自動細胞計數(shù)確保結果的再現(xiàn)性
圖四::為了驗證fluidlab R-300細胞計數(shù)器的可重復性，在10天內測量多個樣品，每天兩次(上午和下午)，每次兩次重復。對于每個細胞系(HeLa, PBMCs和酵母)，測試了三種不同的濃度。實心符號表示流體實驗室R-300在同(N=4)重復的平均值。誤差線表示標準差。競品結果用虛線表示。
表1:3種不同細胞類型在3種不同標稱濃度下10天的批間變異情況總結(上午和下午重復測量，N=40)，每個樣品均使用fluidlab R-300和競品進行自動細胞計數(shù)。fluidlab R-300相對較低的變化系數(shù)(CV)表明，在所有測試的細胞類型和濃度中，細胞計數(shù)結果可重復是非常好的。 fluidlabR-300便攜式細胞計數(shù)儀的參數(shù)。重慶品質fluidlabR-300便攜式細胞計數(shù)儀設備制造
fluidlabr-300使用全息顯微技術和機器學習算法獲得準確可靠的細胞計數(shù)
介紹方法
細胞樣品制備hela細胞在DMEM中培養(yǎng)，通過胰蛋白酶化從瓶的表面分離。為了在細胞計數(shù)驗證過程中盡量減少樣品的變異，HeLa細胞以~106細胞/mL的濃度在冰凍培養(yǎng)基(10%DMSO,20%FBS,DMEM細胞培養(yǎng)基)中小等分冷凍，并在-20°C保存。
同樣，酵母細胞(釀酒酵母菌)在酵母培養(yǎng)基(NaCI?蛋白胨緩沖液和蔗糖)中，在20℃下生長2天，以~107個細胞/mL的濃度在15%甘油(v/v)的水中小等份凍存在-20℃。 北京推薦fluidlabR-300便攜式細胞計數(shù)儀成交價R-300便攜式分光光度代理商是哪家？
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在每次測試之前，凍存的海拉細胞和酵母細胞被快速解凍，用PBS洗滌，并離心。丟棄上清液，將細胞重懸于少量HeLa或酵母細胞培養(yǎng)基中，HeLa的濃度為~107細胞/mL，酵母細胞為~108細胞/mL。標稱細胞濃度是通過血細胞計人工計數(shù)細胞量并使用細胞培養(yǎng)基配備稀釋液而得來的。
驗證實驗中使用的人體外周血單核細胞（PBMC）樣本是通過Ficoll-Paque密度離心法從健康捐獻者的白膜層中分離出來的，以確保從樣本中去除紅細胞(RBCs)。將細胞重懸在少量PBS中，以產生約107個細胞/mL的濃度。為了保證細胞活力，樣品在4°C保存，直到當天測試時(離心分離后不超過6小時)。
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校準曲線、細胞裂解和蛋白含量測定
使用牛血清白蛋白（SigmaMerck，德國）在現(xiàn)成的（ready-to-use配置好的）Bradford溶液中制備用于測定蛋白表達總量的校準曲線，該溶液也購自Sigma（德國）。在Triton-X緩沖液中進行細胞裂解以產生可溶性膜組分并隨后進行超聲處理。然后通過分光光度法測量上清液的蛋白質產量和正確的血紅素摻入。 德國anvajo fluidlab R-300便攜式分光光度計。
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luidlab R-300細胞計數(shù)器覆蓋了很大的濃度范圍
fluidlabR-300可以自動計數(shù)細胞的濃度范圍(104-107細胞/mL)。為評估線性性能，與競品相比較，對三種不同細胞類型(HeLa,PBMCs，酵母)的樣品進行連續(xù)稀釋，覆蓋到規(guī)定的濃度范圍進行測試。圖2顯示了使用fluidlabR-300獲得的三種不同細胞系的細胞計數(shù)，并與競品進行了比較。高線性度(如線性回歸的R2值所示)表明，fluidlabR-300細胞計數(shù)器在寬線性工作范圍可穩(wěn)定地檢測和計數(shù)不同類型的細胞。此外，用fluidlabR-300測得的細胞總數(shù)與競品相當(線性擬合的斜率接近1)。圖二::fluidlabR-300在大濃度范圍內的不同細胞類型具有高線性。為了評估fluidlabR-300與競品比較的線性性能，對三個重復的不同濃度的HeLa細胞，PBMCs和酵母在三個不同的天進行了測量。所有的測量結果用一個標稱濃度表示，在所有重復中取平均值(N=9)，并計算標準差以評估變異性。競品執(zhí)行同樣操作。誤差線表示標準差。 重慶品質fluidlabR-300便攜式細胞計數(shù)儀設備制造
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