑@種新技術(shù)可以解決當(dāng)前外泌體分離技術(shù)的缺點(diǎn),如周期長(zhǎng),一致性差,產(chǎn)量低,污染以及完整性受損等。我們想要把提取高質(zhì)量的外泌體的過程簡(jiǎn)化為按一個(gè)按鈕就在10分鐘內(nèi)獲得所需樣品一樣簡(jiǎn)單。”研究人員們說。
外泌體與肺病預(yù)后:在當(dāng)代精細(xì)醫(yī)療的大趨勢(shì)下,外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和治病提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù)。根據(jù)一些病癥來源的外泌體在肺病的發(fā)生的發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究,臨床醫(yī)療人員可以針對(duì)不同的患者制定較合適的治病方案,以達(dá)到改善肺病患者生存率,延長(zhǎng)肺病患者生存時(shí)間的目的。但是,針對(duì)外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決,如:外泌體的純化及標(biāo)記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機(jī)制及信號(hào)通路等??偠灾饷隗w的研究有著廣闊的前景,基于外泌體與肺病的研究,有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷和治病的有效措施,造福更多的患者。外泌體提?。壕哂懈哒扯鹊纳飿悠?。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷外泌體的提取方法:超濾離心。濟(jì)南外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)
所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。長(zhǎng)沙正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
外泌體的提取、分離方法:開發(fā)高效、快速、穩(wěn)定,并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法,是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細(xì)胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多,但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān)。通常分離步驟少、產(chǎn)率高,但是純度會(huì)受到影響。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點(diǎn),實(shí)驗(yàn)可以根據(jù)樣本來源、下游實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡?,選擇合適的外泌體分離方法。2015年,國(guó)際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出,簡(jiǎn)單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實(shí)驗(yàn)的需求。因此,推薦聯(lián)合使用各種方法,從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。長(zhǎng)沙正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家