南京正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-05

細(xì)胞RNA提取的方法:實(shí)驗(yàn)提取步驟:標(biāo)準(zhǔn)Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細(xì)胞培養(yǎng)皿置于冰上,加入Trizol裂解5-10分鐘,用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進(jìn)口EP管中。加入1/5體積的氯仿,上下混勻液體,4度靜置10-15分鐘。(氯仿為有機(jī)溶劑,有效的使有機(jī)相和無機(jī)相迅速分離。有機(jī)相中主要是酚和蛋白結(jié)合,從而使得蛋白和RNA脫離,RNA進(jìn)入水相)。4度離心15分鐘,一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層,RNA在上清里,從離心機(jī)輕輕拿出EP管,以免管內(nèi)物質(zhì)震蕩導(dǎo)致下層沉淀激起。吸取上清的時(shí)候一定要?jiǎng)幼鬏p柔,切忌吸取太多,一般吸到400-500ul,避免吸到下層沉淀,將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇,4度靜置10min,然后12000rpm離心10min。RNA提取試劑:在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。南京正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格

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在細(xì)胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA(轉(zhuǎn)運(yùn)RNA),rRNA(核糖體RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者;rRNA是組成核糖體的組分,是蛋白質(zhì)合成的工作場所。細(xì)胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,像是組成剪接體的snRNA,負(fù)責(zé)rRNA成型的snoRNA,以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。而其他如I、II型內(nèi)含子、RNaseP、HDV、核糖體RNA等等都有催化生化反應(yīng)過程的活性,即具有酶的活性,這類RNA被稱為核酶。在病菌方面,很多病菌只以RNA作為其中的遺傳信息載體(有別于細(xì)胞生物普遍用雙鏈DNA作載體)。徐州濟(jì)南RNA提取試劑RNA提取試劑注意事項(xiàng):需自備氯仿,異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。

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拭子RNA提取試劑的選擇?1、產(chǎn)品價(jià)格。價(jià)格也是選購產(chǎn)品的重要考量因素。對于絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)如Northern雜交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫構(gòu)建等,國產(chǎn)試劑盒都能滿足質(zhì)量要求。與國外有名品牌相比,國產(chǎn)試劑盒的價(jià)格較為便宜,價(jià)格還不到國外品牌價(jià)格的30%,性價(jià)比較高。因而,對于以上實(shí)驗(yàn)建議選用國產(chǎn)試劑盒。一些經(jīng)費(fèi)不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項(xiàng)目,特別適合選用國產(chǎn)試劑盒。2、與國外有名品牌相比,國產(chǎn)試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,但不影響大多數(shù)實(shí)驗(yàn),特別是下游需要PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)和分子雜交類實(shí)驗(yàn)。在提取得率上,國內(nèi)試劑盒與國外品牌差別不大,而在價(jià)格方面,國產(chǎn)試劑盒具有比較明顯的優(yōu)勢。如果經(jīng)費(fèi)充足,RNA純度要求特別高,可考慮選擇Q等國外有名品牌。如果經(jīng)費(fèi)不多或下游主要做PCR或分子雜交等實(shí)驗(yàn),可考慮選擇性價(jià)比較高的國產(chǎn)品牌。

植物、動(dòng)物、人類都存在RNA干擾現(xiàn)象,這對于基因表達(dá)的管理、參與對病菌傳染的防護(hù)、控制活躍基因具有重要意義。RNA干擾是一個(gè)生物過程,在這個(gè)過程中雙鏈RNA以一種非常明確的方式壓制了基因表達(dá)。自1998年發(fā)現(xiàn)以來,RNA干擾已經(jīng)作為一種強(qiáng)大的“基因沉默”技術(shù)而出現(xiàn)。RNA干擾作為研究基因運(yùn)行的一種研究方法已被普遍應(yīng)用于基礎(chǔ)科學(xué),它可能在將來產(chǎn)生更多更新的醫(yī)治方法??茖W(xué)家認(rèn)為,RNA干擾技術(shù)不僅是研究基因功能的一種強(qiáng)大工具,不久的未來,這種技術(shù)也許能用來直接從源頭上讓致病基因“沉默”,以醫(yī)治病癥甚至一些病,在農(nóng)業(yè)上也將大有可為。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄。

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核糖核酸RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息傳遞過程中的橋梁。tRNA的功能是攜帶符合要求的氨基酸,以mRNA為模板,合成蛋白質(zhì)。核糖核酸由至少幾十個(gè)核糖核苷酸通過磷酸二酯鍵連接而成的一類核酸,因含核糖而得名,簡稱RNA。RNA普遍存在于動(dòng)物、植物、微生物及某些病菌和噬菌體內(nèi)。RNA和蛋白質(zhì)生物合成有密切的關(guān)系。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過程中的橋梁。在此過程中,轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(TransferRNA,tRNA)是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應(yīng)的氨基酸殘基與正在進(jìn)行翻譯的mRNA結(jié)合,而后核糖體RNA(RibosomalRNA,rRNA)將各個(gè)氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進(jìn)而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子。RNA提取試劑注意事項(xiàng):溶液需用DEPC水配制。成都RNA提取試劑推薦廠家

植物花總RNA提取試劑盒:效去除植物花組織中的多糖、多酚類等雜質(zhì)。南京正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格

RNA組成結(jié)構(gòu):RNA和DNA一樣,也是由各種核苷酸通過3′,5′-磷酸二酯鍵連接構(gòu)成的多核苷酸鏈,但與DNA有一系列差異。1.在化學(xué)組成方面,RNA含核糖而不含脫氧核糖。含尿嘧啶而不含胸腺密啶。例外的是,每個(gè)tNA分子含有一個(gè)胸腺嘧啶,這是在RNA鏈合成后由尿嘧啶甲基化生的,此外,前面已提到,少數(shù)DNA含有少量核糖,但這些個(gè)別的例外并不能以此否定兩類核酸組成上的差異。2.RNA一級結(jié)構(gòu)的概念雖與DNA相同.但其基本結(jié)構(gòu)單位是核糖核苷酸而不是脫氧核糖核苷酸。此外,部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列,而且RNA一級結(jié)構(gòu)中沒有DNA那樣復(fù)雜的順序組織。3.絕大多數(shù)RNA為單鏈分子,單鏈可自身折迭形成發(fā)夾(hairpin)樣結(jié)構(gòu)而有局部雙螺旋結(jié)構(gòu)的特征,這是各種RAN空間結(jié)構(gòu)的共同特征。RNA局部雙螺旋結(jié)構(gòu)中堿基互補(bǔ)配對規(guī)律是A對U和G對C。由于RNA分子內(nèi)部不能較全形成堿基配對,故其堿基克分子比A不等于U,G不等于C,不存在DNA堿基比例的Chargaff規(guī)律。南京正規(guī)RNA提取試劑價(jià)格

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