經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA:這個(gè)事實(shí)可能會(huì)刷不少新手甚至老手的三觀,但確有實(shí)驗(yàn)支持:經(jīng)典Trizol法會(huì)選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點(diǎn),源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國(guó)鼎鼎大名的美女科學(xué)家,專做RNA相關(guān)的研究,包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個(gè)奇怪的“現(xiàn)象”,即貼壁細(xì)胞在消化之后,會(huì)有一些miRNA的豐度突然降低,看起來(lái)好像是被快速“降解”掉了,并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn),這個(gè)“現(xiàn)象”難以重復(fù):如果用Trizol做實(shí)驗(yàn),就一定是陽(yáng)性結(jié)果,而用試劑盒提RNA,就重復(fù)不出來(lái)。難道是號(hào)稱能提總RNA的Trizol方案出了問(wèn)題?確實(shí)如此。經(jīng)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn),經(jīng)典的Trizol方案會(huì)使得低GC比的miRNA丟失。RNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量也是另無(wú)數(shù)人頭疼的問(wèn)題。無(wú)錫正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格
核糖核酸RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息傳遞過(guò)程中的橋梁。tRNA的功能是攜帶符合要求的氨基酸,以mRNA為模板,合成蛋白質(zhì)。核糖核酸由至少幾十個(gè)核糖核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵連接而成的一類核酸,因含核糖而得名,簡(jiǎn)稱RNA。RNA普遍存在于動(dòng)物、植物、微生物及某些病菌和噬菌體內(nèi)。RNA和蛋白質(zhì)生物合成有密切的關(guān)系。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過(guò)程中的橋梁。在此過(guò)程中,轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(TransferRNA,tRNA)是攜帶與三聯(lián)體密碼子對(duì)應(yīng)的氨基酸殘基與正在進(jìn)行翻譯的mRNA結(jié)合,而后核糖體RNA(RibosomalRNA,rRNA)將各個(gè)氨基酸殘基通過(guò)肽鍵連接成肽鏈進(jìn)而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。南昌正規(guī)RNA提取試劑哪家好植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):配有高效的DNaseⅠ,可有效去除DNA污染。
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒:無(wú)DNA污染,可直接反轉(zhuǎn)錄,熒光定量,不會(huì)出現(xiàn)洗脫液含絡(luò)合Mg離子成分,壓制后續(xù)PCR反應(yīng)的情況。本試劑盒提取的RNA可直接用于對(duì)前期RNA提取質(zhì)量非常高的后續(xù)實(shí)驗(yàn),如轉(zhuǎn)錄組RNA測(cè)序,制作基因芯片,熒光定量PCR,核酸雜交,反轉(zhuǎn)錄等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)。一個(gè)樣十多分鐘搞定!具有多糖多酚植物RNA提取試劑盒已普及到全國(guó)各大農(nóng)業(yè)大學(xué),農(nóng)科院,植物所等相關(guān)院校單位,包括中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)所,作物所,蔬菜所,多糖多酚植物RNA提取試劑盒由華越洋自主研發(fā)生產(chǎn),博取眾家之長(zhǎng),根據(jù)多年來(lái)市場(chǎng)反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級(jí)和改良得來(lái)。具有操作步驟少,實(shí)驗(yàn)快捷,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要,適用提取樣品普遍等特點(diǎn)。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無(wú)DNA污染,可直接用于反轉(zhuǎn)錄,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(尤其對(duì)RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)
植物花總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,配合特殊的提取緩沖液,可以從多糖多酚植物的根、莖、葉以及花組織中快速提取總RNA,40~60分鐘內(nèi)即可完成提取過(guò)程,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)。特殊的提取緩沖液保證特殊植物材料中的總RNA充分溶解??俁NA提取速度快,提取效率高。有效去除植物花組織中的多糖、多酚類等雜質(zhì),提取純度高。細(xì)菌總RNA提取試劑盒:本試劑盒可以快速?gòu)募?xì)菌體內(nèi)提取總RNA,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)。吸附柱特異吸附總RNA,提取速度快。提取效率高。有效去除蛋白質(zhì)、鹽類、脂類等雜質(zhì),提取純度高。RNA提取試劑注意事項(xiàng):溶液需用DEPC水配制。
RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法:1、得率過(guò)低:提取樣本過(guò)低總量不足或者提取樣本過(guò)多裂解不徹底;應(yīng)當(dāng)使用適當(dāng)質(zhì)量的組織或細(xì)胞進(jìn)行提取,樣本前處理一定要做好,裂解應(yīng)充分。2、基因組殘留:Trizol法提取時(shí),分層后吸取上清時(shí)吸到中間層會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重的基因組污染;分層吸取時(shí)應(yīng)當(dāng)格外小心,不要吸取到中間層。如果是采用柱式法提取,可選擇含有DNaseI的試劑盒進(jìn)行提取,吸附在膜上的核酸直接用DNaseI進(jìn)行消化,可極大限度的降低DNA殘留。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄。無(wú)錫正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格
RNA提取試劑注意事項(xiàng):硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細(xì)胞和組織中提取總RNA的試劑。無(wú)錫正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格
游離RNA(或稱循環(huán)RNA,cell-freeRNA,簡(jiǎn)稱cfRNA),即存在于細(xì)胞外的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,包括mRNA和RNA,在人的多種體液中被普遍研究并成為疾病無(wú)創(chuàng)性診斷和研究的新分子標(biāo)志物。文獻(xiàn)總結(jié)了以下兩個(gè)方面,一方面游離RNA主要來(lái)源于tumour細(xì)胞,另一方面tumour細(xì)胞來(lái)源有凋亡、壞死、主動(dòng)釋放三種機(jī)制,目前認(rèn)為以凋亡為主。游離RNA的生物學(xué)特征:游離RNA的結(jié)構(gòu)RNA相對(duì)DNA而言,更易被普遍存在的核糖核酸酶所降解,而且病癥患者血清中含有更高濃度的核糖核酸酶,病癥患者血清中以RNA-蛋白脂復(fù)合物化學(xué)組成來(lái)保護(hù)RNA,半衰期大約為2天。本試劑盒采用獨(dú)特的配方和添加劑,能高效的分離血清、血漿及其它無(wú)細(xì)胞體液等樣品中分離出游離的RNA,另外本試劑還可以有效地壓制各種外源性和內(nèi)源性的RNA酶,同時(shí)結(jié)合特制的純化柱,能較大限度的保持RNA的完整性、高得率以及純度,并能保留小RNA,為需要進(jìn)行小RNA研究,如RNA的用戶提供了強(qiáng)有力的工具。無(wú)錫正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格