培養(yǎng)液的配置方法大致相同，如下：1.取一袋干粉培養(yǎng)基，將干粉培養(yǎng)基溶于欲配制液體總量2/3的三蒸水，沖洗包裝袋2次倒入培養(yǎng)液中，加入磁性攪拌棒并置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢瑁_保培養(yǎng)基干粉充分溶解。2.按照產(chǎn)品說(shuō)明的要求和實(shí)驗(yàn)需要補(bǔ)加NaHCO3。3.調(diào)整培養(yǎng)液pH值，用pH計(jì)或pH精密試紙觀察調(diào)整結(jié)果達(dá)到pH7.2-7.4。4.將上述溶液用0.22um微孔濾膜過濾除菌。5.將過濾除菌的培養(yǎng)液分裝于貼有標(biāo)簽的無(wú)菌貯液瓶中，加蓋瓶塞，密封4℃冰箱存放。注意：1.培養(yǎng)液配制后應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)培養(yǎng)液是否有污染。2.每批次配制液體數(shù)量以使用2周左右為宜，以免時(shí)間過長(zhǎng)造成營(yíng)養(yǎng)成分損失。 完全培養(yǎng)基...

什么是基本培養(yǎng)基？基本培養(yǎng)基是只能滿足微生物野生型菌株生長(zhǎng)需要的培養(yǎng)基，有時(shí)用符號(hào)“[－]”來(lái)表示。野生型菌株是指從自然界分離得到的微生物在其發(fā)生突變前的原始菌株。什么是完全培養(yǎng)基？完全培養(yǎng)基是一種在基本培養(yǎng)基內(nèi)加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì)，即加入生長(zhǎng)因子而制成的各種營(yíng)養(yǎng)基，可用來(lái)滿足微生物的各種營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的生長(zhǎng)需要，是微生物學(xué)上常用的一種培養(yǎng)基，有時(shí)用符號(hào)“[+]”表示。營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是指野生型菌株經(jīng)過人工誘變或者自然突變失去合成某種營(yíng)養(yǎng)（氨基酸，維生素，核酸等）的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)因子才能生長(zhǎng)，成為營(yíng)養(yǎng)缺陷型。營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是一種生化...

細(xì)胞培養(yǎng)基開發(fā)半個(gè)多世紀(jì)，一代代科學(xué)家努力實(shí)現(xiàn)了一個(gè)個(gè)看似不可能的技術(shù)突破，期間江湖上也有許多軼事。時(shí)間軸上看培養(yǎng)基開發(fā)可以分三個(gè)階段：（從血清到無(wú)血清）；（從無(wú)血清到化學(xué)成分確定）；（國(guó)內(nèi)生物醫(yī)藥崛起）。緣起小小細(xì)胞蘊(yùn)藏著無(wú)限能量，1957年科羅拉多大學(xué)醫(yī)學(xué)系教授（ChineseHamsterOvary，CHO），并成功進(jìn)行體外連續(xù)傳代培養(yǎng)。60多年后，超過80%的上市及臨床階段重組蛋白和抗體藥物通過CHO細(xì)胞表達(dá)，這些藥物年銷售超過千億美金，Puck博士當(dāng)時(shí)或不曾料到CHO細(xì)胞會(huì)有如此廣闊的應(yīng)用和深遠(yuǎn)的貢獻(xiàn)。 上海中喬新舟 完全培養(yǎng)基安心售后。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！吉林L-...

何為細(xì)胞培養(yǎng)？細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)是在細(xì)胞房中進(jìn)行，在超凈工作臺(tái)或生物安全柜中，把細(xì)胞處理好，根據(jù)需要加入細(xì)胞培養(yǎng)基，放入細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿或細(xì)胞培養(yǎng)板中，再放到帶有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞就像花花草草，尤其是細(xì)胞株基本每天都要觀察、打理的哦！培養(yǎng)的細(xì)胞從哪里來(lái)？1.細(xì)胞株簡(jiǎn)單說(shuō)就是買的或送的。2.原代細(xì)胞組織或血液中提取的。一般細(xì)胞株可以連續(xù)傳代，而原代細(xì)胞養(yǎng)著養(yǎng)著就掛了。培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)方式有哪些？1.貼壁生長(zhǎng)必須貼附于支持物表面才能生長(zhǎng)。見于各種腫瘤細(xì)胞等。（你把培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶底朝上，細(xì)胞也不會(huì)掉下來(lái)。2.懸浮生長(zhǎng)于懸浮狀態(tài)下即可生長(zhǎng)，不需要貼附于支持物表面。見于各種造血系...

營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細(xì)胞活性及高密度生長(zhǎng)的基礎(chǔ)，營(yíng)養(yǎng)缺乏容易引起細(xì)胞凋亡，新生牛血清中所含大部分營(yíng)養(yǎng)成分可以通過化學(xué)成分明確的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基，只需添加1％～5％新生牛血清，而對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、形態(tài)、活性和功能沒有影響甚至有所改善。在國(guó)外低血清培養(yǎng)基早已有之，如Gibco等。但是他們的低血清培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中選擇性的加入重組胰島素（recombinantinsulin）、人源轉(zhuǎn)鐵蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些還包含一些生長(zhǎng)因子，這些重組蛋白和動(dòng)物來(lái)源成分對(duì)生物制品的安全性...

別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問。1.怎樣查到一個(gè)特定細(xì)胞株的相關(guān)知識(shí)和培養(yǎng)條件？ATCC（AmericanTypeCultureCollection）收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開ATCC網(wǎng)頁(yè)的Cellsandhybridomas鏈接，輸入細(xì)胞名稱就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù)。數(shù)據(jù)庫(kù)中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述，包括細(xì)胞的來(lái)源，培養(yǎng)和凍存條件，以及相關(guān)文獻(xiàn)等資料。2.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？培養(yǎng)某類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣容易生長(zhǎng)?？傔xMEM、DMEM做貼壁細(xì)胞培養(yǎng)；RPMI1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)；新的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要詳查資...

首先消毒雙手和超凈臺(tái)。取約10ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基放于15毫升離心管中。配置細(xì)胞凍存液：凍存液應(yīng)該提前配制，置于室溫備用，防止臨時(shí)配制產(chǎn)生的熱量損傷細(xì)胞，按無(wú)血清培養(yǎng)基比血清比DMSO=7:2:1的比例配置細(xì)胞凍存液，其中加大凍存液中血清的比例對(duì)于保存某些脆弱的干細(xì)胞以及一些比較珍貴的細(xì)胞很有好處的。按比例加好凍存液組分后，輕輕吸打混勻，置于室溫下待用。從細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞，進(jìn)行瓶口消毒，棄去細(xì)胞原來(lái)的培養(yǎng)基。按每25cm2/ml胰酶/EDTA消化液比例加入消化液，放入顯微鏡下觀察，待所有細(xì)胞變圓后立即拿入超凈臺(tái)內(nèi)，加入2ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基以立即終止消化。采用無(wú)菌頭輕輕吹打細(xì)胞表面...

培養(yǎng)用液是維護(hù)組織細(xì)胞生存、生長(zhǎng)及進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)各項(xiàng)操作過程中所需的基本溶液。常用的細(xì)胞培養(yǎng)試劑包括：超純水，平衡鹽溶液，消化液，PH調(diào)整液，谷氨酰胺溶液，溶液。常見的超純水1.使用純水機(jī)純化而來(lái)；2.蒸餾水和離子交換水3.三蒸水平衡鹽溶液1、平衡鹽溶液主要由無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。主要用于取材時(shí)組織塊的漂洗、細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。2、D-Hank’s與Hank’s的一個(gè)主要區(qū)別在于前者不含有Ca2+、Mg2+，因此D-Hank’s常用于配制胰酶溶液。3、配制平衡鹽溶液也應(yīng)當(dāng)用三蒸水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+，應(yīng)當(dāng)...

何為細(xì)胞培養(yǎng)？細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)是在細(xì)胞房中進(jìn)行，在超凈工作臺(tái)或生物安全柜中，把細(xì)胞處理好，根據(jù)需要加入細(xì)胞培養(yǎng)基，放入細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿或細(xì)胞培養(yǎng)板中，再放到帶有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞就像花花草草，尤其是細(xì)胞株基本每天都要觀察、打理的哦！培養(yǎng)的細(xì)胞從哪里來(lái)？1.細(xì)胞株簡(jiǎn)單說(shuō)就是買的或送的。2.原代細(xì)胞組織或血液中提取的。一般細(xì)胞株可以連續(xù)傳代，而原代細(xì)胞養(yǎng)著養(yǎng)著就掛了。培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)方式有哪些？1.貼壁生長(zhǎng)必須貼附于支持物表面才能生長(zhǎng)。見于各種腫瘤細(xì)胞等。（你把培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶底朝上，細(xì)胞也不會(huì)掉下來(lái)。2.懸浮生長(zhǎng)于懸浮狀態(tài)下即可生長(zhǎng)，不需要貼附于支持物表面。見于各種造血系...

哺乳動(dòng)物細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染能在短期內(nèi)快速表達(dá)高活性蛋白而被廣泛應(yīng)用。本文主要介紹了細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的步驟、原理，及血球計(jì)數(shù)板對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理和方法。哺乳動(dòng)物細(xì)胞自身具有蛋白折疊和翻譯后修飾的功能，獲得的蛋白更具有天然活性。哺乳動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)蛋白的方式有兩種：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的特點(diǎn)是短期快速表達(dá)，滿足蛋白的小量制備。而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染通過構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系能夠滿足蛋白的大量、長(zhǎng)期生產(chǎn)。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過某種方式導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)（主要指HEK293細(xì)胞），該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)分裂，外源基因會(huì)逐漸丟失。質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)能夠存在3-4天，此時(shí)間內(nèi)，質(zhì)...

正如花草樹木需要土壤，細(xì)胞沒有培養(yǎng)基提供營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境就不能生長(zhǎng)。雖然動(dòng)物細(xì)胞體外維持培養(yǎng)的研究可以追溯到20世紀(jì)初甚至更早，但培養(yǎng)基配方開發(fā)劃時(shí)代的里程碑當(dāng)屬HarryEagle博士分別于1955年和1959年在《科學(xué)》雜志上發(fā)表的兩篇研究文章：1955年Eagle博士發(fā)布細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方，并指出培養(yǎng)基是“一個(gè)包含無(wú)機(jī)鹽、氨基酸、糖、維生素及其它必須營(yíng)養(yǎng)物的等滲透壓且具有pH緩沖能力的混合物”。Eagle在1959年的文章中提出了進(jìn)一步改進(jìn)的配方，并將該配方命名為“MinimalEssentialMedium(MEM)”。MEM配方需要在10%以上的牛血清濃度下才能支持細(xì)胞生長(zhǎng)，但...

培養(yǎng)細(xì)胞需要怎樣的生長(zhǎng)條件？1.細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需要2.細(xì)胞的生存環(huán)境溫度：37℃O2：95%CO2：5%PH：？基礎(chǔ)培養(yǎng)基：80-95%血清：5-20%碳酸氫鈉：、鏈霉素：各200單位/毫升細(xì)胞傳代Q1：何為細(xì)胞傳代？細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中生長(zhǎng)一定時(shí)間后，被分開接種到新的培養(yǎng)器皿即為細(xì)胞傳代。Q2:為什么要傳代？簡(jiǎn)單說(shuō)就是“孩子”長(zhǎng)大了，要“分家”！細(xì)胞株在培養(yǎng)過程中數(shù)量會(huì)不斷增多，但是培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞瓶/皿的空間有限，就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞之間接觸過于緊密，會(huì)使得細(xì)胞增殖收到抑制，所以我們必須把其中一部分細(xì)胞轉(zhuǎn)移到別的細(xì)胞瓶/皿，讓細(xì)胞有足夠的生長(zhǎng)空間。 上海中喬新舟 完全培養(yǎng)基值得信賴。歡迎來(lái)電咨詢...

確定細(xì)胞選啥首先，根據(jù)文獻(xiàn)，或者細(xì)胞介紹明確細(xì)胞類型，挑選合適的細(xì)胞。其次，怎么判斷自己收到的細(xì)胞是不是假貨，細(xì)胞鑒定書就是你所購(gòu)買細(xì)胞的身份證！，買細(xì)胞的渠道要正確!否則買到、假貨，腸子都悔青了。。。。。準(zhǔn)備培養(yǎng)試劑備啥俗話說(shuō)：巧婦難為無(wú)米之炊。養(yǎng)好細(xì)胞的首要前提準(zhǔn)備好它喜歡吃的食物——完全培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基是由基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清以及其它添加物配置而成的?；A(chǔ)培養(yǎng)基的家族有EMEM、DMEM、RPMI-1640等等；血清也分為胎牛血清，馬血清等等；添加物包括胰島素，EGF等等~上海中喬新舟的 完全培養(yǎng)基怎么樣？歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！新疆EMEM含有NEAA完全培養(yǎng)基與基本培養(yǎng)基的區(qū)別是什么...

確定細(xì)胞選啥首先，根據(jù)文獻(xiàn)，或者細(xì)胞介紹明確細(xì)胞類型，挑選合適的細(xì)胞。其次，怎么判斷自己收到的細(xì)胞是不是假貨，細(xì)胞鑒定書就是你所購(gòu)買細(xì)胞的身份證！，買細(xì)胞的渠道要正確!否則買到、假貨，腸子都悔青了。。。。。準(zhǔn)備培養(yǎng)試劑備啥俗話說(shuō)：巧婦難為無(wú)米之炊。養(yǎng)好細(xì)胞的首要前提準(zhǔn)備好它喜歡吃的食物——完全培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基是由基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清以及其它添加物配置而成的?；A(chǔ)培養(yǎng)基的家族有EMEM、DMEM、RPMI-1640等等；血清也分為胎牛血清，馬血清等等；添加物包括胰島素，EGF等等~完全培養(yǎng)基的服務(wù)價(jià)格。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！青海F12K完全培養(yǎng)基價(jià)格 細(xì)胞復(fù)蘇細(xì)胞復(fù)蘇是將保存在液氮或-80℃...

無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基（serumfreemedium，SFM）是指在使用中無(wú)需添加血清的細(xì)胞培養(yǎng)基，且其組成成分不含有任何動(dòng)物組分。按照其組分分類，還可以分為無(wú)動(dòng)物組分無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基和化學(xué)限定無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基，前者組分中可能含有某些植物來(lái)源成分，而后者完全由化學(xué)成分明確的組分組成。其中，無(wú)動(dòng)物組分無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基是目前在生物制藥行業(yè)中應(yīng)用普遍的，它提高了細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量，避免了使用血清帶來(lái)的麻煩。目前，已有多種無(wú)血清培養(yǎng)基上市，如雜交瘤細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基、CHO細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基、Vero細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基和NS0細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基等。無(wú)血清培養(yǎng)基通常添加生長(zhǎng)附加成分，如與生長(zhǎng)因子、低分子營(yíng)養(yǎng)...

營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細(xì)胞活性及高密度生長(zhǎng)的基礎(chǔ)，營(yíng)養(yǎng)缺乏容易引起細(xì)胞凋亡，新生牛血清中所含大部分營(yíng)養(yǎng)成分可以通過化學(xué)成分明確的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基，只需添加1％～5％新生牛血清，而對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、形態(tài)、活性和功能沒有影響甚至有所改善。在國(guó)外低血清培養(yǎng)基早已有之，如Gibco等。但是他們的低血清培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中選擇性的加入重組胰島素（recombinantinsulin）、人源轉(zhuǎn)鐵蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些還包含一些生長(zhǎng)因子，這些重組蛋白和動(dòng)物來(lái)源成分對(duì)生物制品的安全性...

細(xì)胞計(jì)數(shù)細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理就是測(cè)定單位體積內(nèi)細(xì)胞的數(shù)量從而得到細(xì)胞總濃度，在細(xì)胞培養(yǎng)和測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的過程中廣泛應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)是采用血球計(jì)數(shù)板對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)，步驟如下：1.將計(jì)數(shù)板的蓋玻片洗凈晾干，并消化細(xì)胞離心加入培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞，制得細(xì)胞懸液2.稀釋細(xì)胞懸液，按照一定的倍數(shù)3.蓋玻片蓋上計(jì)數(shù)板表面，移液器吸取10ul左右的細(xì)胞懸液從血球計(jì)數(shù)板的一方慢慢注入到計(jì)數(shù)板上4.蓋玻片具有引流的功能，因此只需輕輕打入到板上孔中即可5.顯微鏡下觀察細(xì)胞，按照要求計(jì)數(shù)該血球計(jì)數(shù)板上的細(xì)胞個(gè)數(shù)。完全培養(yǎng)基有什么特點(diǎn)？上海中喬新舟告訴您。遼寧IMDM完全培養(yǎng)基相關(guān)信息 常見的幾類細(xì)菌培養(yǎng)基牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基牛...

首先消毒雙手和超凈臺(tái)。取約10ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基放于15毫升離心管中。配置細(xì)胞凍存液：凍存液應(yīng)該提前配制，置于室溫備用，防止臨時(shí)配制產(chǎn)生的熱量損傷細(xì)胞，按無(wú)血清培養(yǎng)基比血清比DMSO=7:2:1的比例配置細(xì)胞凍存液，其中加大凍存液中血清的比例對(duì)于保存某些脆弱的干細(xì)胞以及一些比較珍貴的細(xì)胞很有好處的。按比例加好凍存液組分后，輕輕吸打混勻，置于室溫下待用。從細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞，進(jìn)行瓶口消毒，棄去細(xì)胞原來(lái)的培養(yǎng)基。按每25cm2/ml胰酶/EDTA消化液比例加入消化液，放入顯微鏡下觀察，待所有細(xì)胞變圓后立即拿入超凈臺(tái)內(nèi)，加入2ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基以立即終止消化。采用無(wú)菌頭輕輕吹打細(xì)胞表面...

之所以分裝之前滅菌。是為了方便，培養(yǎng)基倒到培養(yǎng)皿里還是液體（熱的），把盛著液體的淺淺的熱培養(yǎng)皿一個(gè)個(gè)整齊的碼放進(jìn)滅菌釜，還是挺麻煩的。。。第二，有的選擇/鑒別培養(yǎng)基是需要在滅菌之后添加其他不耐熱的無(wú)菌溶劑的（比如MYP要添加蛋黃），需要根據(jù)培養(yǎng)基的量來(lái)添加適量溶劑，在培養(yǎng)皿里就不好加了。。。第三嘛，需要大量使用培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)配置很多瓶培養(yǎng)基（幾十個(gè)上百個(gè)500mL或者一升的瓶子）一起滅菌之后存在冰箱里，需要用的時(shí)候再拿出來(lái)用微波爐或者滅菌釜融化了用。第四是跟第三有關(guān)系的，有一種微生物計(jì)數(shù)技術(shù)叫PourPlatingTechnique（我真不知道中文怎么說(shuō)），基本上就是先把樣品...

培養(yǎng)液的配置方法大致相同，如下：1.取一袋干粉培養(yǎng)基，將干粉培養(yǎng)基溶于欲配制液體總量2/3的三蒸水，沖洗包裝袋2次倒入培養(yǎng)液中，加入磁性攪拌棒并置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?，確保培養(yǎng)基干粉充分溶解。2.按照產(chǎn)品說(shuō)明的要求和實(shí)驗(yàn)需要補(bǔ)加NaHCO3。3.調(diào)整培養(yǎng)液pH值，用pH計(jì)或pH精密試紙觀察調(diào)整結(jié)果達(dá)到pH7.2-7.4。4.將上述溶液用0.22um微孔濾膜過濾除菌。5.將過濾除菌的培養(yǎng)液分裝于貼有標(biāo)簽的無(wú)菌貯液瓶中，加蓋瓶塞，密封4℃冰箱存放。注意：1.培養(yǎng)液配制后應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)培養(yǎng)液是否有污染。2.每批次配制液體數(shù)量以使用2周左右為宜，以免時(shí)間過長(zhǎng)造成營(yíng)養(yǎng)成分損失。 上海的 完...

靠?jī)?nèi)心"感動(dòng)"細(xì)胞1）自己的細(xì)胞自己養(yǎng)，血的教訓(xùn)。2）在生物安全柜(或者超凈臺(tái))，頭，血清管，血清，培養(yǎng)基，瓶子都足夠好，并且細(xì)胞房有良好的衛(wèi)生措施(比如隔離服，手套，口罩，清潔，HEPA等等)且不違反操作原則的情況下，你其實(shí)很難污染。3）上述條件不完備的情況下，就要多注意無(wú)菌操作了：比如要用的東西提前拿到臺(tái)子里照啊(不過這個(gè)其實(shí)也不大好，因?yàn)闀?huì)擋住紫外線)，使用前SDS+酒精擦臺(tái)子，進(jìn)出超凈臺(tái)一定要酒精擦手。4）少對(duì)細(xì)胞說(shuō)話，多靠?jī)?nèi)心來(lái)感動(dòng)它們(是的!心不誠(chéng)是不可以的!)養(yǎng)細(xì)胞就像打仗，知彼知己，百戰(zhàn)不殆！只有了解你養(yǎng)的對(duì)象，才能把它養(yǎng)好！上海的 完全培養(yǎng)基服務(wù)廠家。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟...

首先消毒雙手和超凈臺(tái)。取約10ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基放于15毫升離心管中。配置細(xì)胞凍存液：凍存液應(yīng)該提前配制，置于室溫備用，防止臨時(shí)配制產(chǎn)生的熱量損傷細(xì)胞，按無(wú)血清培養(yǎng)基比血清比DMSO=7:2:1的比例配置細(xì)胞凍存液，其中加大凍存液中血清的比例對(duì)于保存某些脆弱的干細(xì)胞以及一些比較珍貴的細(xì)胞很有好處的。按比例加好凍存液組分后，輕輕吸打混勻，置于室溫下待用。從細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞，進(jìn)行瓶口消毒，棄去細(xì)胞原來(lái)的培養(yǎng)基。按每25cm2/ml胰酶/EDTA消化液比例加入消化液，放入顯微鏡下觀察，待所有細(xì)胞變圓后立即拿入超凈臺(tái)內(nèi)，加入2ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基以立即終止消化。采用無(wú)菌頭輕輕吹打細(xì)胞表面...

培養(yǎng)基的配制步驟，1.未開封的干粉培養(yǎng)基保質(zhì)較長(zhǎng)，已開封的保質(zhì)期會(huì)變短。在瓶體上注明開封日期，用后擰緊瓶蓋。個(gè)別品種易變質(zhì)，如SC增菌液，可冷藏保存。2.若干粉培養(yǎng)基結(jié)塊或顏色發(fā)生改變，不得使用。3.配制用水可用蒸餾水、去離子水等，電阻率不小于30萬(wàn)Ω?cm，每批應(yīng)檢查一次。4.稱量干粉培養(yǎng)基時(shí)為避免污染，可用角匙。5.自行配制的培養(yǎng)基，各營(yíng)養(yǎng)成分應(yīng)按要求順序加入，避免產(chǎn)生沉淀。6.盛放培養(yǎng)基的容器不宜用銅或鐵鍋，以防其離子混入培養(yǎng)基影響微生物生長(zhǎng)。7.稱量好的干粉培養(yǎng)基應(yīng)先溶解再高壓滅菌。8.自行配制的培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解后再調(diào)PH。PH值須冷后測(cè)定，因培養(yǎng)基所含成分不同，對(duì)冷的和熱...

細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同，英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時(shí)，傾向性地稱為培養(yǎng)基，而將粉劑配成液體后，多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常常補(bǔ)加血清、等成分。培養(yǎng)基主要包括天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基等。天然細(xì)胞培養(yǎng)基是人們?cè)缙诓捎玫募?xì)胞培養(yǎng)基，直接取自于動(dòng)物組織提取液或體液，如血漿凝塊、血清、、胚胎浸出液等。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，但成分復(fù)雜，差異大、不穩(wěn)定，來(lái)源也受到限制。水解乳蛋白和膠原是兩種較好的天然培養(yǎng)基，富含氨基酸。血清是天然培養(yǎng)基中和常用的培養(yǎng)基，但其組成成分復(fù)雜，其中一些成分與...

細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同，英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時(shí)，傾向性地稱為培養(yǎng)基，而將粉劑配成液體后，多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常常補(bǔ)加血清、等成分。培養(yǎng)基主要包括天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基等。天然細(xì)胞培養(yǎng)基是人們?cè)缙诓捎玫募?xì)胞培養(yǎng)基，直接取自于動(dòng)物組織提取液或體液，如血漿凝塊、血清、、胚胎浸出液等。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，但成分復(fù)雜，差異大、不穩(wěn)定，來(lái)源也受到限制。水解乳蛋白和膠原是兩種較好的天然培養(yǎng)基，富含氨基酸。血清是天然培養(yǎng)基中和常用的培養(yǎng)基，但其組成成分復(fù)雜，其中一些成分與...

體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞已有近百年的歷史，人工合成培養(yǎng)基的問世促進(jìn)了細(xì)胞培養(yǎng)工作的發(fā)展。當(dāng)粉劑合成培養(yǎng)基配置成液體后稱為培養(yǎng)液，其主要成分是氨基酸、維生素、糖類、無(wú)機(jī)離子以及其他成分。合成培養(yǎng)基種類很多，常用的有十多種，目前使用普遍的是RPMI1640，MEM，DMEM和DMEM/F12。RPMI1640培養(yǎng)基：初為培養(yǎng)小鼠白血病細(xì)胞的需要而制備。開始的配方適合懸浮細(xì)胞的生長(zhǎng)，主要針對(duì)淋巴細(xì)胞，后經(jīng)幾次改良從RPMI1630,1634而至1640，其成分較為簡(jiǎn)單?，F(xiàn)發(fā)現(xiàn)它適應(yīng)于多種類型細(xì)胞的生長(zhǎng)，包括腫瘤細(xì)胞以及很多正常組織細(xì)胞體外培養(yǎng)。歡迎致電上海中喬新舟咨詢 完全培養(yǎng)基。歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！...

細(xì)胞培養(yǎng)基開發(fā)半個(gè)多世紀(jì)，一代代科學(xué)家努力實(shí)現(xiàn)了一個(gè)個(gè)看似不可能的技術(shù)突破，期間江湖上也有許多軼事。時(shí)間軸上看培養(yǎng)基開發(fā)可以分三個(gè)階段：（從血清到無(wú)血清）；（從無(wú)血清到化學(xué)成分確定）；（國(guó)內(nèi)生物醫(yī)藥崛起）。緣起小小細(xì)胞蘊(yùn)藏著無(wú)限能量，1957年科羅拉多大學(xué)醫(yī)學(xué)系教授（ChineseHamsterOvary，CHO），并成功進(jìn)行體外連續(xù)傳代培養(yǎng)。60多年后，超過80%的上市及臨床階段重組蛋白和抗體藥物通過CHO細(xì)胞表達(dá)，這些藥物年銷售超過千億美金，Puck博士當(dāng)時(shí)或不曾料到CHO細(xì)胞會(huì)有如此廣闊的應(yīng)用和深遠(yuǎn)的貢獻(xiàn)。 完全培養(yǎng)基托運(yùn)有哪些步驟？歡迎來(lái)電咨詢上海中喬新舟！中國(guó)臺(tái)灣RPMI...

pH調(diào)整液常用的有HEPES液和NaHC03溶液，一般情況下是按照說(shuō)明書的要求準(zhǔn)確添加，以保證培養(yǎng)基在5%CO2的環(huán)境下pH達(dá)到設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)。2．HEPES液：HEPES是一種弱酸，中文名稱是羥乙基哌嗪乙硫磺酸。HEPES對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性，主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動(dòng)100X的Hepes配制：取，用1N的NAHCO3調(diào)PH至，過濾除菌，定容至100ml.谷氨酰胺補(bǔ)充液:谷氨酰胺在細(xì)胞代謝過程中起重要作用，合成培養(yǎng)基中都要添加，由于谷氨酰胺容易降解，所以都是在使用前添加。谷氨酰胺使用終濃度為。一般配制為100倍濃縮液，配制時(shí)應(yīng)加溫至30℃，完全溶解后過濾除菌，分裝至小瓶，儲(chǔ)存于-20℃。...

營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細(xì)胞活性及高密度生長(zhǎng)的基礎(chǔ)，營(yíng)養(yǎng)缺乏容易引起細(xì)胞凋亡，新生牛血清中所含大部分營(yíng)養(yǎng)成分可以通過化學(xué)成分明確的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基，只需添加1％～5％新生牛血清，而對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、形態(tài)、活性和功能沒有影響甚至有所改善。在國(guó)外低血清培養(yǎng)基早已有之，如Gibco等。但是他們的低血清培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中選擇性的加入重組胰島素（recombinantinsulin）、人源轉(zhuǎn)鐵蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些還包含一些生長(zhǎng)因子，這些重組蛋白和動(dòng)物來(lái)源成分對(duì)生物制品的安全性...

正如花草樹木需要土壤，細(xì)胞沒有培養(yǎng)基提供營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境就不能生長(zhǎng)。雖然動(dòng)物細(xì)胞體外維持培養(yǎng)的研究可以追溯到20世紀(jì)初甚至更早，但培養(yǎng)基配方開發(fā)劃時(shí)代的里程碑當(dāng)屬HarryEagle博士分別于1955年和1959年在《科學(xué)》雜志上發(fā)表的兩篇研究文章：1955年Eagle博士發(fā)布細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方，并指出培養(yǎng)基是“一個(gè)包含無(wú)機(jī)鹽、氨基酸、糖、維生素及其它必須營(yíng)養(yǎng)物的等滲透壓且具有pH緩沖能力的混合物”。Eagle在1959年的文章中提出了進(jìn)一步改進(jìn)的配方，并將該配方命名為“MinimalEssentialMedium(MEM)”。MEM配方需要在10%以上的牛血清濃度下才能支持細(xì)胞生長(zhǎng)，但...