相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:●靈敏度可達(dá)到單個(gè)核酸分子:檢測限低至0.001%,主要系為數(shù)字PCR可以實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)DNA/RNA的生物濃縮;●無需標(biāo)準(zhǔn)曲線活參照基因進(jìn)行對比來測定核算量,可對靶分子起始量進(jìn)行***定量,直接獨(dú)處DNA分子 的個(gè)數(shù);●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測:終點(diǎn)PCR檢測,不依賴Ct值,不依賴擴(kuò)增效率,能克服PCR 劑的影響,避免樣品間的交叉 問題,適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進(jìn)行 定量,如動(dòng)血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等;20微升體系生成100,000微滴。JUE對定量數(shù)字PCR解決方案
個(gè)體化診療通過檢測T790M位點(diǎn)突變情況,可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平臺(tái)ARMS檢測技術(shù)的靈敏度有限,沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準(zhǔn)確的檢測到T790M突變。這個(gè)時(shí)候dPCR技 術(shù)展現(xiàn)出了 的檢測精度,此外,dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了,可以監(jiān)控突變含量變化,做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。2.)基因表達(dá)分析伊馬替尼(Imatinib)可以有效幫助很多慢性髓細(xì)胞白血?。–ML)患者延長生存期,但是臨床上發(fā)現(xiàn),伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達(dá)量有很大的關(guān)系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行測定,結(jié)果檢測下限可以達(dá)到0.001%,顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢深圳國產(chǎn)數(shù)字PCR簡介率先行業(yè)的10萬個(gè)微滴數(shù),保證泊松分布所需要的充分的樣本量。
二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴(kuò)增子方法,在均相溶液中,當(dāng)擴(kuò)增引物增加時(shí),由于擴(kuò)增引物之間的相互作用,從而影響擴(kuò)增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴(kuò)增,將可降低引物間相互作用,提高擴(kuò)增效率。同時(shí)還可以實(shí)現(xiàn)對于少量模板的有效擴(kuò)增,得到更多的有效測序數(shù)據(jù)。CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證CRISPR-Cas9技術(shù)的發(fā)明,是基因編輯技術(shù)的一大突破,但如何驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)是否成功,仍需要高靈敏度的檢測方法,數(shù)字PCR技術(shù)可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團(tuán)隊(duì)發(fā)明了以CRISPR為基礎(chǔ)的SHERLOCK技術(shù)可以對核酸進(jìn)行高靈敏度的定性檢測,但精確定量評估時(shí)仍采取了數(shù)字PCR進(jìn)行確認(rèn)。
MicroDrop-100系統(tǒng)產(chǎn)品特點(diǎn):一、適應(yīng)性廣,靈活性高1、理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應(yīng)用2、樣本多樣性,樣本通量可達(dá)96個(gè)樣本,支持靈活設(shè)定3、開放式平臺(tái),支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。二、靈敏度高,準(zhǔn)確性高1、***定量——無需依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線2、采用微滴式技術(shù)高達(dá)100,000個(gè)的微滴3、線性范圍達(dá)到6個(gè)數(shù)量級,靈敏度高達(dá)萬分之一三、可分析復(fù)雜混合物1、準(zhǔn)確度不完全依賴于擴(kuò)增效率2、雙通道熒光檢測,支持EvaGreen染料及探針法3、支持多重?cái)?shù)字PCR四、操作簡單,使用方便1、全封閉防污染設(shè)計(jì),一鍵式自動(dòng)化操作。2、可選全中文分析軟件開放式平臺(tái),支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。
數(shù)字PCR(DigtalPCR)是一種核酸定量精密檢測的新興技術(shù)手段,于20世紀(jì)由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)反應(yīng)單元中有一個(gè)或沒有核酸。利用PCR擴(kuò)增的同時(shí),加入可檢測熒光。待擴(kuò)增結(jié)束時(shí),使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采集每個(gè)反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù),從而定量檢測樣本中的核酸濃度?;诜忠悍绞降牟煌?,數(shù)字PCR主要分為3種:微流體數(shù)字PCR(MicrofluidicdigitalPCR,mdPCR)、微滴數(shù)字PCR(DropletdigitalPCR,ddPCR)和芯片數(shù)字PCR(ChipdigitalPCR,cdPCR)。支持多重?cái)?shù)字PCR,可選全中文分析軟件。深圳國產(chǎn)數(shù)字PCR簡介
檢測數(shù)量一次可達(dá)96個(gè)樣品。JUE對定量數(shù)字PCR解決方案
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運(yùn)行生成400萬微滴,微滴體積達(dá)皮升級,檢測線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級,各項(xiàng)指標(biāo)均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動(dòng)的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。JUE對定量數(shù)字PCR解決方案
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