生命科學試劑是隨著生命科學的發(fā)展而發(fā)展起來的一大類化學試劑,有多種種類。其中的蛋白酶K能水解消化蛋白質,尤其是組蛋白與DNA結合。尿再生和SDS穩(wěn)定。通常的工作濃度為50-100μg/ml,推薦的反應緩沖液為50mMTris-HCl(pH7.5)、10mMCaCl2。十二烷基硫酸鈉溶解了細胞膜上的脂質和蛋白質,從而溶解了膜蛋白,使細胞膜破裂,分解了細胞內的蛋白,SDS也與蛋白質結合而沉淀。異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,多用于藍白斑篩選和IPTG誘導的細菌中的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結構類似,因此它和乳糖一樣,能與乳糖操縱元的阻滯蛋白結合,改變其空間構像,解聚成單體,失去與操縱子特異性結合的能力,從而解除阻滯蛋白的作用,使其后基因轉錄合成利用乳糖的酶。不像乳糖,IPTG沒有被β半乳糖苷酶水解。生命科學試劑根據(jù)標準,質量要求一般為分析純以上抗體效價。因卡磷酸二鈉 CAS:138330-18-4
在生命科學試劑中,固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細口瓶中(或滴瓶中),見光易分解的試劑(如硝酸銀)應裝在棕色瓶中,每一種試劑都貼有標簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。(實驗室分裝時,固體只標明試劑名稱,液體還須注名明濃度)。由于生命科學面廣、發(fā)展快,因此該類試劑品種繁多、性質復雜。主要有電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標記試劑、組織化學試劑、透變劑和致病物質、殺蟲劑、培養(yǎng)劑、緩沖劑、電鏡試劑、蛋白質和核酸沉淀劑、縮合劑、超濾膜、臨床診斷試劑、染色劑、抗氧化劑、防霉劑、去垢劑和表面活性劑、生化標準品試劑、生化質控品試劑、分離材料等等。AZ 12216052 CAS:1290628-31-7每種生命科學試劑都有一定的空白吸光度范圍。
生命科學試劑的選擇取決于樣品大小、運行時間和后電泳過程,其中Tris-醋酸鹽EDTA(TAE)和Tris-硼酸EDTA(TBE)是較常用的兩種緩沖液。檢測dsDNA和RNA,一般在變性瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠的條件下進行。在緩沖液中加入變性劑會破壞核酸之間的氫鍵,減少二級結構的生成。常見的變性劑有:瓊脂糖凝膠,磷酸鈉緩沖液中的乙二醛和DMSO、NaOH-EDTA緩沖液、MOPS緩沖液中的甲醛或甲酰胺等;聚丙烯酰胺凝膠,TBE緩沖液中的尿素。使用時可取下凝膠放入染色盒中用蒸餾水沖洗2次;固定:將膠放于固定液中振蕩,固定10分鐘;氧化:倒出固定液,水洗后用1%硝酸氧化3分鐘,用蒸餾水漂洗2次,每次2s;染色:放入銀染液中避光染色30分鐘。密度成分幫助樣品沉入凝膠孔中的金屬螯合劑。使用熒光核酸染色劑,是核酸內染色的常用方法。
生命科學試劑空白吸光度限值,常作為程序參數(shù)輸入儀器,如經核查超限,儀器會自動報警,提示更換生命科學試劑。需要指出的是,還原型輔酶I(或II)等投料量不足或劣質的原料,往往需要加大用量,才使“表觀”吸光度上升,湊合過生命科學試劑空白核對的“關”,其后果為線性范圍變窄現(xiàn)象:高值測不高。原因:生產生命科學試劑時有效成分投料量不足;生命科學試劑成份穩(wěn)定性較差。靈敏度變低現(xiàn)象:酶促反應速度曲線斜率下降,測定結果有嚴重系統(tǒng)誤差。原因:生命科學試劑底物濃度不足。低值偏高現(xiàn)象:生命科學試劑空白的變化曲線(吸光度VS時間)明顯波動。原因:生命科學試劑自身不穩(wěn)定,自行分解;工具酶純度不夠,雜酶含量超限,導致干擾作用。生命科學試劑的質控要求為清潔無污漬。
生命科學試劑空白吸光度是反映生命科學試劑質量的指標之一,但不能反映生命科學試劑質量的全部。生命科學試劑成份、純度、用量及穩(wěn)定性,才是保證生命科學試劑質量的關鍵所在。目前市售的一些生命科學試劑具有抗干擾作用,主要是通過加入抗干擾物質或使用新的色素原以避免內源性物質的干擾。但值得注意的是:一些試驗項目在消除內源性物質干擾的同時,會帶來樣品含量真實性的變化。每種生命科學試劑都有一定的空白吸光度范圍,生命科學試劑空白吸光度的改變往往提示該生命科學試劑的變質;如利用Trinder反應為原理的檢測生命科學試劑會因含酚類物質被氧化為醌而變?yōu)榧t色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉肽酶、淀粉酶等檢測生命科學試劑會因基質分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。生命科學試劑可供醫(yī)療系統(tǒng)中的臨床病理診斷、生化診斷、液晶診斷。乙二胺四乙酸二鉀 CAS:2001-94-7
在生命科學試劑中,凍干過程的重要參數(shù)主要為凍干時間、凍干壓力、凍干溫度。因卡磷酸二鈉 CAS:138330-18-4
對于生命科學試劑的貯存,水封存也可使某些容易揮發(fā)的試劑減少損耗。如:在裝有液態(tài)溴、二硫化碳的試劑中加一薄層水,就能較大減少揮發(fā)損失和空氣污染。實驗室中無機、有機試劑種類繁多,性質各異,應注意合理分類存放。有機物、無機物分開,普通藥品和危險的分開,氧化劑和易燃物、還原劑分解、易揮發(fā)性酸和堿分開。做到這幾個分開,一可避免藥品間的不良影響,二則即使有意外事故發(fā)生,也能免除藥品的相互作用,而產生更大的隱患。避光措施通常采用遮光性能較好的深棕色試劑瓶。將試劑放在暗處或遮光的專門試劑柜中。也可用照相紙的黑色厚紙包裹試劑瓶,如:濃硝酸、碘化鉀、碘化鈉、氯類化的貯存就是如此。因卡磷酸二鈉 CAS:138330-18-4