天津?qū)嶒炇覕?shù)字PCR維修

來源: 發(fā)布時間:2023-06-06

同時,從公式也可以看出,隨著反應(yīng)陽性體系數(shù)(X)的增加,體系中目標分子的拷貝數(shù)相對于X會有較大的差距,隨著X的持續(xù)增加,數(shù)字PCR結(jié)果的不確定度也隨著提高,總體來說,數(shù)字PCR陽性體系的數(shù)量不得超過總體系數(shù)量的80%。另一個方面,N的增加會使整個數(shù)字PCR體系具有較大的線性范圍,并可以提高反應(yīng)的靈敏度、穩(wěn)定性以及可重復(fù)性。因此,目前dPCR都需要在成本可控的情況下,增加分配的腔室數(shù)和液滴數(shù)。商業(yè)化dPCR平臺及其特點發(fā)展到現(xiàn)在,市面上常見的dPCR主要有兩種:微滴式dPCR(dropletdPCR,ddPCR)和芯片式dPCR(chipdPCR,cdPCR)技術(shù)。由于芯片式dPCR制造芯片的成本較高,目前微滴式dPCR正越來越受到企業(yè)的認可。采用主流可靠的解決方案,由微滴生成儀、微滴檢測儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成。天津?qū)嶒炇覕?shù)字PCR維修

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MicroDrop-100數(shù)字PCR系統(tǒng)具有如下優(yōu)點:1、JUE對定量,結(jié)果判讀不需要依賴標準曲線;2、突破局限,檢測靈敏度可低至萬分之一;3、專利設(shè)計的具有高精度復(fù)雜三維微納防污染結(jié)構(gòu)的微流控芯片,單張可同時處理1-8個樣本;4、一鍵式自動操作,20uLPCR體系可生成100,000微滴,8個樣本單次微滴生成 需2分鐘;5、FAM、HEX(VIC)雙熒光通道,半導(dǎo)體激光器做為激發(fā)光 源相比LED光源,穩(wěn)定性高,功率穩(wěn)定不影響檢測靈敏度,單色性能優(yōu)異降低對檢測特異性的影響,且方向性好;6、檢測器為2個光電倍增管,靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD,普通的硅光子計數(shù)器,增益為10^5,光電倍增管增益可以達到10^9;7、 知識產(chǎn)權(quán)的軟件系統(tǒng)可直接計算拷貝數(shù)、拷貝數(shù)濃度,CNV值,突變豐度;閾值線可自動或手動完成,每個樣本可單獨設(shè)定閾值線;輸出數(shù)據(jù)圖標、直方圖、一維圖、二維圖、濃度圖、95%置信度不確定性區(qū)間等;軟件可自動識別復(fù)雜微滴分簇四簇;軟件具備數(shù)據(jù)質(zhì)控功能,支持陽性微滴數(shù)、陰性微滴數(shù)、總微滴數(shù)統(tǒng)計及這些指標的任意組合;單個樣本100,000微滴的反應(yīng)體系以及高靈敏度的檢測系統(tǒng),配以獨特的軟件系統(tǒng),可以實現(xiàn)高達20重的PCR分析;8、單次檢測通量96個樣本,操作靈活;天津?qū)嶒炇覕?shù)字PCR維修線性范圍達到6個數(shù)量級,靈敏度高達萬分之一。

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數(shù)字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發(fā)展起來的一種突破性的核酸定量分析技術(shù)。該技術(shù)先將核酸模板進行稀釋,分配到大量 的反應(yīng)單元中,使每個反應(yīng)單元中只有單個模板分子,然后進行PCR擴增反應(yīng),擴增結(jié)束后對每個反應(yīng)室的熒光信號進行統(tǒng)計學(xué)分析,來定量DNA拷貝數(shù)。數(shù)字PCR采用先擴增后定量,因此不依賴擴增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無需采用內(nèi)參基因和標準曲線,準確度高、重現(xiàn)性好,可以實現(xiàn)***定量分析。由于其獨特的技術(shù)優(yōu)勢,已經(jīng)在臨床診斷、轉(zhuǎn)基因成分定量、單細胞基因表達分析、環(huán)境微生物檢測和下一代測序等研究領(lǐng)域顯示出巨大的優(yōu)勢和應(yīng)用前景。

數(shù)字PCR可以直接計算目標序列的拷貝數(shù),因此無需依賴于對照樣品和標準曲線就可以進行精確的***定量檢測;此外,由于數(shù)字PCR在進行結(jié)果判讀時 判斷有/無兩種擴增狀態(tài),因此也不需要檢測熒光信號與設(shè)定閾值線的交點,完全不依賴于Ct值的鑒定,因此數(shù)字PCR的反應(yīng)受擴增效率的影響**降低,對PCR反應(yīng)***物的耐受能力**提高;數(shù)字PCR實驗中標準反應(yīng)體系分配的過程可以極大程度上降低與目標序列有競爭性作用的背景序列濃度,因此數(shù)字PCR技術(shù)也特別適合在復(fù)雜背景中檢測稀有突變。數(shù)字PCR儀廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領(lǐng)域。

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相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:·能夠有效區(qū)分濃度差異微小的樣品:更好的準確度、精密度和重復(fù)性,可以用于精確測定靶基因的相對表達,基因拷貝數(shù)變異分析等?!?shù)字PCR可開發(fā)針對不同**、不同樣本以及不同的樣本環(huán)境提供檢測解決方案,該技術(shù)的應(yīng)用范圍廣,尤其在液體活檢領(lǐng)域,已開發(fā)針對肺*、乳腺*、腸*、胃*等上百個位點檢測試劑盒,可精細指導(dǎo)臨床***的診斷,以便患者在后續(xù)得到更及時并且適當?shù)?**方案提供??墒褂玫谌絇CR反應(yīng)液,配備PCR A300(溫度范圍4°C-98°C,擴增模塊溫控精度±0.2°C)。江蘇醫(yī)用數(shù)字PCR維修

MicroDrop?數(shù)字PCR是擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀。天津?qū)嶒炇覕?shù)字PCR維修

精細診斷是精細醫(yī)學(xué)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),液體活檢作為一種無創(chuàng)、均一的檢測技術(shù),迅速成為精細診斷領(lǐng)域的新星,2015年被《麻省理工大學(xué)科技評論》評選為年度**突破技術(shù),2017年入選世界經(jīng)濟論壇評出的全球**新興技術(shù),引發(fā)了全球科研、臨床和產(chǎn)業(yè)界的極大熱情,已在**、產(chǎn)前診斷、***移植等疾病領(lǐng)域***被應(yīng)用。數(shù)字PCR技術(shù)與高通量的二代測序技術(shù),共同組成液體活檢領(lǐng)域的兩大利器;數(shù)字PCR技術(shù)是公認的液體活檢領(lǐng)域靈敏度比較高的檢測方法,采用有限稀釋的方法將目標分子分割到**的反應(yīng)體系中,在不依賴標準曲線條件下實現(xiàn)靶標***定量檢測,能檢測低至0.01%的突變基因;Bio-Rad及ThermoFisher目前是這一領(lǐng)域的主導(dǎo)者,分別采用微滴或芯片方式將樣本分割成兩萬份,MiniDrop?創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。天津?qū)嶒炇覕?shù)字PCR維修

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