美國(guó)無(wú)損觀察紡錘體

在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，卵母細(xì)胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn)，旨在提高女性生育能力的保存與利用。然而，傳統(tǒng)的紡錘體觀察方法往往需要對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色處理，這不僅破壞了細(xì)胞的活性，還限制了對(duì)其發(fā)育潛能的深入評(píng)估。偏光成像技術(shù)，特別是Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng)，通過(guò)利用紡錘體微管結(jié)構(gòu)的雙折射性，實(shí)現(xiàn)了對(duì)紡錘體的無(wú)損觀察。這種技術(shù)無(wú)需對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色，能夠在保持細(xì)胞活性的同時(shí)，實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)地觀察紡錘體的形態(tài)和變化。這不僅提高了觀察的準(zhǔn)確性和可靠性，還避免了傳統(tǒng)染色方法可能帶來(lái)的細(xì)胞損傷和誤差。紡錘體形成和功能的調(diào)控涉及多個(gè)信號(hào)通路。美國(guó)無(wú)損觀察紡錘體

無(wú)需染色紡錘體觀察技術(shù)已逐步應(yīng)用于臨床輔助生殖技術(shù)中。通過(guò)該技術(shù)，醫(yī)生可以在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下，評(píng)估其質(zhì)量并選擇合適的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精和胚胎移植，從而提高妊娠率和胚胎質(zhì)量。無(wú)需對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色處理，保留了細(xì)胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化，評(píng)估冷凍效果。能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化，評(píng)估冷凍效果。Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng)的操作和維護(hù)需要較高的專(zhuān)業(yè)知識(shí)和技能。紡錘體的形態(tài)變化復(fù)雜多樣，需要豐富的經(jīng)驗(yàn)和專(zhuān)業(yè)知識(shí)進(jìn)行數(shù)據(jù)解讀和結(jié)果分析。武漢無(wú)需染色紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化是細(xì)胞對(duì)外界刺激響應(yīng)的一部分。

解凍后的卵母細(xì)胞在無(wú)損觀察技術(shù)的支持下，可以直接進(jìn)行紡錘體觀察，無(wú)需進(jìn)行任何形式的固定和染色處理。這一技術(shù)能夠迅速評(píng)估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量，包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo)，為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考。無(wú)損觀察紡錘體技術(shù)已逐步應(yīng)用于臨床輔助生殖技術(shù)中。醫(yī)生可以在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下，通過(guò)該技術(shù)評(píng)估其質(zhì)量并選擇合適的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精和胚胎移植。這不僅提高了妊娠率和胚胎質(zhì)量，還減少了因卵母細(xì)胞質(zhì)量不佳而導(dǎo)致的移植失敗和流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)。

在生殖醫(yī)學(xué)與輔助生殖技術(shù)的快速發(fā)展中，卵母細(xì)胞的冷凍保存技術(shù)顯得尤為重要。然而，卵母細(xì)胞，尤其是其內(nèi)部的紡錘體結(jié)構(gòu)，對(duì)低溫環(huán)境極為敏感，冷凍過(guò)程中的損傷往往影響解凍后卵母細(xì)胞的存活率及發(fā)育潛能。偏光成像技術(shù)，特別是Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng)，結(jié)合了液晶可變減速器、電子成像及數(shù)碼成像技術(shù)，能夠捕捉到具有雙折性特征的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如紡錘體。紡錘體由微管等高分子物質(zhì)有序排列而成，這些物質(zhì)能夠使偏振光發(fā)生折射現(xiàn)象，從而被檢偏器捕捉并通過(guò)偏振光顯微鏡觀察。這一技術(shù)無(wú)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定和染色，能夠動(dòng)態(tài)評(píng)估卵母細(xì)胞的質(zhì)量與紡錘體的相關(guān)性，為卵母細(xì)胞冷凍保存的研究提供了新的手段。紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化是細(xì)胞分裂周期的重要標(biāo)志。

如何觀察紡錘體呢？

在普通光學(xué)顯微鏡下，人類(lèi)卵母細(xì)胞是半透明的，無(wú)法對(duì)紡錘體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和分析。傳統(tǒng)方法是用一種特異的DNA熒光染料對(duì)卵母細(xì)胞染色，在紫外光下可顯示紡錘體，這種免疫熒光方法對(duì)卵母細(xì)胞有損傷，不能應(yīng)用于臨床。為了更好的觀測(cè)紡錘體，美國(guó)海洋生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的R．Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性，開(kāi)發(fā)出偏振光顯微鏡?，F(xiàn)今，偏振光顯微鏡已經(jīng)發(fā)展成為一種無(wú)創(chuàng)性的觀察和分析紡錘體動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)的顯微觀測(cè)系統(tǒng)，我們也叫它紡錘體觀測(cè)儀。它不僅能對(duì)雙折射性紡錘體信號(hào)的有無(wú)進(jìn)行定性分析，還能對(duì)信號(hào)的強(qiáng)弱進(jìn)行定量分析。 紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化受到細(xì)胞周期蛋白的調(diào)控。美國(guó)成熟卵母細(xì)胞紡錘體卵冷凍研究

紡錘體在細(xì)胞分裂中的功能受到嚴(yán)格的時(shí)間和空間控制。美國(guó)無(wú)損觀察紡錘體

多極紡錘

      在有絲分裂時(shí)紡錘體一般有二個(gè)極。但是在多精入卵的卵細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、培養(yǎng)的HeLa細(xì)胞、雜種細(xì)胞等，隨著條件不同可形成有3、4個(gè)或者更多個(gè)極的紡錘體。當(dāng)存在多極紡錘體時(shí)，染色體的后期分配便不規(guī)則，可形成幾個(gè)小核。用低濃度的秋水仙堿等藥物處理也能誘導(dǎo)出同樣的變化。木賊等特殊的植物體或胚乳細(xì)胞，往往在分裂初期形成多極紡錘體，及至分裂中期多數(shù)可恢復(fù)為二個(gè)極。

      長(zhǎng)期以來(lái)，科學(xué)家認(rèn)為在哺乳動(dòng)物胚胎的***次細(xì)胞分裂過(guò)程中，只有一個(gè)紡錘體負(fù)責(zé)將胚胎染色體分配到兩個(gè)細(xì)胞中。但歐洲研究人員利用小鼠開(kāi)展的**近實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，這個(gè)過(guò)程中實(shí)際上有兩個(gè)紡錘體，分別負(fù)責(zé)來(lái)自父親和母親的染色體[2]。

      雙紡錘體的形成可能部分解釋了為什么哺乳動(dòng)物在早期發(fā)育階段（胚胎*初的幾次細(xì)胞分裂中）會(huì)有非常高的錯(cuò)誤率。如果紡錘體的兩極沒(méi)有對(duì)齊和融合，那么，受精卵的遺傳物質(zhì)可能會(huì)被拉向3個(gè)或4個(gè)方向，而不是2個(gè)。而這種錯(cuò)誤會(huì)導(dǎo)致?lián)碛卸鄠€(gè)細(xì)胞核的細(xì)胞產(chǎn)生，從而終止胚胎發(fā)育。雙紡錘體理論的提出提供了一種先前未知的機(jī)制。接下來(lái)需要探討的是雙紡錘體是否在人類(lèi)中也發(fā)揮相同的作用。因?yàn)?，這將為研究如何改善人類(lèi)不育***提供非常有價(jià)值的信息[3]。 美國(guó)無(wú)損觀察紡錘體