在生命科學(xué)試劑中,核酸樣品染色的兩種常用方法,包括:凝膠內(nèi)染色;電泳后染色。可在瓊脂糖凝膠制備時加入推薦濃度核酸染色劑(常用溴化乙錠0.5μg/mL)。電泳后染色常用銀染方法對聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行染色。對于生命科學(xué)試劑的洗滌,可以用蒸餾水漂洗15s;顯色:放入顯色液中顯色;停顯:待有清晰條帶出現(xiàn)(背景不太深時)倒出顯色液,加入10%乙酸終止顯色;水洗,成像。固定液、染色液、顯色液成分:固定液:10%乙醇,0.5%乙酸;銀染液:0.2%硝酸銀,用之前加200ul甲醛(250ml銀染液中);顯色液:1.5%氫氧化鈉,0.5%甲醛上樣緩沖液通常包含密度成分、鹽、金屬螯合劑、染料。而其中的螯合樣品中的核酸酶,能防止核酸的講解,染料指示用于電泳的進(jìn)展。在生命科學(xué)試劑中,凍干品外觀應(yīng)該呈現(xiàn)疏松的粉末狀固體,在規(guī)定時間內(nèi)復(fù)溶完全。(RS)-3-羥基苯甘氨酸 CAS:31932-87-3
在生命科學(xué)試劑中,氨基酸是蛋白質(zhì)的基本組成單位。它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯(lián)系在一起的物質(zhì)。機(jī)體中的每一個細(xì)胞和所有重要組成部分都有蛋白質(zhì)參與。蛋白質(zhì)占人體重量的16%~20%,即一個60千克重的成年人其體內(nèi)約有蛋白質(zhì)9.6~12千克。人體內(nèi)蛋白質(zhì)的種類很多,性質(zhì)、功能各異,但都是由20多種氨基酸按不同比例組合而成的,并在體內(nèi)不斷進(jìn)行代謝與更新。氨基酸是其基本單位,氨基酸通過脫水縮合連成肽鏈。蛋白質(zhì)是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子,每一條多肽鏈有二十至數(shù)百個氨基酸殘基(-R)不等;各種氨基酸殘基按一定的順序排列。蛋白質(zhì)的氨基酸序列是由對應(yīng)基因編碼。甲醇中氯丙那林標(biāo)準(zhǔn)溶液 CAS:6933-90-0生命科學(xué)試劑在分裝前要確認(rèn)試劑名稱、批號、數(shù)量、分裝量、封裝后密封性。
生命科學(xué)試劑常用X-GAL作藍(lán)白斑篩選。該誘導(dǎo)物作用極強(qiáng),很穩(wěn)定,不被細(xì)菌代謝。MOPS系統(tǒng)具有抑制RNA酶作用的緩沖液,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。鹽酸胍類藥物如鹽酸胍等可以破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵,從而增加非極性分子的溶解性,包括氨基酸側(cè)鏈,降低疏水相互作用。吖啶橙為熒光色素,與細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA結(jié)合量有差異,能發(fā)射不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量較少,易發(fā)桔黃、桔紅熒光。所述染料具有膜透性,可穿透細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。螢光顯微鏡下,吖啶橙可以穿透正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈均勻的綠色或黃綠色熒光;而凋亡細(xì)胞因染色質(zhì)的固縮或斷層而形成凋亡小體。
在生命科學(xué)試劑的使用中,針對手性的來源,有人把不對稱合成分為普通不對稱合成和定不對稱合成。普通不對稱合成是指依靠直接或間接有天然獲得的手性化合物衍生的基團(tuán)誘導(dǎo)產(chǎn)生手性化合物的合成。而定不對稱合成是指定脫離天然產(chǎn)物來源而通過物理方法(比如說通過圓偏光的照射)誘導(dǎo)產(chǎn)生手性的合成。后者相當(dāng)吃功夫,所以目前只有非常有限的幾個反應(yīng)能做到定不對稱合成。正是因?yàn)檫@樣的成鍵特性,導(dǎo)致了他們當(dāng)中的有些碳原子,雖然其結(jié)合的四個基團(tuán)的種類相同,但卻始終無法重合,兩者互為鏡像,就像我們的左手和右手一樣。這樣的性質(zhì)就稱之為手性。生命科學(xué)試劑成份、純度、用量及穩(wěn)定性,才是保證生命科學(xué)試劑質(zhì)量的關(guān)鍵所在。
存放生命科學(xué)試劑時,一般空氣中相對濕度在40%-70%為正常,濕度過高或過低都易使生命科學(xué)試劑發(fā)生化學(xué)或物理變化,使不同的生命科學(xué)試劑發(fā)生潮解、風(fēng)化、稀釋、分解等變化。生命科學(xué)試劑純凈與否,會直接影響其變質(zhì)情況。所以在取用生命科學(xué)試劑時要特別注意,防止帶入雜質(zhì)影響生命科學(xué)試劑質(zhì)量。有一些不穩(wěn)定生命科學(xué)試劑在長期貯存后會發(fā)生歧化、聚合、分解或沉淀等變化,在使用時一定要注意。生命科學(xué)試劑是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的必備物品,根據(jù)生命科學(xué)試劑性能的不同分為劇毒類、氧化類、易燃易爆類、腐蝕性、放射性等,不同的生命科學(xué)試劑對生命科學(xué)試劑瓶有不同的要求。生命科學(xué)試劑的常規(guī)質(zhì)控項目有試劑外觀、空白吸光度(通過后續(xù)的半成品檢驗(yàn)完成)。(RS)-3-羥基苯甘氨酸 CAS:31932-87-3
生命科學(xué)試劑按生物學(xué)研究的需要可分為電泳試劑、色譜試劑、免疫試劑、標(biāo)記試劑等。(RS)-3-羥基苯甘氨酸 CAS:31932-87-3
生命科學(xué)試劑的分子結(jié)構(gòu)中含有不飽和雙鍵或叁鍵的有機(jī)物質(zhì)容易發(fā)生聚合,如:甲醛溶液常會聚合生成白色的三聚甲醛,青化鉀試劑也易聚合。有電荷高、半徑小的中心離子形成的含氧酸鹽溶液則能因縮合而析出多酸鹽沉淀,如:鉬酸銨溶液能縮合析出四鉬酸銨沉淀,三聚甲醛經(jīng)加熱處理尚可重新釋放出甲醛氣體,但有些試劑,一旦發(fā)生聚合或縮合反應(yīng),往往是不可逆的,從而造成變質(zhì)失效。光作為一種能量也能使某些試劑反應(yīng)而變質(zhì)。光能引發(fā)分解反應(yīng)導(dǎo)致銀鹽分解就是實(shí)例。光也能引發(fā)氧化反應(yīng),如:苯甲醛在光照下,易被空氣氧化成苯甲酸,苯胺則能從無色變成棕色。此外,碘化汞、氯仿,硫酸汞、亞鐵青化鉀等也易發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)。(RS)-3-羥基苯甘氨酸 CAS:31932-87-3