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細(xì)胞系錯(cuò)誤鑒定問(wèn)題已有50年歷史,基于國(guó)際細(xì)胞庫(kù)的分析數(shù)據(jù)顯示:1984年細(xì)胞錯(cuò)誤鑒定率為35%,1999年為18%,直到近幾年,應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的細(xì)胞系需要鑒定的問(wèn)題仍然很少有人關(guān)注。近年來(lái),大量研究表明 STR 基因分型 方法是進(jìn)行細(xì)胞交叉污染和性質(zhì)鑒定的比較有效和準(zhǔn)確的方法之一,STR基因分型應(yīng)用于細(xì)胞鑒定已被ATCC等機(jī)構(gòu)強(qiáng)烈推薦。美國(guó)的ATCC 細(xì)胞庫(kù)、德國(guó)的DSMZ細(xì)胞庫(kù)以及日本的JCRB細(xì)胞庫(kù)等為STR 分型提供了各細(xì)胞株的數(shù)據(jù)供比對(duì)。什么是細(xì)胞系STR鑒定?小鼠鑒定21位點(diǎn)
在一切由細(xì)胞身份開(kāi)始說(shuō)起一文中,小E已經(jīng)為大家羅列出目前已經(jīng)確定被Hela細(xì)胞污染的細(xì)胞系名稱。做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的伙伴們可以翻閱一下,以防自己的細(xì)胞也在其中!還不僅只如此,這些常見(jiàn)的細(xì)胞系除了發(fā)現(xiàn)種屬內(nèi)的交叉污染/錯(cuò)誤鑒定,還有部分細(xì)胞系被發(fā)現(xiàn)連種屬都被錯(cuò)誤鑒定了!被鑒定的278株細(xì)胞系中,有20株(20/278=7.2%)細(xì)胞系PCR擴(kuò)增失敗,證明其并非人源細(xì)胞。作者繼續(xù)追蹤實(shí)驗(yàn),通過(guò)種屬鑒定來(lái)確認(rèn)其真實(shí)來(lái)源,結(jié)果其中2株細(xì)胞系被證實(shí)分別來(lái)源于大鼠。細(xì)胞STR鑒定數(shù)據(jù)庫(kù)這有力地說(shuō)明了翼和細(xì)胞STR鑒定結(jié)果是得到國(guó)際前列期刊認(rèn)可的!
翼和送樣要求有以下幾點(diǎn): 1.細(xì)胞上清:在無(wú)抗生su及其它抑菌或滅菌物質(zhì)條件下培養(yǎng)3天,取1.0ml 細(xì)胞培養(yǎng)上清液移至2ml離心管中,請(qǐng)加冰袋運(yùn)輸。2.細(xì)胞沉淀:在無(wú)抗生su及其它抑菌或滅菌物質(zhì)條件下培養(yǎng)3天,取1.0ml 細(xì)胞培養(yǎng)上清液移至2ml 離心管中。將上清液移入無(wú)菌離心管以15,000-20,000g 速度離心10 分鐘,移除上清液,保留離心沉淀物(若貼壁細(xì)胞,使用細(xì)胞刮刮取細(xì)胞,吸取轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管,12000rpm離心沉淀細(xì)胞),請(qǐng)加冰袋運(yùn)輸。
翼和采用PCR 檢測(cè)法,含有化學(xué)修飾熱啟動(dòng)酶的 2×PCR mix,配以 dUTP 和UDG 酶,可很大程度降低非特異擴(kuò)增和引物二聚體的形成,有效防止 PCR 產(chǎn)物的交叉污染。對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)樣本內(nèi)支原體16S rRNA 基因高度保守區(qū)域特異性片段進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè),與含有支原體的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品和不含有支原體的陰性標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì),鑒定支原體污染的現(xiàn)象,能夠檢測(cè)包含M.fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. salivarium, M. hominis, M.pulmonis, M. arthritidis, M. bovis, M. pneumoniae,M. pirum, M. capricolum, Acholeplasma, Spiroplasma等60多種支原體。所謂細(xì)胞系鑒定即通過(guò)STR(短串聯(lián)重復(fù))圖譜所建立細(xì)胞系的遺傳特征。
恭賀上海翼和生物客戶趙永良研究員課題組在Cancer Research雜志(IF=8.5)發(fā)表研究論文。熱烈祝賀上海翼和生物客戶中科院北京基因組研究所趙永良研究員課題組默董亮博士發(fā)表文章“Human helicase RECQL4 drives cisplatin resistance in gastric cancer by activating an AKT-YB1-MDR1 signaling pathway”于Cancer Research雜志,影響因子8.556,其中上海翼和生物為研究中所涉及到的多株細(xì)胞系提供了細(xì)胞STR鑒定服務(wù)。熱烈祝賀上海翼和生物客戶第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院內(nèi)分泌科發(fā)表文章“NRF2 activation by antioxidant antidiabetic agents accelerates tumor metastasis ”于Science Translational Medicine雜志,影響因子16.3,其中上海翼和生物為研究中所涉及到的細(xì)胞系提供了細(xì)胞STR鑒定服務(wù)。依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn),可以通過(guò)多重?zé)晒釶CR技術(shù),對(duì)人源8個(gè)STR位點(diǎn)以及1個(gè)性別決定位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。浙江細(xì)胞鑒定周期
《Stem Cell Research》雜志于2019年進(jìn)入上海翼和生物的視野。小鼠鑒定21位點(diǎn)
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司作為一家專門從事分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)的公司,提供專業(yè)的細(xì)胞鑒定服務(wù),為了進(jìn)一步提高鑒定的分辨率,我們除了包含ATCC檢測(cè)的8個(gè)STR和1個(gè)性別決定位點(diǎn)Amelogenin外,另新增了12個(gè)高度多態(tài)性位點(diǎn)。ATCC在2010年的Nature Review上說(shuō),我們應(yīng)該紀(jì)念一位偉大的科學(xué)家,叫Nelso-Rees。他以染色體核型分析來(lái)鑒定細(xì)胞,并為此承包了美國(guó)國(guó)家研究院的細(xì)胞庫(kù)。當(dāng)他多年來(lái)一直提醒科學(xué)家用錯(cuò)細(xì)胞的時(shí)候,結(jié)果被NIH開(kāi)了。為什么呢,科學(xué)家一直在發(fā)表論文,承認(rèn)錯(cuò)誤科學(xué)生涯就完了(學(xué)術(shù)界的人很可憐,只有兩個(gè)結(jié)局:Publish or Perish)。小鼠鑒定21位點(diǎn)
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司致力于醫(yī)藥健康,是一家服務(wù)型的公司。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)等,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造醫(yī)藥健康良好品牌。翼和生物立足于全國(guó)市場(chǎng),依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力,融合前沿的技術(shù)理念,飛快響應(yīng)客戶的變化需求。