用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑（Ver. II）（上圖）和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?（下圖）轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后，細(xì)胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖（左側(cè)）和熒光成像圖（右側(cè)）。
對(duì)懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/
30 毫升的 293F 細(xì)胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá)，用量為 LipoD293? 試劑，20 微克，所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。 轉(zhuǎn)染試劑--總有一款你想要的.上海陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑盒
.在多種不同類(lèi)型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%。
2.高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。
3.細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo)。
4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基)。
圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說(shuō)明書(shū)建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。 通過(guò)LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 上海陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑梯度并更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞，用PBS洗滌3次以上，以備RNA抽提。
.在多種不同類(lèi)型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%。
高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo)。
兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基)。
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說(shuō)明書(shū)建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過(guò)LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞，左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA，右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。
4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4. 用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對(duì)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP），轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果，LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。
LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程
細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過(guò)計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。 國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑制作原理是什么?
在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí)，需考慮您希望輸送的運(yùn)載物（DNA、RNA或蛋白質(zhì)）以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型。您可通過(guò)下表選擇各類(lèi)陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。
我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇，讓您可以對(duì)自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類(lèi)型的細(xì)胞無(wú)毒性作用—您之所以能看到結(jié)果，是因?yàn)楹怂岽嬖?，而不是因?yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型提供了快速、簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案
連續(xù)細(xì)胞系 具有無(wú)限增殖的潛能，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類(lèi)細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力，它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。
.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得：只需簡(jiǎn)單地混合，并進(jìn)行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。上海陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑盒
轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型可簡(jiǎn)單分為兩大類(lèi)，連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。上海陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑盒
LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光，以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細(xì)胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達(dá)到95%的細(xì)胞融合。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，分別通過(guò)Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)效率。上海陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑盒