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復(fù)蘇方:法1)從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3)離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。4)清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5)加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6)鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無(wú)血清凍存液用途:無(wú)血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件:置于2~8℃避光保存,有效期為1年。上海無(wú)血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家
無(wú)血清細(xì)胞凍存液是一種無(wú)血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年)。CELLSAVING配方成分明確,不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。細(xì)胞凍存液操作簡(jiǎn)便,無(wú)需程序降溫,可在-80度或液氮中長(zhǎng)期保存。相比于傳統(tǒng)凍存液,埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細(xì)胞活力,穩(wěn)定保持細(xì)胞特性,以及細(xì)胞多能性,并且可以穩(wěn)定保持細(xì)胞的正常核型和增殖能力。細(xì)胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過(guò)動(dòng)物直接注射實(shí)驗(yàn)檢測(cè),包括靜脈注射,皮下注射途徑,無(wú)明顯細(xì)胞毒性,動(dòng)物安全性非常高。南京正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家在冰袋附近操作時(shí),低溫避免保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞造成損傷。
細(xì)胞凍存秘籍:低溫儲(chǔ)存始終保持儲(chǔ)存溫度低于-130°C。細(xì)胞可以在更高的溫度下存活,但生存力通常會(huì)隨著時(shí)間的推移而降低。理想的儲(chǔ)存容器是液氮罐,其中細(xì)胞或者被浸沒(méi)在液氮中,或者被懸浮在液氮上方的蒸汽相中。出于安全原因(以下#6),推薦氣相儲(chǔ)存。要維護(hù)液氮中儲(chǔ)存的細(xì)胞需要記住以下幾點(diǎn):A. 確保標(biāo)簽系統(tǒng)適用于(長(zhǎng)久)低溫儲(chǔ)存。B. 保持良好記錄,包括細(xì)胞儲(chǔ)存位置,生長(zhǎng)特點(diǎn)和操作記錄。C. 請(qǐng)頻繁檢查液氮罐的狀態(tài)(較好每天或至少每周一次)。有多種商用警報(bào)系統(tǒng)可用于持續(xù)監(jiān)控其狀態(tài)。珍貴細(xì)胞應(yīng)至少存放在兩個(gè)不同的地點(diǎn)。
細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的:當(dāng)溫度進(jìn)一步下降,細(xì)胞內(nèi)外都結(jié)冰,產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑,則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。因?yàn)槔鋬霰Wo(hù)劑容易同溶液中的水分子結(jié)合,從而降低冰點(diǎn),減少冰晶的形成,并且通過(guò)其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,使細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷,細(xì)胞得以在較低溫條件下保存。在復(fù)蘇時(shí),一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內(nèi)即恢復(fù)到常溫,細(xì)胞內(nèi)外不會(huì)重新形成較大的冰晶,也不會(huì)暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過(guò)長(zhǎng)的時(shí)間,從而無(wú)冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生,凍存的細(xì)胞經(jīng)復(fù)蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能。冷凍保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞的冷凍保護(hù)效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復(fù)溫速率有關(guān)。而且不同的冷凍保護(hù)劑其冷凍保護(hù)效果也不一樣。無(wú)血清凍存液使用方法:將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液,通用于人和各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色:不含動(dòng)物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。成分明確,無(wú)批次差異??芍苯哟娣庞?80℃冰箱凍存,無(wú)需經(jīng)過(guò)費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程(省時(shí)、省力、省錢)。獨(dú)特配方有效提高細(xì)胞凍存存活率及復(fù)蘇率。即用型,無(wú)需現(xiàn)配,即開(kāi)即用。通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系,原代細(xì)胞??晌⒘?,原位凍存,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,省時(shí)高效。存儲(chǔ)條件:儲(chǔ)存于4℃以下,質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期兩年。3個(gè)月以上沒(méi)有使用凍存液計(jì)劃時(shí),盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可直接存放于-80℃冰箱凍存,無(wú)需經(jīng)過(guò)費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程(省時(shí)、省錢)。上海無(wú)血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家
將要凍存的細(xì)胞懸液,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)后離心。上海無(wú)血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家
無(wú)血清細(xì)胞凍存液相對(duì)于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)有:1.即用型,無(wú)需現(xiàn)配,直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無(wú)需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡(jiǎn)單。4.不含血清,較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無(wú)需液氮,-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過(guò)程。無(wú)血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。上海無(wú)血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家