自動細胞計數(shù)確保結(jié)果的再現(xiàn)性
為了確保實驗和制造過程的可重現(xiàn)性,自動細胞計數(shù)具有高度可重復性和微小的易變性是至關(guān)重要的。為了評估fluidlabR-300細胞計數(shù)器的重復性,我們在單獨的10天以三種不同濃度測試了三種不同的細胞類型(HeLa,PBMCs,酵母)。為了盡量減少實驗條件的潛在變化,我們使用了酵母和HeLa細胞的冷凍儲存,同時每天從血液中新鮮分離PBMCs。
圖4顯示了fluidlab R-300和競品在10天內(nèi)對三種被測試細胞系的測量結(jié)果和濃度。每天的變化可反映實驗條件的差異,并且兩種細胞計數(shù)方法都是一樣的。表1報告了所有被測試細胞系和濃度在不同天和不同時間的批間重復性??偟膩碚f,fluidlab R-300的批間變化系數(shù)(CV)比競品要小,這突出表明使用fluidlab R-300獲得的細胞總數(shù)在不同的天數(shù)內(nèi)可重復是非常好的。
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用fluidlabR-300計數(shù)HeLa細胞(左),新鮮分離的外周血單核細胞(中)和酵母細胞(右)。全息顯微鏡圖像使研究人員可根據(jù)綠色方框高亮顯示檢測到的細胞來核實細胞計數(shù)結(jié)果。此外,細胞形態(tài)和樣品的均勻性程度以及樣品中是否存在碎片或污染都可以進行評估。為了看得更清楚,這里只顯示一小部分圖像,而不是整個視野(5.3mm2)。
為了突出fluidlab R-300在自動細胞計數(shù)方面的多功能性,我們在三種不同形態(tài)和大小的細胞類型上測試了fluidlab R-300的性能(圖1)。HeLa細胞是個在生物學和臨床研究中仍然普遍使用的不朽人類細胞系。根據(jù)不同的培養(yǎng)條件,HeLa細胞的直徑通常為20 - 40 μm范圍內(nèi)。相比之下,外周血單核細胞(PBMCs)是小的人體細胞之一,直徑約為7 - 10 μm。PBMCs是一種常見的原代細胞源,用于臨床診斷和免疫學的研究。使用傳統(tǒng)的細胞計數(shù)方法來精確量化原代細胞樣本的細胞濃度是具有挑戰(zhàn)性的,因為它們通常含有不同的細胞類型及細胞碎片。
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光譜分析:
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Datalab桌面軟件:
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?通過WIFI或熱點連接fluidlabR-300
?可訪問和導出使用fluidlabR-300獲取的任何數(shù)據(jù)
?輕松導出測量結(jié)果,用于數(shù)據(jù)存儲和后期處理
?可進行固件程序升級
fluidlab R-300光譜儀性能報告
連續(xù)稀釋的線性測量結(jié)果繪制在下圖中(圖2)。為此目的,用fluidlabR-300和世界上常用的光譜儀對臺盼藍(細胞染色常用染料)的連續(xù)稀釋進行了測量。從曲線進展可以明顯看出,anvajofluidlabR300在消光范圍1到大約2.4(R2=0.998和R2=0.962)上明顯比競品更線性。儀器的測量結(jié)果在較寬的數(shù)值范圍內(nèi)越線性,在較高濃度范圍內(nèi)評估的測定結(jié)果就越精確。圖2:anvajofluidlabR-300和使用的競品之間測定臺盼藍連續(xù)稀釋的線性比較。在研究中的數(shù)值范圍內(nèi),fluidlabR-300的線性度高于競品。 德國anvajo fluidlab R-300便攜式OD600細菌細胞濃度測定儀。
fluidlab R-300細胞計數(shù)的準確性和精確性
圖三::為了確定fluidlab R-300細胞計數(shù)的準確性和精確度,每個樣本在血細胞計中人工計數(shù)三次以確定標準值,然后使用自動細胞計數(shù)器計數(shù)10次。我們對3種不同細胞系的3個不同濃度均用fluidlab R-300和競品進行了測定。對于給定濃度的所有測量結(jié)果取平均值(N=10),并計算標準偏差以評估隨機性,圖中短線表示標準偏差。
細胞計數(shù)器的準確度(也稱為真實度)描述了測量值與“標準”或已知值的接近程度,而精確度(或稱精密度)指的是重復測量值彼此之間的接近程度。對于細胞計數(shù),使用血細胞計顯微鏡下人工計數(shù)通常被認為是標準的參考方法。然而,人工計數(shù)也容易出錯、耗時,并且高度依賴于用戶的專業(yè)水平。
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fluidlabR-300便攜式細胞計數(shù)儀/光譜儀將成熟的光譜儀與自動細胞計數(shù)儀相結(jié)合,可以執(zhí)行各種分析,例如吸光度、散射光和時間序列測量、自動細胞計數(shù)和免染色存活力測量。直觀的操作和精確的測量使fluidlabR-300成為未來的實驗室儀器。
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