青海立式數(shù)字PCR安裝

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-17

數(shù)字PCR檢測及分析原理在上世紀(jì)90年代就被提出來了,但是無奈受限于當(dāng)時(shí)的技術(shù)條件,樣本稀釋及分配都是靠手工來完成的,受到很多因素的干擾和限制;并且結(jié)果分析對(duì)于研究者來說也十分枯燥與繁瑣,因此在很長一段時(shí)間dPCR發(fā)展停滯不前。后來由于微流控技術(shù)與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過程中的幾個(gè)關(guān)鍵技術(shù)問題,推動(dòng)了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式,基本可分為三大類,一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片;第二種是使用微反應(yīng)室/孔板;第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式,其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或者微滴當(dāng)中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于1或者等于1。經(jīng)過PCR擴(kuò)增之后,有一個(gè)核酸分子的模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒有模板的反應(yīng)器沒有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,可以推算出原始溶液的核酸濃度。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,歡迎新老客戶來電!青海立式數(shù)字PCR安裝

數(shù)字PCR

同時(shí),從公式也可以看出,隨著反應(yīng)陽性體系數(shù)(X)的增加,體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)相對(duì)于X會(huì)有較大的差距,隨著X的持續(xù)增加,數(shù)字PCR結(jié)果的不確定度也隨著提高,總體來說,數(shù)字PCR陽性體系的數(shù)量不得超過總體系數(shù)量的80%。另一個(gè)方面,N的增加會(huì)使整個(gè)數(shù)字PCR體系具有較大的線性范圍,并可以提高反應(yīng)的靈敏度、穩(wěn)定性以及可重復(fù)性。因此,目前dPCR都需要在成本可控的情況下,增加分配的腔室數(shù)和液滴數(shù)。商業(yè)化dPCR平臺(tái)及其特點(diǎn)發(fā)展到現(xiàn)在,市面上常見的dPCR主要有兩種:微滴式dPCR(dropletdPCR,ddPCR)和芯片式dPCR(chipdPCR,cdPCR)技術(shù)。由于芯片式dPCR制造芯片的成本較高,目前微滴式dPCR正越來越受到企業(yè)的認(rèn)可。江西檢測數(shù)字PCR電話浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有需求可以來電咨詢!

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精細(xì)診斷是精細(xì)醫(yī)學(xué)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),液體活檢作為一種無創(chuàng)、均一的檢測技術(shù),迅速成為精細(xì)診斷領(lǐng)域的新星,2015年被《麻省理工大學(xué)科技評(píng)論》評(píng)選為年度**突破技術(shù),2017年入選世界經(jīng)濟(jì)論壇評(píng)出的全球**新興技術(shù),引發(fā)了全球科研、臨床和產(chǎn)業(yè)界的極大熱情,已在**、產(chǎn)前診斷、***移植等疾病領(lǐng)域***被應(yīng)用。數(shù)字PCR技術(shù)與高通量的二代測序技術(shù),共同組成液體活檢領(lǐng)域的兩大利器;數(shù)字PCR技術(shù)是公認(rèn)的液體活檢領(lǐng)域靈敏度比較高的檢測方法,采用有限稀釋的方法將目標(biāo)分子分割到**的反應(yīng)體系中,在不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線條件下實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)***定量檢測,能檢測低至0.01%的突變基因;Bio-Rad及ThermoFisher目前是這一領(lǐng)域的主導(dǎo)者,分別采用微滴或芯片方式將樣本分割成兩萬份,MiniDrop?創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。

與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢:1、能夠完全定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會(huì)存在差異,另外加上PCR擴(kuò)增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可進(jìn)行完全定量。2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個(gè) PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個(gè) 反應(yīng)體系中,明顯降低了背景信號(hào)和yìzhì物對(duì)反應(yīng)的干擾,擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,有想法的可以來電咨詢!

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產(chǎn)品特點(diǎn)無需依賴傳統(tǒng)熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實(shí)現(xiàn)核酸的***定量。全封閉防污染設(shè)計(jì),一鍵式自動(dòng)化操作。采用主流可靠的解決方案,系統(tǒng)由微滴生成儀、微滴檢測儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成,并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等微滴生成采用油包水乳化微滴技術(shù),在微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng),2mins生成高達(dá)10萬個(gè)皮升級(jí)的微滴,高效高產(chǎn),支持多重?cái)?shù)字PCR的開發(fā)。微滴生成芯片為高精度微流控芯片設(shè)計(jì),三維微納防污染結(jié)構(gòu),一張芯片可同時(shí)處理8個(gè)樣本。微滴檢測使用雙通道熒光,支持EvaGreen染料法及探針法。檢測線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級(jí),基因突變檢測靈敏度高達(dá)0.01%。檢測通量高,可一次檢測高達(dá)96個(gè)樣本,支持靈活設(shè)定。全中文分析軟件,人性化界面設(shè)置,多種分析工具供用戶選擇。本系統(tǒng)為開放式平臺(tái),可使用第三方PCR反應(yīng)液,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品??:?上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR 的公司,歡迎您的來電!陜西體積小數(shù)字PCR定制

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在定量PCR時(shí),我們常常糾結(jié)一個(gè)問題,究竟是相對(duì)定量還是***定量呢?如今,你無需糾結(jié)了,因?yàn)閿?shù)字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計(jì)起始樣品中的核酸量,但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來測定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對(duì)表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。青海立式數(shù)字PCR安裝