生命科學(xué)試劑中的吡啶橙可使壞死細(xì)胞黃熒光減弱或消失,形成濃密的黃綠色熒光或黃綠色碎片;吡啶橙AO常與溴化乙啶EB混合使用,由于EB只對(duì)死亡細(xì)胞進(jìn)行染色而產(chǎn)生桔黃色熒光,因此可以區(qū)分正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。也可作為移碼突變誘變劑,可鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間,從而在DNA復(fù)制過程中,使DNA鏈上的一個(gè)堿基增加或減少,從而引起移碼突變。吖啶橙染液是有毒的,操作時(shí)要戴手套,要避光。在實(shí)驗(yàn)室中,二甲基亞砜常被用來(lái)做液相色譜溶劑,同時(shí)在紫外光消光值的測(cè)定中也被用作參照物,可溶于所有烷烴和烯烴。N[三(羥甲基)甲基]甘氨酸,常見的電泳體系為Tris-甘氨酸體系;Tris-Tricine電泳用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白質(zhì)的電泳,分離效果更好。生命科學(xué)試劑在分裝前、分裝中、分裝末均需對(duì)分裝量進(jìn)行校驗(yàn)。洛美沙星 CAS:98079-51-7
子平時(shí)保存生命科學(xué)試劑時(shí),要經(jīng)常檢查危險(xiǎn)物品,防止因變質(zhì)、分解造成自燃、自爆事故。對(duì)劇毒物品的容器、變質(zhì)料、廢渣及廢水等應(yīng)予妥善處理。管理人員要建立化學(xué)藥品各類帳冊(cè),藥品購(gòu)進(jìn)后,及時(shí)驗(yàn)收、記帳,使用后及時(shí)消帳,掌握藥品的消耗和庫(kù)存數(shù)量;不外借(給)藥品,特殊需要借(給)藥品時(shí),必須經(jīng)院長(zhǎng)批準(zhǔn)簽字。取用生命科學(xué)試劑前應(yīng)檢查生命科學(xué)試劑的外觀,注意其生產(chǎn)日期,不得使用失效的生命科學(xué)試劑。如懷疑有變質(zhì)可能時(shí),應(yīng)經(jīng)檢驗(yàn)合格后再用。使用中要注意保護(hù)瓶上的標(biāo)簽,如有脫落應(yīng)及時(shí)貼好,如有損毀則應(yīng)照原樣補(bǔ)全并貼牢。Miglitol CAS:72432-03-2生命科學(xué)試劑中的吡啶橙可使壞死細(xì)胞黃熒光減弱或消失,形成濃密的黃綠色熒光或黃綠色碎片。
生命科學(xué)試劑中的硅烯醇醚在mCPBA或二環(huán)氧乙烷中被環(huán)氧化后,能夠快速進(jìn)行重排,得到α-硅氧基酮。該反應(yīng)經(jīng)常被用于在α位選擇性導(dǎo)入羥基。由于m-CPBA中弱的O-O鍵可以與多電子的底物反應(yīng)將氧原子轉(zhuǎn)移到底物上。除了醛酮、烯烴,m-CPBA還可將一級(jí)胺被氧化成相應(yīng)的硝基化合物,二級(jí)胺氧化成羥胺并產(chǎn)生副產(chǎn)物硝酮,亞磷酸鹽氧化成磷酸鹽,硫化物被選擇性的氧化成砜或亞砜等。光學(xué)拆分是常用的手性拆分方法之一。經(jīng)典光學(xué)拆分法,利用光學(xué)拆分試劑與外消旋混合物生成理化性質(zhì)不同的非對(duì)映異構(gòu)體而進(jìn)行拆分。雖然理論上光學(xué)拆分會(huì)有一半的底物損失,但是光學(xué)拆分依然應(yīng)用在制藥領(lǐng)域中。
在生命科學(xué)試劑中,核酸樣品染色的兩種常用方法,包括:凝膠內(nèi)染色;電泳后染色??稍诃傊悄z制備時(shí)加入推薦濃度核酸染色劑(常用溴化乙錠0.5μg/mL)。電泳后染色常用銀染方法對(duì)聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行染色。對(duì)于生命科學(xué)試劑的洗滌,可以用蒸餾水漂洗15s;顯色:放入顯色液中顯色;停顯:待有清晰條帶出現(xiàn)(背景不太深時(shí))倒出顯色液,加入10%乙酸終止顯色;水洗,成像。固定液、染色液、顯色液成分:固定液:10%乙醇,0.5%乙酸;銀染液:0.2%硝酸銀,用之前加200ul甲醛(250ml銀染液中);顯色液:1.5%氫氧化鈉,0.5%甲醛上樣緩沖液通常包含密度成分、鹽、金屬螯合劑、染料。而其中的螯合樣品中的核酸酶,能防止核酸的講解,染料指示用于電泳的進(jìn)展。在生命科學(xué)試劑中,如有對(duì)容器清洗后干燥的要求,應(yīng)有干燥過程參數(shù)的驗(yàn)證報(bào)告。
生命科學(xué)試劑要符合能與外消旋體之間易反應(yīng)合成,且又易被分解,兩個(gè)非對(duì)映立體異構(gòu)體產(chǎn)物在理化性質(zhì)上有較大的差異,如溶解度等,高光學(xué)純度,易制備、易定量回收,采用一組同一結(jié)構(gòu)類型的手性衍生物作為拆分試劑,代替單一的手性拆分劑進(jìn)行外消旋拆分,叫做組合拆分。與經(jīng)典拆分法相比,組合拆分中非對(duì)映體鹽的結(jié)晶速度更快、拆分的收率更高、目的產(chǎn)物的純度也更高。多肽合成時(shí)將已用Boc保護(hù)好的N-α-氨基酸共價(jià)交聯(lián)到樹脂上,TFA切除Boc保護(hù)基,N端用弱堿中和。肽鏈的延長(zhǎng)通過二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)活化、偶聯(lián)進(jìn)行,然后采用強(qiáng)酸氫氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)將合成的目標(biāo)多肽從樹脂上解離。在生命科學(xué)試劑中,配制間溫度一般應(yīng)控制在18~25℃。三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽(Tris HCl) CAS:1185-53-1
生命科學(xué)試劑空白吸光度的改變往往提示該生命科學(xué)試劑的變質(zhì)。洛美沙星 CAS:98079-51-7
生命科學(xué)試劑常用X-GAL作藍(lán)白斑篩選。該誘導(dǎo)物作用極強(qiáng),很穩(wěn)定,不被細(xì)菌代謝。MOPS系統(tǒng)具有抑制RNA酶作用的緩沖液,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。鹽酸胍類藥物如鹽酸胍等可以破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵,從而增加非極性分子的溶解性,包括氨基酸側(cè)鏈,降低疏水相互作用。吖啶橙為熒光色素,與細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA結(jié)合量有差異,能發(fā)射不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量較少,易發(fā)桔黃、桔紅熒光。所述染料具有膜透性,可穿透細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。螢光顯微鏡下,吖啶橙可以穿透正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈均勻的綠色或黃綠色熒光;而凋亡細(xì)胞因染色質(zhì)的固縮或斷層而形成凋亡小體。洛美沙星 CAS:98079-51-7