化學(xué)科研試劑可通過改變基質(zhì)的百分比來調(diào)整孔徑大小,從而有效分離不同大小的核酸。在既定溫度下,APS和/或TEMED的濃度決定了聚合速率。核酸分離,通常采用 3–30% (%T)的聚丙烯酰胺凝膠。%T(w/v)=[(丙烯酰胺+雙丙烯酰胺)g/緩沖液ml]x 100%;%C(w/w)=[雙丙烯酰胺g/(丙烯酰胺+雙丙烯酰胺)g]x 100%在凝膠中,丙烯酰胺和雙丙烯酰胺(簡稱為“bis”)的總濃度(以%T表示)決定了孔隙大小。瓊脂糖凝膠的含量與分離核酸大小成反比。生化級瓊脂糖適用于普通核酸電泳;瓊脂糖可用于分離堿基數(shù)量較低的DNA,約50-1000bp;低熔點(diǎn)瓊脂糖適用于DNA提取,也是凝膠內(nèi)酶反應(yīng)的理想選擇。取用化學(xué)科研試劑中的強(qiáng)腐蝕性的藥品時,一定要小心,宜戴上橡膠手套,護(hù)目眼鏡。異喹啉-6-羧酸 CAS:106778-43-2
根據(jù)化學(xué)科研試劑中危險試劑的性質(zhì)和貯存要求又可以分為很多種,其中易燃試劑指在空氣中能夠自燃或遇其它物質(zhì)容易引起燃燒的化學(xué)物質(zhì)。由于存在狀態(tài)或引起燃燒的原因不同??煞譃橐鬃匀荚噭?,如黃磷等。遇水燃燒試劑,如鉀、鈉、碳化鈣等。易燃液體試劑,如苯、汽油、C4H10O等。易燃固體試劑,如硫、紅磷、鋁粉等。易爆試劑指受外力作用發(fā)生劇烈化學(xué)反應(yīng)而引起燃燒炸裂同時能放出大量有害氣體的化學(xué)物質(zhì)。如氯酸鉀等。危險性試劑指對人或生物以及環(huán)境有強(qiáng)烈危險性的化學(xué)物質(zhì)。如溴、甲醇、汞、As2O3等。氧化性試劑指對其它物質(zhì)能起氧化作用而自身被還原的物質(zhì)、如過氧化鈉、高錳酸鉀、重鉻酸銨、硝酸銨等。吡啶-2-基二苯基甲醇19490-90-5化學(xué)科研試劑大多數(shù)具有一定的毒性及危險性。
化學(xué)科研試劑應(yīng)放在試劑庫內(nèi)。對于一般試劑,如元機(jī)鹽,應(yīng)存放有序地放在試劑柜內(nèi),可按元素周期系類族,或按酸、堿、鹽、氧化物等分類存放。存放試劑時,要注意化學(xué)試劑的存放期限,某些試劑在存放過程中會逐漸變質(zhì),甚至形成危害物。如醚類、四氫呋喃、二氧六環(huán)、烯、液體石蠟等,在見光條件下,若接觸空氣可形成過氧化物,放置時間越久越危險。某些具有還原性的試劑,如本三酚、TiCl3、四氫硼鈉、FeS04、維生素c、維生素E以及金屬鐵絲、鋁、鎂、鋅粉等易被空氣中氧所氧化變質(zhì)。
化學(xué)試劑的管理必須要求管理人員具備專業(yè)的從事化學(xué)試劑管理的知識。包括常用試劑的性狀、用途、一般安全要求、急救措施、報廢試劑的處理及消防知識等。嚴(yán)加管理化學(xué)試劑才能確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,這是實(shí)驗(yàn)室安全的重要環(huán)節(jié)。化學(xué)試劑是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的必備物品,根據(jù)試劑性能的不同分為劇毒類、氧化類、易燃易爆類、腐蝕性、放射性等,不同的試劑對試劑瓶有不同的要求。試劑瓶常見的材質(zhì)有玻璃和塑料兩種,而氫氟酸溶液屬于腐蝕性試劑,對玻璃具有很強(qiáng)的腐蝕作用,若吸入蒸氣或接觸皮膚會造成難以療養(yǎng)的灼傷,為了確保試劑的穩(wěn)定性,在選擇盛放容器時應(yīng)該選擇塑料瓶?;瘜W(xué)科研試劑不能與手接觸。
在使用化學(xué)科研試劑時,可以在BSA母液中加入標(biāo)液配置溶液,將試劑靜置10分鐘后檢測。然后配制待測樣品,準(zhǔn)確吸取50μl樣品溶液于孔板中,加入考馬斯亮藍(lán)G250試劑200μl。隨后再次進(jìn)行靜置10分鐘,而后檢測。如待測樣品需稀釋,稀釋倍數(shù)需根據(jù)原始樣品濃度進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整,一般保證稀釋后樣品濃度在0.1-1.0mg/ml。用酶標(biāo)儀在595nm波長下測定溶液的吸光度。當(dāng)數(shù)據(jù)整理完畢后,以BSA含量為橫坐標(biāo),以吸光值為縱坐標(biāo),開始著手繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)曲線空白為對照,根據(jù)樣品的吸光值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品的蛋白質(zhì)含量?;瘜W(xué)科研試劑普遍用于物質(zhì)的合成,分離,定性和定量分析。3-溴-6-氯吡啶-2-甲腈 CAS:1053659-39-4
在化學(xué)科研試劑中,根據(jù)區(qū)帶的位置和種類不同,從而證明DNA的復(fù)制方式是半保留復(fù)制。異喹啉-6-羧酸 CAS:106778-43-2
取用化學(xué)科研試劑時應(yīng)注意保持試劑清潔,打開瓶塞后,瓶塞不許任意放置,防止沾污,取完化學(xué)科研試劑后立即蓋好。取用固體化學(xué)科研試劑時應(yīng)用潔凈干燥的藥勺取用,用后藥勺應(yīng)洗(或擦)凈。原裝液體試劑取用時,應(yīng)采用“倒出”的方法,盡量不用吸管直接吸取,若有特殊必要時,吸管或移液管應(yīng)潔凈防止帶入污物或水(影響溶液的濃度)。化學(xué)科研試劑自瓶中倒出后若使用不完時,不得再倒回原瓶。因此,實(shí)驗(yàn)時要按需要量取用,以免造成浪費(fèi)。盛有化學(xué)科研試劑的瓶上都應(yīng)有明顯的標(biāo)簽,寫明化學(xué)科研試劑的名稱、濃度、規(guī)格及配制時間等。即放回原處,以免影響他人使用。異喹啉-6-羧酸 CAS:106778-43-2
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