紡錘體卵冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn)。紡錘體作為卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過(guò)程中的主要結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定性和形態(tài)直接關(guān)系到卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。然而,傳統(tǒng)的紡錘體觀測(cè)方法往往需要對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色,這不僅破壞了細(xì)胞的活性,還可能引入額外的損傷。因此,非侵入式成像技術(shù)作為一種新興的研究手段,在紡錘體卵冷凍研究中展現(xiàn)出了巨大的潛力和優(yōu)勢(shì)。非侵入式成像技術(shù)是指在不破壞細(xì)胞完整性和活性的前提下,通過(guò)光學(xué)、聲學(xué)、電磁等物理手段對(duì)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行成像的方法。這類(lèi)技術(shù)避免了傳統(tǒng)方法中細(xì)胞固定和染色帶來(lái)的損傷,能夠?qū)崟r(shí)、動(dòng)態(tài)地觀察細(xì)胞內(nèi)部的變化,為研究者提供了更加真實(shí)、準(zhǔn)確的細(xì)胞信息。在紡錘體卵冷凍研究中,非侵入式成像技術(shù)能夠直接觀測(cè)到冷凍和解凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)和動(dòng)態(tài)變化,為評(píng)估冷凍效果和優(yōu)化冷凍方案提供了有力支持。紡錘體在減數(shù)分裂中也發(fā)揮重要作用,確保生殖細(xì)胞染色體正確分離。香港哺乳動(dòng)物紡錘體Hoechst染料
近年來(lái),隨著成像技術(shù)的飛速發(fā)展,特別是紡錘體成像技術(shù)的不斷進(jìn)步,科學(xué)家們得以在高分辨率下觀測(cè)細(xì)胞分裂過(guò)程,從而揭示了紡錘體的許多未知特征和機(jī)制。紡錘體成像技術(shù)的發(fā)展可以追溯到上世紀(jì)末,當(dāng)時(shí)科學(xué)家們開(kāi)始利用熒光顯微鏡技術(shù)觀測(cè)細(xì)胞分裂過(guò)程。然而,由于傳統(tǒng)熒光顯微鏡的分辨率限制,紡錘體的精細(xì)結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化往往難以被清晰捕捉。為了克服這一難題,科學(xué)家們開(kāi)始探索更高分辨率的成像技術(shù),如電子顯微鏡、超分辨率顯微鏡等。然而,這些技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中面臨著諸多挑戰(zhàn),如樣品制備復(fù)雜、成像速度慢、對(duì)細(xì)胞活性影響大等。近年來(lái),隨著成像技術(shù)的不斷創(chuàng)新和進(jìn)步,紡錘體成像技術(shù)取得了突破性進(jìn)展。特別是超分辨率顯微鏡技術(shù)的出現(xiàn),如結(jié)構(gòu)光照明顯微鏡(SIM)、受激輻射損耗顯微鏡(STED)和單分子定位顯微鏡(SMLM)等,使得科學(xué)家們能夠在納米尺度上觀測(cè)紡錘體的精細(xì)結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)變化。 美國(guó)MII期紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化是細(xì)胞分裂過(guò)程中引人注目的現(xiàn)象之一。
紡錘體,顧名思義,其形狀類(lèi)似于紡織用的紡錘,是在細(xì)胞分裂前初期到末期形成的一種特殊細(xì)胞器。它的主要元件包括微管、附著微管的動(dòng)力分子分子馬達(dá),以及一系列復(fù)雜的超分子結(jié)構(gòu)。微管是紡錘體的基礎(chǔ)骨架,由αβ-微管蛋白二聚體組成,這些微管相互交錯(cuò),形成紡錘狀結(jié)構(gòu),將染色體緊密地聯(lián)系在一起。在動(dòng)物細(xì)胞中,紡錘體的形成和組裝通常由中心體引導(dǎo)和控制。中心體是一個(gè)位于細(xì)胞質(zhì)中的復(fù)合體,由兩個(gè)中心粒嵌套在被稱(chēng)為pericentriolarmaterial(PCM)的區(qū)域內(nèi)組成。PCM富含微管相關(guān)蛋白和其他蛋白質(zhì),如谷氨酸脫羧酶等微管主要蛋白,這些蛋白質(zhì)共同協(xié)作,確保紡錘體的正確組裝和穩(wěn)定。相比之下,高等植物細(xì)胞的紡錘體并不包含中心體,而是由細(xì)胞極板附近的微管組織形成。
紡錘體是卵母細(xì)胞在減數(shù)分裂過(guò)程中形成的一種微管結(jié)構(gòu),負(fù)責(zé)精確分離染色體。然而,紡錘體對(duì)環(huán)境溫度、滲透壓等外部條件極為敏感,在冷凍保存過(guò)程中容易發(fā)生損傷,導(dǎo)致染色體分離異常,進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。因此,如何有效監(jiān)測(cè)和評(píng)估冷凍過(guò)程中紡錘體的變化,成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題。紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)的出現(xiàn),為這一問(wèn)題的解決提供了可能。紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)主要利用高分辨率顯微鏡結(jié)合熒光標(biāo)記技術(shù),對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)的觀察和記錄。常用的熒光標(biāo)記方法包括使用綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)記微管蛋白,以及利用特定抗體對(duì)紡錘體相關(guān)蛋白進(jìn)行染色。通過(guò)這些方法,研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態(tài)、位置、動(dòng)態(tài)變化等信息,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍過(guò)程中紡錘體的穩(wěn)定性和完整性。紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化是細(xì)胞分裂周期的重要標(biāo)志。
無(wú)需染色紡錘體觀察技術(shù)已逐步應(yīng)用于臨床輔助生殖技術(shù)中。通過(guò)該技術(shù),醫(yī)生可以在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下,評(píng)估其質(zhì)量并選擇合適的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精和胚胎移植,從而提高妊娠率和胚胎質(zhì)量。無(wú)需對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色處理,保留了細(xì)胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化,評(píng)估冷凍效果。能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化,評(píng)估冷凍效果。Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng)的操作和維護(hù)需要較高的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和技能。紡錘體的形態(tài)變化復(fù)雜多樣,需要豐富的經(jīng)驗(yàn)和專(zhuān)業(yè)知識(shí)進(jìn)行數(shù)據(jù)解讀和結(jié)果分析。紡錘體由微管組成,其動(dòng)態(tài)變化調(diào)控著細(xì)胞分裂的進(jìn)程。深圳紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體廠家
紡錘體的異??赡軐?dǎo)致細(xì)胞分裂過(guò)程中的停滯或凋亡。香港哺乳動(dòng)物紡錘體Hoechst染料
胞質(zhì)膜在動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞分裂結(jié)束時(shí),母細(xì)胞在一個(gè)被稱(chēng)為“胞質(zhì)分裂”的過(guò)程中分裂成兩個(gè)子細(xì)胞和分區(qū)隔離的染色體。有絲分裂紡錘體控制胞質(zhì)膜上的“胞質(zhì)分裂”事件,但連接這兩個(gè)宏觀結(jié)構(gòu)的機(jī)制一直不清楚。MarkPetronczki及其同事提供了一個(gè)結(jié)構(gòu)和功能分析結(jié)果,他們發(fā)現(xiàn)**紡錘體蛋白(紡錘體中間區(qū)域和中間體中的一個(gè)蛋白復(fù)合物)是有絲分裂紡錘體與胞質(zhì)膜間所缺失的聯(lián)系環(huán)節(jié),這個(gè)聯(lián)系環(huán)節(jié)確保“胞質(zhì)分裂”過(guò)程的***結(jié)果。本文作者還發(fā)現(xiàn),**紡錘體蛋白的MgcRac***亞單元中的一個(gè)區(qū)域?yàn)橐粋€(gè)“系繩”,它連接到胞質(zhì)膜中的磷酸肌醇脂質(zhì)上。[4]香港哺乳動(dòng)物紡錘體Hoechst染料