細(xì)胞外基質(zhì)的主要類型及功能:對(duì)人類細(xì)胞的研究表明，細(xì)胞外基質(zhì)中的纖粘蛋白主要由成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞等分泌并附著在細(xì)胞表面，其作用是促進(jìn)細(xì)胞對(duì)基質(zhì)的貼附，細(xì)胞之間的粘著，細(xì)胞內(nèi)微絲及應(yīng)力纖維的構(gòu)建。觀察到轉(zhuǎn)化的體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞，表面纖維蛋白量減少，與此相關(guān)地...

蛋白組學(xué)揭示細(xì)胞外基質(zhì)在部位和部位間質(zhì)中的不同作用：部位間質(zhì)是部位組織中除部位細(xì)胞外其他成分的統(tǒng)稱，部位間質(zhì)和部位細(xì)胞相互作用共同決定部位的生物學(xué)行為（生長(zhǎng)，浸潤(rùn)，轉(zhuǎn)移等）。早期針對(duì)部位的思路往往局限于部位細(xì)胞本身，致使人類的抗部位征途異常艱難曲折。對(duì)部位間質(zhì)...

細(xì)胞外基質(zhì)的主要類型及功能:a.骨的胞外基質(zhì)表現(xiàn)為剛硬的特點(diǎn)，以滿足支撐的作用b.軟骨是另一種結(jié)締組織，其胞外基質(zhì)具有一定的韌性c.眼角膜中胞外基質(zhì)是透明的保護(hù)層。如前所述,動(dòng)物組織的構(gòu)建既是多細(xì)胞相互作用的結(jié)果，也是細(xì)胞與胞外基質(zhì)相互作用和接觸的結(jié)果。胞外基...

膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一，不論來源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸。...

細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)具有支持和誘導(dǎo)骨組織再生的功能，對(duì)骨組織再生具有重要意義。但是，在大多數(shù)骨缺損疾病中，影響細(xì)胞行為的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)被破壞、改變或丟失，導(dǎo)致現(xiàn)有的包括骨結(jié)構(gòu)模擬支架或生物活性因子在內(nèi)的再生策略常常不能達(dá)到令人滿意的結(jié)果。近年來研究發(fā)現(xiàn)，...

鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加，一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴，制作過程需要經(jīng)歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟，才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu)，可以用來當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)。細(xì)胞...

外泌體因諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)而被眾人知曉，也因其作為生命信息傳遞者，在體液中普遍存在及易獲得性等特點(diǎn)被譽(yù)為液體活檢"新貴"，成為疾病的精確診斷和治病研究的熱點(diǎn)，尤其是在一些病癥研究領(lǐng)域[。外泌體作為細(xì)胞間通信載體的作用現(xiàn)在已被普遍接受。外泌體包含胞質(zhì)環(huán)境中富含的DNA...

鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中，自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無鼠尾膠原時(shí)，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液，不宜封接；有鼠尾膠原時(shí)，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，...

ECM與腎臟纖維化:各種原發(fā)性和/或繼發(fā)性致病原因所導(dǎo)致ECM合成與降解的動(dòng)態(tài)失衡，促使大量ECM積聚而沉積于腎小球、腎間質(zhì)內(nèi)，導(dǎo)致腎臟各級(jí)血管堵塞，混亂分隔形成腎臟組織形態(tài)學(xué)改變，較終導(dǎo)致腎單位喪失，腎功能衰竭，進(jìn)一步發(fā)展成為不可逆轉(zhuǎn)的腎小球硬化，細(xì)胞外基質(zhì)...

對(duì)于生物科研汪們來說，大白鼠、小白鼠們簡(jiǎn)直渾身是寶，從毛發(fā)、皮膚，到心肝脾肺，甚至各種排泄物，都是我們重要的研究對(duì)象。尾巴，自然也是。所以耗子尾汁不僅存在，甚至是我們生物實(shí)驗(yàn)中必不可少的實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)對(duì)象。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊。沒有「耗子尾汁...

膠原蛋白的應(yīng)用：1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu)，使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度，適用于薄膜材料的制備；2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料．其獨(dú)特之處是：在熱處理過程中．隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化．膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被...

外泌體提?。撼叽缗抛枭V。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography，SEC）是基于大小而非分子量實(shí)現(xiàn)分離大分子。該技術(shù)應(yīng)用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根據(jù)其直徑通過微球，半徑小的分子需要更長(zhǎng)的時(shí)間才能通過色譜柱的孔隙遷移，而大分...

細(xì)胞外基質(zhì)偶聯(lián)調(diào)控細(xì)胞單層的受力反應(yīng)：上皮細(xì)胞在基底上因受彈性、邊緣和界面三個(gè)效應(yīng)的共同作用，可以形成形態(tài)豐富的粘著單層。細(xì)胞通過粘著斑感受其外界環(huán)境，可看作是細(xì)胞與基質(zhì)之間的機(jī)械連接。之前的力生物學(xué)研究主要集中于單個(gè)細(xì)胞，而來自美國(guó)賓州大學(xué)的張宿林教授等卻探...

無血清細(xì)胞凍存：在細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凍存是較關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細(xì)胞治好、細(xì)胞存儲(chǔ)中對(duì)細(xì)胞凍存更有特殊要求，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對(duì)細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程...

外泌體的提取、分離方法：梯度密度離心法。研究發(fā)現(xiàn)，外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間，因此，可以采用密度梯度離心法來分離外泌體。該方法是將超速離心結(jié)合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結(jié)合，原理是先除去非囊泡物質(zhì)，再通過梯度密度濃縮提取外泌體，該方法可以得到相對(duì)...

細(xì)胞粘附；許多細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的成分結(jié)合。細(xì)胞粘附有兩種方式:通過局部粘連，將細(xì)胞外基質(zhì)連接到細(xì)胞的肌動(dòng)蛋白絲，和半橋粒，將細(xì)胞外基質(zhì)連接到中間絲如角蛋白上。這種細(xì)胞對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的粘附由稱為整合素的特定細(xì)胞表面細(xì)胞粘附分子調(diào)節(jié)。整合素是細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)，它將細(xì)...

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血小板、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí)，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜...

外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測(cè)序的聯(lián)系緊密，研究思路可以分為三大類：表達(dá)譜、分子標(biāo)志物和分子機(jī)制方向，其中表達(dá)譜思路的特點(diǎn)就是短平快、通常以測(cè)序數(shù)據(jù)為主要內(nèi)容，短平快發(fā)表3-5分文章。而分子標(biāo)志物的特點(diǎn)是在表達(dá)譜基礎(chǔ)之上加入大量樣本驗(yàn)證，建立ROC、...

無血清細(xì)胞凍存液：凍存注意：開蓋之前，用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。以下說明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存。培養(yǎng)物應(yīng)該在適合傳代的時(shí)候進(jìn)行收集和凍存。每管所含有的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)來源于6孔板的1個(gè)培養(yǎng)孔。如果使用其他的培養(yǎng)器皿，請(qǐng)相應(yīng)的調(diào)整體積。1.在室溫（15-2...

外泌體的提取、分離方法：尺寸排阻色譜法和超濾法；尺寸排阻色譜法是利用分子篩理論，較初是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要很大的離心力，從而保證了外泌體的完整性。Mol等[13]對(duì)比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白，結(jié)果顯...

外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法，主要用于生物大分子的分離、純化。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體，如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原...

外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及...

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)...

具體步驟是:以下所有步驟都在4℃下進(jìn)行，1、300×g10min，棄沉淀，去除細(xì)胞2、2000×g20min，棄沉淀，去除死細(xì)胞3、10,000×g30min，棄沉淀，去除細(xì)胞碎片等亞細(xì)胞成分4、10,000×g70min，棄上清，沉淀即為外泌體5、PBS（每...

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞)，...

無血清細(xì)胞凍存液是一種無血清細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存（>5年）。CELLSAVING配方成分明確，不含動(dòng)物來源性蛋白，不含血清，可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。細(xì)胞凍存...

無血清細(xì)胞凍存液用途：1.無血清細(xì)胞凍存液用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲(chǔ)存。2.無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲(chǔ)。3.無血清細(xì)胞凍存液用于其他類型哺乳動(dòng)物細(xì)胞的儲(chǔ)存。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：1.不含牛血清，無動(dòng)物源組分。傳統(tǒng)...

外泌體（exosome）是所有細(xì)胞釋放出的菌類大小的顆粒。它們天然地存在于血液中。根據(jù)來自美國(guó)德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心的一項(xiàng)新的研究，對(duì)外泌體進(jìn)行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法。論文通信作者為德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)系研究員R...

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn)，并可減緩冷卻速度，較大降低冰晶形成的危險(xiǎn)(冰晶可損傷細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注：DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí)，應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范，并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。...

細(xì)胞凍存步驟說明：配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。去除PBS，加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來;離心1000rpm，5min;去除胰蛋白酶，加入適量配制好的...