fluidlabR-300細(xì)菌生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
材料和方法
用pLEMO質(zhì)粒轉(zhuǎn)化Lemo21大腸桿菌細(xì)胞,該質(zhì)粒含有用于陰性選擇的氯霉素抗性盒以及由上游LacOperon控制的目的蛋白的基因。我們選擇了細(xì)胞色素P450酶作為模型酶,因?yàn)檫@些酶對(duì)芳香化合物的羥基化具有有趣的催化作用。為了獲得充分的表達(dá),將FeCl3和δ-氨基乙酰丙酸添加到LB生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,以確保血紅素基團(tuán)的正確結(jié)合,從而形成全息復(fù)合物。
德國(guó)anvajo fluidlab R-300便攜式生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定儀 R-300便攜式OD600細(xì)菌細(xì)胞濃度測(cè)定儀,細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。上海特制fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)確保結(jié)果的再現(xiàn)性
圖四::為了驗(yàn)證fluidlab R-300細(xì)胞計(jì)數(shù)器的可重復(fù)性,在10天內(nèi)測(cè)量多個(gè)樣品,每天兩次(上午和下午),每次兩次重復(fù)。對(duì)于每個(gè)細(xì)胞系(HeLa, PBMCs和酵母),測(cè)試了三種不同的濃度。實(shí)心符號(hào)表示流體實(shí)驗(yàn)室R-300在同(N=4)重復(fù)的平均值。誤差線(xiàn)表示標(biāo)準(zhǔn)差。競(jìng)品結(jié)果用虛線(xiàn)表示。
表1:3種不同細(xì)胞類(lèi)型在3種不同標(biāo)稱(chēng)濃度下10天的批間變異情況總結(jié)(上午和下午重復(fù)測(cè)量,N=40),每個(gè)樣品均使用fluidlab R-300和競(jìng)品進(jìn)行自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)。fluidlab R-300相對(duì)較低的變化系數(shù)(CV)表明,在所有測(cè)試的細(xì)胞類(lèi)型和濃度中,細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果可重復(fù)是非常好的。 陜西智能化fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀性能德國(guó)anvajo fluidlab R-300便攜式全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。
德國(guó)anvajo fluidlab R-300手持式分光光度計(jì)
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀:
基于使用諾貝爾物理獎(jiǎng)獲獎(jiǎng)技術(shù)--數(shù)字全息影像顯微技術(shù)(DigitalHolographicMicroscopy)無(wú)需染色即可進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和存活率分析
?20秒內(nèi)自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù),可應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、生物樣本庫(kù)、質(zhì)量控制,等適用于細(xì)胞直徑范圍:細(xì)胞計(jì)數(shù):3-80um;存活率分析:8-80um
?自動(dòng)圖像識(shí)別和對(duì)焦
?具有高統(tǒng)計(jì)性的大視場(chǎng)
?所需樣品體積小(4-20μl
?針對(duì)不同細(xì)胞計(jì)數(shù)樣品提供多種規(guī)格的專(zhuān)屬細(xì)胞計(jì)數(shù)板
fluidlabr-300使用全息顯微技術(shù)和機(jī)器學(xué)習(xí)算法獲得準(zhǔn)確可靠的細(xì)胞計(jì)數(shù)
在每次測(cè)試之前,凍存的海拉細(xì)胞和酵母細(xì)胞被快速解凍,用PBS洗滌,并離心。丟棄上清液,將細(xì)胞重懸于少量HeLa或酵母細(xì)胞培養(yǎng)基中,HeLa的濃度為~107細(xì)胞/mL,酵母細(xì)胞為~108細(xì)胞/mL。標(biāo)稱(chēng)細(xì)胞濃度是通過(guò)血細(xì)胞計(jì)人工計(jì)數(shù)細(xì)胞量并使用細(xì)胞培養(yǎng)基配備稀釋液而得來(lái)的。
驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中使用的人體外周血單核細(xì)胞(PBMC)樣本是通過(guò)Ficoll-Paque密度離心法從健康捐獻(xiàn)者的白膜層中分離出來(lái)的,以確保從樣本中去除紅細(xì)胞(RBCs)。將細(xì)胞重懸在少量PBS中,以產(chǎn)生約107個(gè)細(xì)胞/mL的濃度。為了保證細(xì)胞活力,樣品在4°C保存,直到當(dāng)天測(cè)試時(shí)(離心分離后不超過(guò)6小時(shí))。 R-300便攜式分光光度代理商是哪家?
德國(guó)anvajo fluidlab R-300便攜式生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定儀
結(jié)果
生長(zhǎng)曲線(xiàn)
生長(zhǎng)曲線(xiàn)如圖1所示,并顯示出堅(jiān)實(shí)的線(xiàn)性生長(zhǎng)行為,直到OD約為0.8,此時(shí)系統(tǒng)收斂到飽和狀態(tài)。圖1:大腸桿菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)(在0.3消光值時(shí)接種IPTG)
校準(zhǔn)
曲線(xiàn)使用BSA和制造商的曲線(xiàn)制備說(shuō)明,通過(guò)裝置上應(yīng)用程序“校準(zhǔn)曲線(xiàn)”計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。得到0.98的R2(圖2)
圖2:FluidlabR-300顯示校準(zhǔn)曲線(xiàn)(雙倍)
生長(zhǎng)曲線(xiàn)
接種過(guò)夜預(yù)培養(yǎng)物后,在37°C、持續(xù)振蕩90小時(shí)的條件下監(jiān)測(cè)大腸桿菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)。使用fluidlab的適配器3和600nm的固定波長(zhǎng)。從預(yù)實(shí)驗(yàn)中表明,線(xiàn)性相位從0.3開(kāi)始,因此此時(shí)可以用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)。 使用 anvajo datalab有哪些要求?上海特制fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的注意事項(xiàng)。上海特制fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
luidlab R-300細(xì)胞計(jì)數(shù)器覆蓋了很大的濃度范圍
fluidlabR-300可以自動(dòng)計(jì)數(shù)細(xì)胞的濃度范圍(104-107細(xì)胞/mL)。為評(píng)估線(xiàn)性性能,與競(jìng)品相比較,對(duì)三種不同細(xì)胞類(lèi)型(HeLa,PBMCs,酵母)的樣品進(jìn)行連續(xù)稀釋?zhuān)采w到規(guī)定的濃度范圍進(jìn)行測(cè)試。圖2顯示了使用fluidlabR-300獲得的三種不同細(xì)胞系的細(xì)胞計(jì)數(shù),并與競(jìng)品進(jìn)行了比較。高線(xiàn)性度(如線(xiàn)性回歸的R2值所示)表明,fluidlabR-300細(xì)胞計(jì)數(shù)器在寬線(xiàn)性工作范圍可穩(wěn)定地檢測(cè)和計(jì)數(shù)不同類(lèi)型的細(xì)胞。此外,用fluidlabR-300測(cè)得的細(xì)胞總數(shù)與競(jìng)品相當(dāng)(線(xiàn)性擬合的斜率接近1)。圖二::fluidlabR-300在大濃度范圍內(nèi)的不同細(xì)胞類(lèi)型具有高線(xiàn)性。為了評(píng)估fluidlabR-300與競(jìng)品比較的線(xiàn)性性能,對(duì)三個(gè)重復(fù)的不同濃度的HeLa細(xì)胞,PBMCs和酵母在三個(gè)不同的天進(jìn)行了測(cè)量。所有的測(cè)量結(jié)果用一個(gè)標(biāo)稱(chēng)濃度表示,在所有重復(fù)中取平均值(N=9),并計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差以評(píng)估變異性。競(jìng)品執(zhí)行同樣操作。誤差線(xiàn)表示標(biāo)準(zhǔn)差。 上海特制fluidlabR-300便攜式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
上海怡賽科學(xué)儀器有限公司是一家從事大龍,洗瓶機(jī),厭氧工作站,旋光儀研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售及售后的貿(mào)易型企業(yè)。公司坐落在滬松公路2299號(hào)蘇式商務(wù)大樓409室,成立于2014-07-08。公司通過(guò)創(chuàng)新型可持續(xù)發(fā)展為重心理念,以客戶(hù)滿(mǎn)意為重要標(biāo)準(zhǔn)。怡賽目前推出了大龍,洗瓶機(jī),厭氧工作站,旋光儀等多款產(chǎn)品,已經(jīng)和行業(yè)內(nèi)多家企業(yè)建立合作伙伴關(guān)系,目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域。我們堅(jiān)持技術(shù)創(chuàng)新,把握市場(chǎng)關(guān)鍵需求,以重心技術(shù)能力,助力儀器儀表發(fā)展。怡賽為用戶(hù)提供真誠(chéng)、貼心的售前、售后服務(wù),產(chǎn)品價(jià)格實(shí)惠。公司秉承為社會(huì)做貢獻(xiàn)、為用戶(hù)做服務(wù)的經(jīng)營(yíng)理念,致力向社會(huì)和用戶(hù)提供滿(mǎn)意的產(chǎn)品和服務(wù)。大龍,洗瓶機(jī),厭氧工作站,旋光儀產(chǎn)品滿(mǎn)足客戶(hù)多方面的使用要求,讓客戶(hù)買(mǎi)的放心,用的稱(chēng)心,產(chǎn)品定位以經(jīng)濟(jì)實(shí)用為重心,公司真誠(chéng)期待與您合作,相信有了您的支持我們會(huì)以昂揚(yáng)的姿態(tài)不斷前進(jìn)、進(jìn)步。