1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實驗室,任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數(shù)板的方法,但計數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運動精子非常重要。因此,關(guān)于精子活力分級,第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調(diào),精子形態(tài)學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正常”形態(tài)率的判斷,則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應單獨計算并在報告中注明;計算機輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學名詞。上海精子分析VCL
[臨床意義]1. 若數(shù)日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常,說明精囊或前列腺有病變;若精液量減至數(shù)滴,甚至排不出,稱為無精液癥,見于生殖系統(tǒng)的特異性***,如結(jié)核、淋病和非特異性炎癥等。2.若精液量過多(一次超過8ml),則精子被稀釋而相應減少,有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色,久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1.黃色或棕色膿樣精液:見于精囊炎或前列腺炎等。2.鮮紅或暗紅色血性精液:見于生殖系統(tǒng)的炎癥、結(jié)核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀,30分鐘內(nèi)自行液化。[臨床意義]1.精液粘稠度低,似米湯樣,可因精子量減少所致,見于生殖系統(tǒng)炎癥。??2.液化時間過長或不液化,可抑制精子活動而影響生育,常見于前列腺炎癥等。四、精子活動率檢測[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好,有中速運動,但波形運動的較多)以上,**后1小時內(nèi)有Ⅲ級以上活動能力的精于應>0.60。[臨床意義]如果0級(死精子,無活動能力,加溫后仍不活動)和Ⅰ級(活動不良,精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動或抖動,運動遲緩)精子在0.40以上,常為男性不育癥的重要原因之一。美國牛精子分析DAP?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),前向性(STR)?:平均路徑的直線性。
美國Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細胞計數(shù)板在大鼠附睪精子計數(shù)結(jié)果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數(shù)進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOX IVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數(shù),同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細胞計數(shù)板內(nèi),通過光學顯微鏡進行計數(shù),比較兩種計數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細胞計數(shù)板的精子計數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學研究中具有重要的應用價值。
醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當今醫(yī)學科學知識、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來完成的。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準確的分析結(jié)果[5]。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點在于:①當CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式(溫度、稀釋法、緩沖液)確定時?通過個體內(nèi)和個體間的比較?CASA的精子活力重復性明顯好于直觀評估[6]。②實驗室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法[6]?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫的過程無錯誤發(fā)生?可清楚準確地打印出結(jié)果。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫、能夠?qū)?**前和***后測定的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學比較[9]、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存、每天的標本測試記錄以及許多其他報告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計算機中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學檢查中?通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學特征進行分析[7]?這些特征(細胞大小、形狀、光學密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會引起同一標本在不同實驗室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[8]。就形態(tài)學分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠遠大于CASA分析。傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法,準確率有待提高。
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準確性。CASA系統(tǒng)進行**分析應注意以下幾點:3.1標本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。(5)標本置于37℃水浴.精子運動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應于分析儀恒溫板上預溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標本密度應控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標本。精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。上海馬精子分析WOB
精子分析儀因其高效、J準的特點,已經(jīng)在眾多醫(yī)療機構(gòu)中廣泛應用,深受患者信賴。上海精子分析VCL
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽#€可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標準差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。
與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術(shù)人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。 上海精子分析VCL