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微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)在傳統(tǒng)的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理,即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬個納升級的微滴,其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴增后,逐個對每個微滴進行檢測,有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。
與傳統(tǒng)PCR相比所具有的優(yōu)勢
不依賴Ct值或內(nèi)參基因,即可確定低至單拷貝的待檢靶分子的***數(shù)目。微滴技術(shù)讓數(shù)字PCR更低成本,且更實用。
雙通道熒光檢測,支持EvaGreen染料及探針法。上海JUE對定量數(shù)字PCR如何選型
研究方向
病原微生物的檢測(***、細菌等)
疾病預(yù)防控制中心、出入境檢驗檢疫局系統(tǒng)的實驗室目前主要采用基于TaqMan探針法的定量PCR體系對病原微生物進行核酸水平的檢測,而這些目前正在使用著的檢測體系可以無縫地轉(zhuǎn)移到QX200上,從而滿足該類實驗室對于檢測結(jié)果的要求:靈敏度更高、重復(fù)性更好、無需依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線的***定量結(jié)果,同時操作簡便。
對于其他類型的研究實驗室,也可以利用ddPCR靈敏度高的特點,對各種樣品中的病原微生物展開***的研究。如HIV抗逆轉(zhuǎn)錄***治療過程中***殘留量的監(jiān)控;HBV耐藥突變的檢測;HCV的分子分型;抗甲氧西林金黃色葡萄球菌的院內(nèi)***監(jiān)控;環(huán)境微生物不同功能基因之間的連鎖分析等等。 廣州廣州永諾數(shù)字PCR如何選型開放式平臺,支持用戶自行開發(fā)試劑、產(chǎn)品。
與常規(guī)PCR方法相比,數(shù)字PCR有如下優(yōu)勢:
1、能夠***定量:常規(guī)PCR定量需要制定已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA曲線,但是由于待檢樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線不在統(tǒng)一體系,條件上會存在差異,另外加上PCR擴增效率的差異從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而數(shù)字PCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線和擴增動力學(xué)影響,可進行***定量。
2、樣本需求量低:適用于珍貴樣本或核酸降解嚴(yán)重的樣本。
3、靈敏度高:數(shù)字PCR是將傳統(tǒng)PCR反應(yīng)體系分割成數(shù)萬個**PCR反應(yīng),這些反應(yīng)可以精確地檢測很小的目的片段差異、單拷貝甚至低濃度的混雜樣本。且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。
4、高耐受性:由于目的序列被分配到多個**反應(yīng)體系中,***降低了背景信號和***物對反應(yīng)的干擾,擴增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。
定量PCR和數(shù)字PCR的特點:
1. 在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術(shù)平臺,已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測的某些應(yīng)用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”?;A(chǔ)研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實驗指南”。
2. 在定量PCR的各種應(yīng)用中,基因表達分析(gene expression analysis)的應(yīng)用比重約占七成,綜合各種因素來看,眼下定量PCR還是進行基因表達研究的理想手段。
3. 上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻與protocol的數(shù)目等等。
4. 就目前市場上已有的數(shù)字PCR設(shè)備來看,定量PCR在檢測的線性范圍上具有優(yōu)勢,意味著同一個run內(nèi)可對各種表達豐度的樣品進行分析。
MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR 應(yīng)用范圍如下:
a. 動植物檢驗檢疫,動物源性分析、極微量病原菌檢測定量分析、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測;
b. 降低篩查成本、縮短檢測周期,適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風(fēng)險評估;適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測等;適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導(dǎo);
c. 可用于DNA甲基化的檢測、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測等。
d.基因表達差異監(jiān)測單細胞研究:測序、PCR
e.無創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速、傳染性疾?。篐BV、HIV、COVID-19 定量
2個光電倍增管(PMT),靈敏度及增益優(yōu)于MPCC或CCD。廣州廣州永諾數(shù)字PCR如何選型
單細胞研究:測序、PCR。上海JUE對定量數(shù)字PCR如何選型
MiniDrop數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MD Microchip微流控芯片及MD Plotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運行生成400萬微滴,微滴體積達皮升級,檢測線性范圍達到5個數(shù)量級,各項指標(biāo)均超越國內(nèi)外的主流產(chǎn)品。
MiniDrop創(chuàng)新性采用高壓驅(qū)動的方法將樣本分割成50萬份,打破了國外廠商在微滴式數(shù)字PCR領(lǐng)域的壟斷。 上海JUE對定量數(shù)字PCR如何選型
浚和(上海)儀器有限公司是一家供應(yīng)國內(nèi)外先進儀器和設(shè)備的專業(yè)供應(yīng)商和服務(wù)商,致力于為客戶提供專業(yè)的定制化解決方案。多年來,持續(xù)為醫(yī)藥、化工、高校、科研單位、檢測院等多個行業(yè)提供先進的產(chǎn)品和專業(yè)的服務(wù)。
浚和在不斷引進國內(nèi)外先進儀器設(shè)備的同時,結(jié)合行業(yè)和市場需求,加強和客戶之間的溝通,并與國際上多家**儀器設(shè)備制造商保持著長期穩(wěn)定的合作關(guān)系,不定期地與合作商進行技術(shù)交流,努力加強自身技術(shù)力量。公司配備了數(shù)名有著多年行業(yè)經(jīng)驗的技術(shù)人員,依靠雄厚的技術(shù)實力、科學(xué)合理的配置方案、專業(yè)的安裝調(diào)試和周到的售后服務(wù),得到了廣大用戶的支持與信賴。
公司主要經(jīng)營產(chǎn)品包括:等離子清洗機、真空泵、噴霧干燥器、數(shù)字PCR、高壓滅菌鍋、培養(yǎng)箱、切片機、水分測定儀、激光粒度儀、光譜儀、溫濕度記錄儀等,目前主要合作品牌有:日本雅馬拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、廣州永諾 、日本KEM等。同時,公司還提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù),如設(shè)備的維護、驗證等。
浚和儀器將始終以行業(yè)特點為立足點,以客戶需求為導(dǎo)向,不斷地提高自身專業(yè)技術(shù)能力,不停地完善客戶服務(wù)質(zhì)量,在發(fā)展中保持創(chuàng)新的精神,力求與客戶共同進步,為行業(yè)的發(fā)展作出不懈的努力。