RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護(hù)劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時也可以有效解決組織、細(xì)胞樣品的短時間保存及運(yùn)輸問題。此外,如果將不同時期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達(dá)的時序變化,減少實(shí)驗(yàn)組間的誤差其價格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯,性價比還可以。石家莊RNA提取試劑哪家好
總RNA提取試劑,適用于動植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護(hù)實(shí)驗(yàn),RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提?。?0平方厘米細(xì)胞或100mg組織)??俁NA提取試劑注意事項:1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應(yīng)保證無污染無RNA酶。操作中應(yīng)小心,防止外源性RNA酶污染樣品導(dǎo)致RNA樣品降解。2,試劑中含有酚等有害物質(zhì),注意個人防護(hù)。自備新開封或?qū)iT氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分。
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢:1、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個實(shí)驗(yàn)操作步驟簡化快捷從時間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時甚至更長的時間)。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,保證后續(xù)RNA提取的得率。(能完全通過化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用)。3、高純度:試劑盒的進(jìn)口吸附柱具有的專一吸附特性和強(qiáng)吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功,尤其是對熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)等。
RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法:1、RNA降解:可能是提取樣本本身降解,或者是在提取過程中導(dǎo)致的降級;應(yīng)當(dāng)盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取,采集的樣本應(yīng)當(dāng)及時置于液氮或者-80℃冰箱凍存,并減少反復(fù)凍融。在RNA提取過程中應(yīng)當(dāng)使用RNase/DNasefree的吸頭、離心管及其他材料,提取過程盡可能的快,提取后的RNA應(yīng)置于冰盒上并及時放于-80凍存。如提取后的RNA需要進(jìn)行凝膠電泳檢測,則應(yīng)提取好后立刻進(jìn)行電泳,電泳緩沖液應(yīng)更換新配制的。2、鹽及有機(jī)溶劑殘留:提取試劑中含有酚及胍鹽,洗滌液中含有乙醇,在提取過程中裂解液吸棄不徹底,洗液沒有充分晾干導(dǎo)致的,殘留的鹽及有機(jī)溶劑對后續(xù)的逆轉(zhuǎn)錄和PCR均存在不同程度的壓制作用,因此在提取過程中應(yīng)充分去除組織裂解液,洗滌時應(yīng)充分,使管壁四周均能被洗滌到,另外管子空離和吹風(fēng)是必須的步驟,會進(jìn)一步降低有機(jī)物殘留。RNA提取試劑:能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇。
拭子RNA提取試劑的選擇?1、產(chǎn)品價格。價格也是選購產(chǎn)品的重要考量因素。對于絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)如Northern雜交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫構(gòu)建等,國產(chǎn)試劑盒都能滿足質(zhì)量要求。與國外有名品牌相比,國產(chǎn)試劑盒的價格較為便宜,價格還不到國外品牌價格的30%,性價比較高。因而,對于以上實(shí)驗(yàn)建議選用國產(chǎn)試劑盒。一些經(jīng)費(fèi)不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項目,特別適合選用國產(chǎn)試劑盒。2、與國外有名品牌相比,國產(chǎn)試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,但不影響大多數(shù)實(shí)驗(yàn),特別是下游需要PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)和分子雜交類實(shí)驗(yàn)。在提取得率上,國內(nèi)試劑盒與國外品牌差別不大,而在價格方面,國產(chǎn)試劑盒具有比較明顯的優(yōu)勢。如果經(jīng)費(fèi)充足,RNA純度要求特別高,可考慮選擇Q等國外有名品牌。如果經(jīng)費(fèi)不多或下游主要做PCR或分子雜交等實(shí)驗(yàn),可考慮選擇性價比較高的國產(chǎn)品牌。排除其它核酸分子(DNA)的污染。南京RNA提取試劑
RNA提取試劑注意事項:硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細(xì)胞和組織中提取總RNA的試劑。石家莊RNA提取試劑哪家好
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù),已成功用于葡萄,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑,PCR壓制物清理劑,核酸提取優(yōu)化劑,樣品核酸穩(wěn)定劑,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。2、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,色素等次級代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點(diǎn):操作簡單快速,處理一個樣品只需要約十分鐘。RNA純度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染。適用于各種昆蟲組織,每100mg組織能提取到20~30μg總RNA。得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實(shí)驗(yàn)。一站式,提供RNase-free的樣品收集管·石家莊RNA提取試劑哪家好