染色的一般原則:因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽對照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號較強(qiáng);檢測某些弱表達(dá)的抗原,推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行特殊染色。江西口碑好的糖原染色試劑盒
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團(tuán)或沒有氣味,則不能用,配制時使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過對比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時氧化時間適當(dāng)縮短;如果染色時環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時間長,可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽性。因此,室溫較高時可適當(dāng)縮短反應(yīng)時間。浙江口碑好的糖原染色試劑盒哪家便宜亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥。
糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細(xì)胞增生的性質(zhì)鑒別紅細(xì)胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細(xì)胞PAS反應(yīng)積分正常人幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細(xì)胞白血病時PAS積分升高巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分可40甚至高達(dá)100--200以上用于不典型巨核細(xì)胞與李-斯細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性后者為陰性或弱陽性;用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性而后者反應(yīng)為陰性或弱性。
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法,是研究細(xì)胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。巨幼紅細(xì)胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性。
GUS染色步驟:1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保溫1小時至過夜。2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次,至陰性對照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察,白色背景上的藍(lán)色小點(diǎn)即為GUS表達(dá)位點(diǎn)。注:用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如,擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當(dāng)操作大的組織和樣品時,可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,否則影響染色效果。天津哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
本試劑盒常用于常規(guī)組織切片染色,對于細(xì)胞、極其薄的切片。江西口碑好的糖原染色試劑盒
染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理,同一張涂片上的細(xì)胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時間,較后復(fù)染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時觀察兩種不同的白血病細(xì)胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項(xiàng)染色。急性粒-單核細(xì)胞白血病該染色法在急性粒-單核細(xì)胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應(yīng)的細(xì)胞,甚至少數(shù)病例在單個細(xì)胞內(nèi)同時出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應(yīng),因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒-單核細(xì)胞白血病的診斷上具有獨(dú)特價值。江西口碑好的糖原染色試劑盒
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