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來源: 發(fā)布時間:2022-08-28

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個核苷酸的非編碼小RNA,能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá),目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個mRNA結(jié)合,從而阻滯整個生物通路。因此,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá),與75例健康者相比,發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA(miR-25和miR-223)。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評估,結(jié)果顯示,12個一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達(dá)。Cazzoli等收集了30個血漿樣本,發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA(miR-378a、-379a、-139-5p、-200b-5p)在肺病患者血清中明顯升高,用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積(AUC)為0.908。外泌體提取:免疫分離技術(shù)。溫州正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話

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外泌體的提取分離:1、超速離心法(差速離心)。超離法是常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行(如圖所示),可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,但過程比較費(fèi)時,且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),純度也受到質(zhì)疑;此外,重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。2、密度梯度離心。在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時。天津正規(guī)外泌體提取試劑直銷價外泌體提?。好庖叻蛛x外泌體的原理大多是通過抗體包被的微球,特異性結(jié)合外泌體。

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外泌體項目獲批學(xué)科方向:從統(tǒng)計來看,與前年相似外泌體立項集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué),近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,耐藥性,檢測等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer(IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細(xì)胞外囊泡相關(guān)的miRNA作為子宮內(nèi)膜ai分子標(biāo)志物的可能性。此外,在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病,中醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域也有不少外泌體相關(guān)項目中標(biāo)。外泌體提取試劑直銷價外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷。

1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵外泌體提?。褐貜?fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。

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有的外泌體分離方法需要高速離心,需要使用大型機(jī)器,耗費(fèi)近24小時的時間才能獲得,非常不便。而高離心力也可能破壞囊泡。降低樣品的質(zhì)量。這項研究有望解決這一難題。在論文中,研究人員們提供了一種通過微流體和聲學(xué)的獨(dú)特組合從體液樣品中捕獲外泌體的新穎方法。他們開發(fā)的原始聲學(xué)分選裝置由兩個傾斜的聲學(xué)換能器和一個微流體通道組成,當(dāng)這些傳感器產(chǎn)生的聲波相互碰撞時,形成產(chǎn)生一系列壓力節(jié)點(diǎn)的駐波。每當(dāng)細(xì)胞或顆粒流過通道并遇到一個節(jié)點(diǎn)時,壓力會將細(xì)胞引導(dǎo)離開中心一點(diǎn)點(diǎn)。細(xì)胞移動的距離取決于大小和其他屬性(如可壓縮性),這樣,當(dāng)?shù)竭_(dá)通道末尾時,不同大小和性質(zhì)的細(xì)胞就能夠被分離開來。這種方法分離得到的外泌體,基本上不改變其生物或物理特征,為開發(fā)評估人類健康以及疾病診斷和進(jìn)展提供了有吸引力的新方法。用于外泌體提取的體液收集注意事項:選擇血清還是血漿?推薦大多數(shù)研究選擇血漿。成都正規(guī)外泌體提取試劑單價

目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實現(xiàn)外泌體的提取分離。溫州正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話

作為一種分子通斷開關(guān)的KRAS發(fā)生突變時會處于“開啟”狀態(tài)。在80%~95%的胰腺導(dǎo)管腺病(PDAC)當(dāng)中,這個基因發(fā)生突變,這也是這種一些疾病中較為常見的突變。這些研究人員證實iExosome能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子,并且比他們的合成對應(yīng)物脂質(zhì)體(liposome)更加高效。脂質(zhì)體不具有外泌體表現(xiàn)出的天然復(fù)雜性和優(yōu)勢。德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)助理教授ValerieLeBleu博士說,“我們的研究提示著與脂質(zhì)體相比,外泌體表現(xiàn)出運(yùn)送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長的優(yōu)異能力。我們也證實外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來自循環(huán)單核細(xì)胞的吞噬作用?!睖刂菡?guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話

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