網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒進(jìn)貨價
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象,多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳山東哪家提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。
染色的一般原則:因檢測細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽對照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號較強(qiáng);檢測某些弱表達(dá)的抗原,推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。
糖原染色(過碘酸-雪夫反應(yīng))原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結(jié)合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)粒系:原粒細(xì)胞糖原含量很低,隨著細(xì)胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細(xì)胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細(xì)胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆?;驁F(tuán)塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細(xì)胞白血?。涸剂<?xì)胞呈陰性或弱陽性反應(yīng),以彌散性為主;急性淋巴細(xì)胞白血病原、幼淋巴細(xì)胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應(yīng)可將胰酶消化后細(xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進(jìn)一步的損傷。
染色流程相對簡便、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡便的方法,無論對于量較多的整批次染色,還是較少量的染色均能夠節(jié)省時間、更為便捷。選擇染液易配制的方法,對自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,不容易造成因染液配制問題而影響染色結(jié)果。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無論是從染色流程,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡單方便、省時,同時陽性著染對比度也很明顯。特異性高、傳統(tǒng)或經(jīng)典的染色方法;特異、傳統(tǒng)/經(jīng)典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質(zhì)。幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。湖南口碑好的糖原染色試劑盒推薦廠家
對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒進(jìn)貨價
粘液染色法:粘液一般有以下幾點(diǎn)特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結(jié)果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點(diǎn)是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒進(jìn)貨價