上海雙折射性紡錘體觀測儀

來源: 發(fā)布時間:2025-03-10

在生殖醫(yī)學領域,卵母細胞冷凍保存技術作為輔助生殖技術的重要組成部分,近年來取得了進展。尤其是針對成熟卵母細胞紡錘體的冷凍保存研究,不僅關乎女性生育能力的保存,還涉及到遺傳學的穩(wěn)定性和安全性。成熟卵母細胞,即處于第二次減數(shù)分裂中期(MII期)的卵母細胞,其內部包含一個高度復雜且精細的紡錘體結構。紡錘體由微管組成,這些微管通過動態(tài)變化,將染色體緊密地聯(lián)系在一起,并確保在細胞分裂過程中染色體的正確分離。成熟卵母細胞的紡錘體對溫度變化和機械刺激極為敏感,這使得其冷凍保存過程充滿了挑戰(zhàn)。在細胞分裂過程中,紡錘體的形成和功能受到嚴格的調控。上海雙折射性紡錘體觀測儀

上海雙折射性紡錘體觀測儀,紡錘體

染色體當細胞從間期進入有絲分裂期,間期細胞微管網絡解聚為游離的αβ-微管蛋白二聚體,再重組成紡錘體,介導染色體的運動;分裂末期紡錘體微管解聚,又重組形成細胞質微管網絡。可分為:動粒微管:連接染色體動粒于兩極的微管。極間微管:從兩極發(fā)出,在紡錘體中部赤道區(qū)相互交錯的微管。星體微管:中心體周圍呈輻射分布的微管。染色體的運動依賴紡錘體微管的組裝和去組裝。在這一過程中動粒微管與動粒之間的滑動主要是依靠結合在動粒部位的驅動蛋白和動力蛋白沿微管的運動來完成。極微管在紡錘體中部交錯,有些分布在極微管之間特殊的雙極馬達蛋白,其中2個馬達蛋白沿一條微管運動,另2個馬達結構域沿另一條微管運動。由于2條微管分別來自二極,故極性相反。當雙極驅動蛋白四聚體沿微管向正極運動時,紡錘體二極間距離延長。反之紡錘體距離縮短。北京ICSI紡錘體Hoechst染料紡錘體的微管在細胞分裂后期會斷裂并重新組裝,形成新的細胞結構。

上海雙折射性紡錘體觀測儀,紡錘體

選擇合適的冷凍保護劑是減少冷凍損傷的關鍵。然而,不同濃度的冷凍保護劑對MI期卵母細胞紡錘體的影響各異,需要通過大量實驗進行優(yōu)化。此外,冷凍保護劑的滲透性和毒性也是需要考慮的因素。冷凍和解凍過程中的溫度控制、時間控制以及操作手法等都會對MI期卵母細胞的紡錘體造成影響。因此,需要不斷優(yōu)化冷凍和解凍程序,以減少對紡錘體的損傷。近年來,研究者們通過不斷嘗試和優(yōu)化冷凍保護劑的配方,取得了進展。例如,一些研究表明,使用高濃度的蔗糖作為冷凍保護劑可以提高MI期卵母細胞的存活率和紡錘體穩(wěn)定性。此外,還有一些新型冷凍保護劑如乙二醇、丙二醇等也被應用于MI期卵母細胞的冷凍保存中。

紡錘體觀測儀使ICSI更加安全可靠在進行單精子卵胞漿內注射(ICSI)授精時,**初人們觀察人體內成熟的卵母細胞時,通常認為,卵母細胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉動卵母細胞使其***極**于6點或12點處,然后在3點處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測儀后發(fā)現(xiàn),***極體并不能很好地預測紡錘體的位置。一項研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動,或者紡錘體在胞質中的易位都使兩者的位置關系發(fā)生改變,普通光學顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測儀,可以精確地對卵母細胞中紡錘體的位置進行定位,從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻報道,在進行ICSI時,觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細胞的受精率和質量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學者發(fā)現(xiàn),有些卵母細胞在普通光學顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測儀這個“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。紡錘體在細胞分裂中的穩(wěn)定性對于細胞存活至關重要。

上海雙折射性紡錘體觀測儀,紡錘體

紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在有絲分裂前期,中心體被復制形成兩個中心體,并逐漸分離,形成兩個紡錘體。紡錘體的微管從中心體發(fā)出,與染色體上的著絲粒(kinetochore)結合。著絲粒是一組復雜的蛋白質結構,可以與微管的末端結合。當纖維束的微管末端與著絲粒結合時,纖維束開始縮短,將染色體拉向兩端,實現(xiàn)染色體的精確分離。這一過程不僅確保了每個新細胞都能獲得正確數(shù)量的染色體,還保證了遺傳信息的穩(wěn)定傳遞。紡錘體在細胞分裂過程中展現(xiàn)出驚人的自我組裝能力。上海雙折射性紡錘體紡錘體結構

紡錘體的異常可能導致細胞分裂過程中的停滯或凋亡。上海雙折射性紡錘體觀測儀

    在有絲分裂中,紡錘體負責將姐妹染色單體分離并牽引至細胞兩極,形成兩個遺傳物質完全相同的子細胞。而在減數(shù)分裂中,紡錘體則負責將同源染色體分離并牽引至細胞兩極,形成四個遺傳物質相似的子細胞。這一過程實現(xiàn)了遺傳信息的重組和配子的形成。其次,在有絲分裂中,紡錘體的形成和分裂過程相對簡單,主要依賴于中心體的復制和分離以及微管的動態(tài)生長和縮短。而在減數(shù)分裂中,紡錘體的形成和分裂過程則更加復雜。在減數(shù)分裂Ⅰ的前期,同源染色體需要發(fā)生配對、聯(lián)會、交換和交叉等過程,這些過程都依賴于紡錘體的微管網絡。此外,在減數(shù)分裂Ⅱ中,姐妹染色單體的分離也需要紡錘體的牽引和定位。此外紡錘體在有絲分裂和減數(shù)分裂中的形態(tài)和大小也存在差異。在有絲分裂中,紡錘體通常呈現(xiàn)出較為規(guī)則的紡錘形狀,而在減數(shù)分裂中,紡錘體的形態(tài)則更加多樣化,可能呈現(xiàn)出不規(guī)則的形狀或分叉的形態(tài)。 上海雙折射性紡錘體觀測儀