上樣后用平衡洗脫液洗去未吸附在親和吸附劑上的雜質(zhì)。平衡緩沖液的流速可以快一些,但如果待分離物質(zhì)與配體結(jié)合較弱,平衡緩沖液的流速還是較慢為宜。如果存在較強(qiáng)的非特異性吸附,可以用適當(dāng)較高離子強(qiáng)度的平衡緩沖液進(jìn)行洗滌,但應(yīng)注意平衡緩沖液不應(yīng)對(duì)待分離物質(zhì)與配體的結(jié)合有...
當(dāng)與基于膜的分子排阻超濾過(guò)程一起使用時(shí),膜層析按FDA和EMEA規(guī)定,提供病毒去除的正交法。這使BioMarin公司免于進(jìn)行DNA分批檢測(cè),成為蛋白質(zhì)藥物生產(chǎn)中的一個(gè)里程碑。而且,除了每批生產(chǎn)平均節(jié)省2000美金以外,BioMarin公司已經(jīng)減少了生產(chǎn)批次失敗...
層析柱:廣泛應(yīng)用于生物制品純化、藥物分離、化學(xué)制品分離等領(lǐng)域。通過(guò)選擇合適的固定相和流動(dòng)相以及控制操作條件,可以實(shí)現(xiàn)樣品中各組分的有效分離和純化。凝膠柱:除了上述應(yīng)用領(lǐng)域外,還常用于分子篩分離、親和層析等特定類型的分離純化過(guò)程。綜上所述,層析柱和凝膠柱在分離原...
層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,從而分離的一種層析法。柱層析的裝柱非常重要,裝柱的效果會(huì)直接影響層析分離效果。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種方法。濕法裝柱很簡(jiǎn)單,使用也普遍,就是先用比固...
吸附層析法:固定相是固體吸附劑,利用各組分在吸附劑表面吸附能力的不同來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。例如,常用的硅膠層析柱,硅膠作為吸附劑,對(duì)不同物質(zhì)的吸附能力有差異,從而使混合物中的各成分得以分離。分配層析法:基于各組份在流動(dòng)相和靜止液相(固相)中的分配系數(shù)不同進(jìn)行分離。在這種...
近年來(lái),柱層析方法進(jìn)行了許多方面的創(chuàng)新,尤其表現(xiàn)在自動(dòng)化和過(guò)程控制領(lǐng)域中。用于流體傳送和數(shù)據(jù)采集的新式精確控制器以及先進(jìn)的處理系統(tǒng)都提高了柱層析的可靠性和重現(xiàn)性。自動(dòng)化促進(jìn)柱層析科學(xué)發(fā)展的一個(gè)領(lǐng)域是裝填工序。將介質(zhì)裝填到層析柱中曾經(jīng)被認(rèn)為是一項(xiàng)需要熟練技巧、勞...
另外,蛋白純化柱一般有一定的使用壽命。使用之前應(yīng)查看柱子的比較好使用日期或壽命,超過(guò)壽命的柱子可能效果較差甚至失效。及時(shí)更換柱子,并及時(shí)更新使用記錄,以免使用過(guò)期的柱子導(dǎo)致蛋白純化效果不理想。,在使用后,及時(shí)進(jìn)行清洗和保養(yǎng)。使用適當(dāng)?shù)南礈炀彌_液和溶劑清洗柱子,...
干法裝柱的一個(gè)缺點(diǎn)就是在裝入洗脫劑后,由于溶劑和固定相之間的吸附放熱,所以柱子容易變花,影響分離效果。解決的方法是:(1)固定相一定要添加結(jié)實(shí);(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”,直到柱子的下端不再發(fā)燙,恢復(fù)到室溫后再撤去壓力。無(wú)論使用哪種方法裝柱,都要求所裝...
實(shí)驗(yàn)室層析柱是一種常用于實(shí)驗(yàn)室的分離技術(shù)工具,其功能是對(duì)混合物中的化合物進(jìn)行高效、快速、準(zhǔn)確的分離和純化1。它由特定的材料制成,主要由兩部分組成:填料和柱體1。填料是層析柱的,通常由具有特定吸附性能的顆粒狀物質(zhì)制成,這些顆粒物質(zhì)可以根據(jù)其特性分為多種類型,如吸...
使用時(shí),操作人員要保持謹(jǐn)慎和耐心,遵守操作規(guī)程和安全操作規(guī)定,注意個(gè)人安全和實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔衛(wèi)生。任何操作失誤或發(fā)生異常情況時(shí),及時(shí)停止操作并尋求專業(yè)人員幫助。總之,正確、謹(jǐn)慎地使用中壓層析柱,合理調(diào)節(jié)操作參數(shù),保持設(shè)備清潔和維護(hù),是保證分離效果和實(shí)驗(yàn)安全的關(guān)鍵...
柱層析重要的發(fā)展之一是采用超聲波技術(shù)監(jiān)測(cè)柱內(nèi)填料床的密度。盡管仍處于發(fā)展階段,但以超聲波輔助層析柱裝填的應(yīng)用遲早會(huì)商業(yè)化。其性能直接決定了它具有很大的潛力,可以為操作員判斷層析柱的裝填情況提供精確的工具。超聲波檢測(cè)器對(duì)層析柱中的柱床壓縮、流動(dòng)組成和可溶成分的存...
層析柱是一種用于分離和純化混合物中不同成分的實(shí)驗(yàn)裝置。它通常由一個(gè)圓柱形的玻璃或塑料柱體組成,內(nèi)部填充有特定的層析介質(zhì),如硅膠、凝膠、離子交換樹(shù)脂等。在化學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用。其工作原理基于混合物中各組分在固定相(層析介質(zhì))和流動(dòng)相(通常是...
首先,使用前確保蛋白純化柱是完整無(wú)損的。檢查柱上的連接件、O型密封圈等是否松動(dòng)或破損,確保柱體內(nèi)部沒(méi)有任何雜質(zhì)。如果有任何問(wèn)題,應(yīng)及時(shí)更換或修復(fù)柱子。在裝入樣品之前,需要先進(jìn)行預(yù)洗。首先使用緩沖液通過(guò)柱子,以去除柱子內(nèi)部的任何殘留物。然后,使用適當(dāng)?shù)南礈炀彌_液...
高壓層析柱是液相色譜分析系統(tǒng)中的組件,它負(fù)責(zé)完成樣品的分離、純化和分析。高壓層析柱的結(jié)構(gòu)組成主要包括以下幾個(gè)部分:1.色譜柱管:色譜柱管是該設(shè)備的主體部分,通常由不銹鋼、玻璃或聚合物等材料制成。它的作用是容納填充劑,并承受高壓。色譜柱管的內(nèi)徑、長(zhǎng)度和填料粒度等...
關(guān)于層析柱的選擇,首先要考慮分離目標(biāo)的性質(zhì)和特點(diǎn),包括分子大小、極性、電荷等因素。其次,還需要考慮使用的流動(dòng)相和操作條件,以及設(shè)備的尺寸和形狀等因素。常見(jiàn)的層析柱類型有正相層析、反相層析、離子交換層析、凝膠過(guò)濾層析、親和層析等。值得注意的是,在使用層析柱進(jìn)行分...
在進(jìn)行分離時(shí),首先將樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,然后通過(guò)注射器將樣品注入中壓層析柱。樣品經(jīng)過(guò)填充材料時(shí),其中的不同組分在與填充材料固定相的相互作用下,以不同的速率通過(guò)柱子。這樣,在一定時(shí)間內(nèi),不同組分會(huì)分散在柱子中的不同位置上。為了改變樣品分離的速度和選擇性,還可...
層析柱(chromatographycolumn)是一種在層析技術(shù)中發(fā)揮關(guān)鍵作用的裝置,以下是關(guān)于層析柱的一些要點(diǎn):結(jié)構(gòu)組成方面:通常有柱體(常見(jiàn)的如玻璃管、有機(jī)玻璃管、不銹鋼管等材質(zhì))、上下端的密封部件(防止物質(zhì)泄漏)、內(nèi)部有起分離作用的固定相(如凝膠、硅膠...
當(dāng)與基于膜的分子排阻超濾過(guò)程一起使用時(shí),膜層析按FDA和EMEA規(guī)定,提供病毒去除的正交法。這使BioMarin公司免于進(jìn)行DNA分批檢測(cè),成為蛋白質(zhì)藥物生產(chǎn)中的一個(gè)里程碑。而且,除了每批生產(chǎn)平均節(jié)省2000美金以外,BioMarin公司已經(jīng)減少了生產(chǎn)批次失敗...
另外,蛋白純化柱一般有一定的使用壽命。使用之前應(yīng)查看柱子的比較好使用日期或壽命,超過(guò)壽命的柱子可能效果較差甚至失效。及時(shí)更換柱子,并及時(shí)更新使用記錄,以免使用過(guò)期的柱子導(dǎo)致蛋白純化效果不理想。,在使用后,及時(shí)進(jìn)行清洗和保養(yǎng)。使用適當(dāng)?shù)南礈炀彌_液和溶劑清洗柱子,...
親和層析是近年來(lái)常用的分離純化方法之一。許多物質(zhì)具有奇異的焦點(diǎn)和化合物的可逆性質(zhì)。然后用適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ股锎蠓肿拥姆蛛x和從配體洗脫,從而達(dá)到分離純化的目的(例如,酶和酶與底物和輔酶(產(chǎn)物或競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑等),抗原和抗體,在寒冷的受體,維生素和蛋白質(zhì),凝集素和(或糖...
柱層析重要的發(fā)展之一是采用超聲波技術(shù)監(jiān)測(cè)柱內(nèi)填料床的密度。盡管仍處于發(fā)展階段,但以超聲波輔助層析柱裝填的應(yīng)用遲早會(huì)商業(yè)化。其性能直接決定了它具有很大的潛力,可以為操作員判斷層析柱的裝填情況提供精確的工具。超聲波檢測(cè)器對(duì)層析柱中的柱床壓縮、流動(dòng)組成和可溶成分的存...
干法裝柱的一個(gè)缺點(diǎn)就是在裝入洗脫劑后,由于溶劑和固定相之間的吸附放熱,所以柱子容易變花,影響分離效果。解決的方法是:(1)固定相一定要添加結(jié)實(shí);(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”,直到柱子的下端不再發(fā)燙,恢復(fù)到室溫后再撤去壓力。無(wú)論使用哪種方法裝柱,都要求所裝...
關(guān)于層析柱的選擇,首先要考慮分離目標(biāo)的性質(zhì)和特點(diǎn),包括分子大小、極性、電荷等因素。其次,還需要考慮使用的流動(dòng)相和操作條件,以及設(shè)備的尺寸和形狀等因素。常見(jiàn)的層析柱類型有正相層析、反相層析、離子交換層析、凝膠過(guò)濾層析、親和層析等。值得注意的是,在使用層析柱進(jìn)行分...
定期檢查和維護(hù)純化柱的設(shè)備和部件。定期檢查柱子的密封性、連接件和流通系統(tǒng)的工作狀態(tài),確保其正常運(yùn)行和可靠性。及時(shí)更換磨損的部件,保持設(shè)備的穩(wěn)定性和性能。層析柱(chromatographycolumn)是一種常用的分離技術(shù)設(shè)備,它廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、制藥等領(lǐng)...
分類方面:按固定相物理狀態(tài):凝膠層析柱:固定相是多孔凝膠。吸附層析柱(如以硅膠、氧化鋁為固定相)。離子交換層析柱(以離子交換樹(shù)脂為固定相)等。按操作壓力:常壓層析柱:在常壓下運(yùn)行,適用于對(duì)壓力敏感或一般的分離操作。中壓層析柱:施加一定壓力,提高分離速度和效率。...
緩沖液中有氣泡○上柱前將緩沖液脫氣○在緩沖液入口使用空氣感應(yīng)器溫度影響,如在冷室操作后馬上在室溫操作,或低溫緩沖液直接在室溫使用○將緩沖液在使用前達(dá)到熱平衡2.層析柱干了還可以再使用嗎?○通常不可以,但也取決于具體的純化需求。3.膠平面與柱頭有間隙怎么辦?由于...
使用時(shí),操作人員要保持謹(jǐn)慎和耐心,遵守操作規(guī)程和安全操作規(guī)定,注意個(gè)人安全和實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔衛(wèi)生。任何操作失誤或發(fā)生異常情況時(shí),及時(shí)停止操作并尋求專業(yè)人員幫助??傊?,正確、謹(jǐn)慎地使用中壓層析柱,合理調(diào)節(jié)操作參數(shù),保持設(shè)備清潔和維護(hù),是保證分離效果和實(shí)驗(yàn)安全的關(guān)鍵...
色譜柱在食品安全檢測(cè)中發(fā)揮著重要作用。它可以用于檢測(cè)食品中的添加劑、農(nóng)藥殘留、重金屬等有害物質(zhì),確保食品的安全性和合規(guī)性。同時(shí),色譜柱還可以用于食品營(yíng)養(yǎng)成分的分析和測(cè)定。色譜柱可用于環(huán)境監(jiān)測(cè)中的污染物分析和測(cè)定。通過(guò)分離和分析空氣中的污染物、水體中的有害物質(zhì)以...
色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟,是色譜分析中的關(guān)鍵部件,它根據(jù)化合物的物理化學(xué)性質(zhì),如極性、分子大小、親水性等,將混合物中的化合物分離開(kāi)來(lái)。色譜柱廣泛應(yīng)用于藥學(xué)、化學(xué)、食品科學(xué)、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域,用于化合物的分離、提純、測(cè)定和鑒定。結(jié)構(gòu):色譜柱主要由柱管、壓帽、卡套(密...
樹(shù)脂柱,又稱離子交換柱,是一種具有高度孔隙率和較大比表面積的固體材料,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定:樹(shù)脂柱的化學(xué)性質(zhì)較為穩(wěn)定,具有較好的重復(fù)使用性,重新調(diào)整pH值和鹽溶液濃度后可多次使用,適用于批量處理。耐酸堿性高:樹(shù)脂柱的材料通常采用堅(jiān)硬、不易磨損的有機(jī)脂肪酸類聚合物,并具...