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PAS染色試劑配制及染色方法：1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例，均來自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液，其配方：無水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸（HIO）溶于100mL蒸餾水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：過碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸鈉0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液（Schiff氏液）在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL，煮沸后，在保持微沸的情況下，加入堿性品紅2.5g，并不斷搖動約5min（勿使之沸騰），使堿性品紅徹底溶解（溶解液為深紅色）。冷卻到50℃時，過濾，加入1N鹽酸50mL，再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g，塞住瓶口，搖動容器以充分混合（此時顏色明顯變淡），然后避光放置或冰箱內(nèi)24h腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤：前者棒狀小體糖原染色為陽性。山東口碑好的糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面：Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵，尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量，打開應(yīng)是粉劑，且?guī)в辛虻臍馕?，若成團(tuán)或沒有氣味，則不能用，配制時使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1]，配好后可分成小份置于-20℃保存，用時取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過對比染色發(fā)現(xiàn)，冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5％～1％高碘酸（pH值在3.0～5.0之間），環(huán)境溫度以不高于20℃為宜，室溫高時氧化時間適當(dāng)縮短；如果染色時環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時間長，可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng)，使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽性。因此，室溫較高時可適當(dāng)縮短反應(yīng)時間。湖南口碑好的糖原染色試劑盒推薦廠家利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蠟切片脫蠟至水。（2）0.5%過碘酸水溶液5分鐘?；?%過碘酸95%酒精溶液（過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用）。（3）蒸餾水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分鐘。（Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用）（5）流水沖洗10分鐘。（6）蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。（7）脫水、透明、封蓋。結(jié)果：糖原呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制：（1）0.5%過碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸（98.3ml比重1.16鹽酸，加入蒸餾水成1000ml）20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水，攪拌加熱沸騰，待冷卻至50℃過濾，加入當(dāng)量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處，兩天后溶液變桔黃色或草黃色，然后加入少量活性碳并震蕩、過濾，此時溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色，染色效果較差

糖原染色：1、概況PAS染色法（PeriodicAcid-Schiffstain）在組織學(xué)上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛，再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合，紅色，定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍，如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì)，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些的診斷等。切出的石蠟切片要好，不能有皺褶或者刀痕，切片不能太厚。

糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細(xì)胞增生的性質(zhì)鑒別紅細(xì)胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細(xì)胞PAS反應(yīng)積分正常人幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細(xì)胞白血病時PAS積分升高巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分可40甚至高達(dá)100--200以上用于不典型巨核細(xì)胞與李-斯細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性后者為陰性或弱陽性；用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性而后者反應(yīng)為陰性或弱性。該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。福建品牌糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨

可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。山東口碑好的糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面：PAS染色時需于暗處加蓋反應(yīng)，染色時間10～20min（染色時間長短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度，SO濃度高，染色時間適當(dāng)縮短；環(huán)境溫度高，染色時間也應(yīng)適當(dāng)縮短，反之則需適當(dāng)延長反應(yīng)時間）。染色過程中不能接觸伊紅，以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時，較好作消化對照，即取兩張連續(xù)切片，其中一張脫蠟至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如經(jīng)消化處理的切片染色陰性，不經(jīng)消化處理的切片染色陽性，即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉（鉀）溶液配置后，不能保存，因此，必須現(xiàn)配現(xiàn)用，用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。山東口碑好的糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家

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