基因檢測**前沿的兩種方法是:高通量測序(NGS)和數(shù)字PCR(dPCR)。高通量測序技術(shù)又稱“下一代”測序技術(shù),可以一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定,功能強大,但是實驗操作較復雜,數(shù)據(jù)分析難度較大,檢測周期長,成本較高。數(shù)字PCR技術(shù)是目前**精細**靈敏的基因檢測技術(shù),借助微液滴或微腔室,通過單個模板分子的PCR擴增,可實現(xiàn)不依賴于標準曲線和參照樣本的***定量。與NGS相比,數(shù)字PCR靈敏度高、檢測速度快、操作簡便、結(jié)果易讀、成本低廉等優(yōu)勢使其更適合臨床檢測,成為精細醫(yī)療實現(xiàn)平民化、大眾化的比較好選擇。此外,數(shù)字PCR還在基因表達差異研究、拷貝數(shù)變異(CNV)研究、低豐度DNA模板分子的精確定量、甲基化含量鑒定、二代測序輔助建庫、CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗證、轉(zhuǎn)基因成分的檢測、移植排異監(jiān)控、腸道菌群分析以及***基因組檢測等眾多領(lǐng)域中有著優(yōu)異的應用。采用主流可靠的解決方案,由微滴生成儀、微滴檢測儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成。陜西藥品數(shù)字PCR咨詢報價
在定量PCR時,我們常常糾結(jié)一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結(jié)了,因為數(shù)字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結(jié)果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。江西小型數(shù)字PCR聯(lián)系方式理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應用。
研究方向無創(chuàng)產(chǎn)前篩查無創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷,如21號染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測或已知父母基因型的其它核酸病檢測(孟德爾相關(guān)遺傳疾病)。目前標本來源主要為血液,而待檢測的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測的準確性。而QX200檢測系統(tǒng)獨特的微滴化技術(shù)完全可以作為二代測序法的補充來進行的無創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷,從而提高工作效率及節(jié)約成本。轉(zhuǎn)基因食品或成分的檢測目前在確定轉(zhuǎn)基因作物或成分的含量時采取定量PCR的標準曲線法,這種方法需要依賴于已知濃度的標準品(CertifiedReferenceMaterialsCalibrants,CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標準物質(zhì)的定標工作。
定量PCR和數(shù)字PCR的特點:1.在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術(shù)平臺,已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測的某些應用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標準”。基礎(chǔ)研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標準實驗指南”。2.在定量PCR的各種應用中,基因表達分析(geneexpressionanalysis)的應用比重約占七成,綜合各種因素來看,眼下定量PCR還是進行基因表達研究的理想手段。3.上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻與protocol的數(shù)目等等。4.就目前市場上已有的數(shù)字PCR設(shè)備來看,定量PCR在檢測的線性范圍上具有優(yōu)勢,意味著同一個run內(nèi)可對各種表達豐度的樣品進行分析。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR。
數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴增曲線循環(huán)Ct值,不受擴增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標分子進行擴增,然后再對每個單元進行熒光信號的統(tǒng)計并計算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應都是發(fā)生于同一體系當中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR,有想法的可以來電數(shù)字PCR!江西小型數(shù)字PCR聯(lián)系方式
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我國***擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀MiniDrop?研發(fā)成功并投入生產(chǎn)。這是國內(nèi)***微滴式數(shù)字PCR檢測系統(tǒng),能廣泛應用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領(lǐng)域,未來,采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進行低成本、高靈敏、快速的無創(chuàng)檢測成為可能。MiniDrop?數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微 流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運行生成400萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到5個數(shù)量級,各項指標均超越國內(nèi)外主流產(chǎn)品。陜西藥品數(shù)字PCR咨詢報價
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