定量PCR和數(shù)字PCR的特點:
5. 目前定量PCR已經(jīng)能實現(xiàn)高通量樣品條件下的自動化操作。
6. 數(shù)字PCR在單分子層面上的***定量,可以徹底擺脫對標準曲線的依賴而直接給出靶序列的拷貝數(shù),提高了實驗結(jié)果在批內(nèi)和批間的穩(wěn)定性,甚至能用來對標準品進行定標。
7. 基于***定量的方式,數(shù)字PCR結(jié)果的高重復性和高精度可實現(xiàn)微小差異的基因表達分析,如等位基因的不平衡表達、單細胞基因表達分析、microRNA表達分析等等。所謂“微小差異”的標準一般而言是指表達水平的差異在2倍以內(nèi)。
8. 同等條件下,數(shù)字PCR在靈敏度方面擁有優(yōu)勢,使得該技術已成為**的液態(tài)活檢、病原微生物檢測、轉(zhuǎn)基因成分測定、宿主殘留DNA分析等的熱門技術。
二代測序輔助建庫
目前靶向測序建庫方法包括擴增子方法,在均相溶液中,當擴增引物增加時,由于擴增引物之間的相互作用,從而影響擴增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴增,將可降低引物間相互作用,提高擴增效率。同時還可以實現(xiàn)對于少量模板的有效擴增,得到更多的有效測序數(shù)據(jù)。
CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗證
CRISPR-Cas9技術的發(fā)明,是基因編輯技術的一大突破,但如何驗證實驗是否成功,仍需要高靈敏度的檢測方法,數(shù)字PCR技術可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團隊發(fā)明了以CRISPR為基礎的SHERLOCK技術可以對核酸進行高靈敏度的定性檢測,但精確定量評估時仍采取了數(shù)字PCR進行確認。 杭州微流控芯片數(shù)字PCR簡介采用微滴式技術高達100,000個的微滴。
定量PCR和數(shù)字PCR的特點:
1. 在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術平臺,已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測的某些應用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標準”。基礎研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標準實驗指南”。
2. 在定量PCR的各種應用中,基因表達分析(gene expression analysis)的應用比重約占七成,綜合各種因素來看,眼下定量PCR還是進行基因表達研究的理想手段。
3. 上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻與protocol的數(shù)目等等。
4. 就目前市場上已有的數(shù)字PCR設備來看,定量PCR在檢測的線性范圍上具有優(yōu)勢,意味著同一個run內(nèi)可對各種表達豐度的樣品進行分析。
MicroDrop-100系統(tǒng)產(chǎn)品特點:
一、適應性廣,靈活性高
1、理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應用
2、樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定
3、開放式平臺,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。
二、靈敏度高,準確性高
1、***定量——無需依賴標準曲線
2、采用微滴式技術高達100,000個的微滴
3、線性范圍達到6個數(shù)量級,靈敏度高達萬分之一
三、可分析復雜混合物
1、準確度不完全依賴于擴增效率
2、雙通道熒光檢測,支持EvaGreen染料及探針法
3、支持多重數(shù)字PCR
四、操作簡單,使用方便
1、全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。
2、可選全中文分析軟件 轉(zhuǎn)基因食品檢測(國標)。
我國***擁有完全自主知識產(chǎn)權的微滴式數(shù)字PCR儀MiniDrop?研發(fā)成功并投入生產(chǎn)。MiniDrop?創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領域的壟斷。永諾生物依以微滴式數(shù)字PCR儀為**,打造了全自動液體處理工作站、核酸提取試劑盒等創(chuàng)新產(chǎn)品,致力于解決**、***領域的精細診斷這是國內(nèi)***微滴式數(shù)字PCR檢測系統(tǒng),能廣泛應用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領域,未來,采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進行低成本、高靈敏、快速的無創(chuàng)檢測成為可能。支持多重數(shù)字PCR,可選全中文分析軟件。杭州MicroDrop-100數(shù)字PCR簡介
數(shù)字PCR技術與高通量的二代測序技術,共同組成液體活檢領域的兩大利器。廣州MicroDrop-100數(shù)字PCR品牌
數(shù)字PCR檢測及分析原理在上世紀90年代就被提出來了,但是無奈受限于當時的技術條件,樣本稀釋及分配都是靠手工來完成的,受到很多因素的干擾和限制;并且結(jié)果分析對于研究者來說也十分枯燥與繁瑣,因此在很長一段時間dPCR發(fā)展停滯不前。后來由于微流控技術與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過程中的幾個關鍵技術問題,推動了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。
目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式,基本可分為三大類,一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片;第二種是使用微反應室/孔板;第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式,其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或者微滴當中,每個反應器的核酸模板數(shù)少于1或者等于1。經(jīng)過PCR擴增之后,有一個核酸分子的模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應器的體積,可以推算出原始溶液的核酸濃度。 廣州MicroDrop-100數(shù)字PCR品牌
浚和(上海)儀器有限公司是一家供應國內(nèi)外先進儀器和設備的專業(yè)供應商和服務商,致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來,持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業(yè)提供先進的產(chǎn)品和專業(yè)的服務。
浚和在不斷引進國內(nèi)外先進儀器設備的同時,結(jié)合行業(yè)和市場需求,加強和客戶之間的溝通,并與國際上多家**儀器設備制造商保持著長期穩(wěn)定的合作關系,不定期地與合作商進行技術交流,努力加強自身技術力量。公司配備了數(shù)名有著多年行業(yè)經(jīng)驗的技術人員,依靠雄厚的技術實力、科學合理的配置方案、專業(yè)的安裝調(diào)試和周到的售后服務,得到了廣大用戶的支持與信賴。
公司主要經(jīng)營產(chǎn)品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業(yè)的技術服務,如設備的維護、驗證等。
浚和儀器將始終以行業(yè)特點為立足點,以客戶需求為導向,不斷地提高自身專業(yè)技術能力,不停地完善客戶服務質(zhì)量,在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神,力求與客戶共同進步,為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。