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相對于二代測序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢:
● 靈敏度可達到單個核酸分子:檢測限低至0.001%,主要系為數(shù)字PCR可以實現(xiàn)靶標(biāo)DNA/RNA的生物濃縮;
● 無需標(biāo)準(zhǔn)曲線活參照基因進行對比來測定核算量,可對靶分子起始量進行***定量,直接獨處DNA分子的個數(shù);
● 適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測:終點PCR檢測,不依賴Ct值,不依賴擴增效率,能克服PCR***劑的影響,避免樣品間的交叉***問題,適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進行***定量,如動血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等; 無創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速。寧波MicroDrop-100數(shù)字PCR簡介
產(chǎn)品特點無需依賴傳統(tǒng)熒光定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實現(xiàn)核酸的***定量。全封閉防污染設(shè)計,一鍵式自動化操作。采用主流可靠的解決方案,系統(tǒng)由微滴生成儀、微滴檢測儀、數(shù)據(jù)分析軟件組成,并可選配同品牌封膜儀、PCR儀等微滴生成采用油包水乳化微滴技術(shù),在微管道中利用氣壓驅(qū)動,2mins生成高達10萬個皮升級的微滴,高效高產(chǎn),支持多重數(shù)字PCR的開發(fā)。微滴生成芯片為高精度微流控芯片設(shè)計,三維微納防污染結(jié)構(gòu),一張芯片可同時處理8個樣本。微滴檢測使用雙通道熒光,支持EvaGreen染料法及探針法。檢測線性范圍達到6個數(shù)量級,基因突變檢測靈敏度高達0.01%。檢測通量高,可一次檢測高達96個樣本,支持靈活設(shè)定。全中文分析軟件,人性化界面設(shè)置,多種分析工具供用戶選擇。本系統(tǒng)為開放式平臺,可使用第三方PCR反應(yīng)液,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。上海廣東數(shù)字PCR哪家好正壓生成油包水的液滴。
數(shù)字PCR采用的策略概括起來非常簡單,就是“分而治之”(divide and conquer)[1],這種做法非常類似于計算機科學(xué)中的“分治算法”,將一個標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)分配到大量微小的反應(yīng)器中,在每個反應(yīng)器中包含或不包含一個或多個拷貝的目標(biāo)分子( DNA模板) ,實現(xiàn)“單分子模板PCR擴增”,擴增結(jié)束后,通過陽性反應(yīng)器的數(shù)目“數(shù)出”目標(biāo)序列的拷貝數(shù)。在實際的數(shù)字PCR實驗中,事實上是通過呈現(xiàn)兩種信號類型的反應(yīng)器比例和數(shù)目進行統(tǒng)計學(xué)分析,計算出原始樣本中的模板拷貝數(shù)。
研究方向病原微生物的檢測(***、細菌等)疾病預(yù)防控制中心、出入境檢驗檢疫局系統(tǒng)的實驗室目前主要采用基于TaqMan探針法的定量PCR體系對病原微生物進行核酸水平的檢測,而這些目前正在使用著的檢測體系可以無縫地轉(zhuǎn)移到QX200上,從而滿足該類實驗室對于檢測結(jié)果的要求:靈敏度更高、重復(fù)性更好、無需依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線的***定量結(jié)果,同時操作簡便。對于其他類型的研究實驗室,也可以利用ddPCR靈敏度高的特點,對各種樣品中的病原微生物展開***的研究。如HIV抗逆轉(zhuǎn)錄***治療過程中***殘留量的監(jiān)控;HBV耐藥突變的檢測;HCV的分子分型;抗甲氧西林金黃色葡萄球菌的院內(nèi)***監(jiān)控;環(huán)境微生物不同功能基因之間的連鎖分析等等。理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應(yīng)用。
**個體化診療
通過檢測T790M位點突變情況,可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導(dǎo)第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平臺ARMS檢測技術(shù)的靈敏度有限,沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準(zhǔn)確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技術(shù)展現(xiàn)出了****的檢測精度,此外,dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了,可以監(jiān)控突變含量變化,做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。
2.)基因表達分析
伊馬替尼(Imatinib)可以有效幫助很多慢性髓細胞白血?。–ML)患者延長生存期,但是臨床上發(fā)現(xiàn),伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物表達量有很大的關(guān)系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行測定,結(jié)果檢測下限可以達到0.001%,顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢 MicroDrop?數(shù)字PCR是擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀。無錫數(shù)字PCR現(xiàn)貨
基因表達差異的監(jiān)測。寧波MicroDrop-100數(shù)字PCR簡介
目前數(shù)字PCR技術(shù)在臨床領(lǐng)域已經(jīng)有著非常***且***地應(yīng)用,例如在病原微生物檢測中的應(yīng)用:HBV檢測、HIV檢測、甲型流感病毒檢測等;在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用:13/18/21號染色體三倍體檢測、遺傳性耳聾檢測、地中海貧血檢測及優(yōu)生五項的病毒檢測等;在**靶向***相關(guān)基因檢測中的應(yīng)用:肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測、結(jié)直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測、乳腺*HER2基因擴增檢測、神經(jīng)膠質(zhì)瘤IDH基因突變檢測等。以**靶向***相關(guān)基因檢測為例,在**形成的超早期,會出現(xiàn)**細胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細胞會釋放其DNA進入外周血,因此通過分析循環(huán)血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達到**早期篩查的目的。然而此時DNA含量極低,對檢測的靈敏度和精確性要求極高,目前只有數(shù)字PCR技術(shù)可以檢測出來。另外進行個體化***時,需要對基因組樣本進行分析,此時利用數(shù)字PCR技術(shù)也能**提高結(jié)果的可信性,進而建立合理***方案。寧波MicroDrop-100數(shù)字PCR簡介
浚和(上海)儀器有限公司是一家供應(yīng)國內(nèi)外先進儀器和設(shè)備的專業(yè)供應(yīng)商和服務(wù)商,致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來,持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業(yè)提供先進的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。
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