對卵子進行評估:胚胎學(xué)家指出:有紡錘體出現(xiàn)的卵母細(xì)胞有較高的受精率和胚胎發(fā)育率,也就是說紡錘體的存在與否,可以用來評價卵母細(xì)胞胞漿的成熟度。因此胚胎學(xué)家有三次通過紡錘體對我們的卵子進行評估的機會: (1)胚胎學(xué)家可以利用偏振光顯微鏡對卵子的紡錘體進行觀察,通過定量分析數(shù)據(jù)對卵子進行分級,挑選出正常分裂的卵子,也就是出現(xiàn)紡錘體的卵子,進而提高試管嬰兒的受精率。 (2)胚胎學(xué)家還可以通過紡錘體來確定體外培養(yǎng)成熟卵子(IVM)的成熟期,進而為體外成熟卵子進行評估,***提高試管嬰兒的受精率和胚胎發(fā)育率。 (3)由于紡錘體對環(huán)境溫度的改變非常敏感。溫度降至25℃時,只需要10分鐘的時間,就會紡錘體造成不可逆的損傷。所以冷凍復(fù)蘇過程中溫度改變很有可能對卵母細(xì)胞紡錘體和染色體造成損傷。因此胚胎學(xué)家可以應(yīng)用紡錘體成像幫助選擇復(fù)蘇后具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,進而可以提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率。
綜上所述,通過***細(xì)胞的紡錘體成像技術(shù)可以避免輔助生殖技術(shù)對卵母細(xì)胞紡錘體的損傷,有助于選擇具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,有利于提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率,利用更科學(xué)的方式,將讓求子路的終點不再那么遙遠。 紡錘體微管的數(shù)量和分布隨細(xì)胞分裂階段而變化。昆明MII期紡錘體胚胎發(fā)育
在核移植過程中,紡錘體的穩(wěn)定性是首要考慮的問題。冷凍和解凍過程中的溫度變化和冷凍保護劑的毒性都可能對紡錘體造成損傷,導(dǎo)致染色體分離異常,進而影響胚胎發(fā)育。因此,如何在冷凍過程中保持紡錘體的穩(wěn)定性,是核移植紡錘體卵冷凍研究面臨的重要挑戰(zhàn)。體細(xì)胞核在移入去核卵母細(xì)胞后,需要經(jīng)歷復(fù)雜的重新編程過程,以獲得全能性。然而,這一過程受到多種因素的調(diào)控,包括表觀遺傳修飾、轉(zhuǎn)錄因子表達等。在冷凍過程中,這些調(diào)控機制可能受到干擾,導(dǎo)致重新編程失敗或異常,從而影響胚胎發(fā)育。上海非侵入式成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿紡錘體微管的聚合與解聚受到多種酶的調(diào)控。
隨著科技的不斷發(fā)展,無損觀察技術(shù)將不斷得到優(yōu)化和創(chuàng)新。未來有望開發(fā)出更加便捷、高效、低成本的成像設(shè)備,進一步降低設(shè)備成本并提高操作簡便性。同時,通過優(yōu)化成像算法和數(shù)據(jù)處理技術(shù),可以實現(xiàn)對紡錘體形態(tài)變化的更精細(xì)、更準(zhǔn)確的評估。無損觀察紡錘體卵冷凍研究涉及生殖醫(yī)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、材料科學(xué)等多個領(lǐng)域。未來通過加強不同學(xué)科之間的交叉融合和協(xié)同創(chuàng)新,可以推動該領(lǐng)域取得更多突破性進展。例如,結(jié)合分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的研究成果,可以進一步揭示紡錘體在卵母細(xì)胞發(fā)育和受精過程中的作用機制。
紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應(yīng)用
我們知道,成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后,精子會穿透層層障礙**終進入卵子,隨著時間的推移,卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極,進而排出第二極體,再往后大約加精后9-16小時,雌雄原核會出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子,到了原核出現(xiàn)的時間窗,發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補救ICSI,往往錯過了卵子的比較好受精時間,因為沒有受精的卵子會在體外老化,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以,我們在加精后的4-6小時,通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,也避免了卵子的老化。
當(dāng)然,偶爾也會出現(xiàn)錯誤補救。文獻報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進行ICSI補救,實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目,82.7%含有一個紡錘體,17.3%含有兩個紡錘體,并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進行補救ICSI;而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體,只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進行補救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn),使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率。 紡錘體微管的動態(tài)變化是細(xì)胞分裂過程中引人注目的現(xiàn)象之一。
紡錘體觀測新技術(shù)提升“試管嬰兒”胚胎受精率
什么是紡錘體觀測儀?
紡錘體觀測儀是利用光線經(jīng)過雙折射性的物體時產(chǎn)生的光程差,對卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進行動態(tài)及無創(chuàng)觀察的顯微觀測系統(tǒng)。
紡錘體觀測儀主要有什么用處?
紡錘體觀測儀主要用于ICSI注射時紡錘**置觀測,避免ICSI注射時對卵子的紡錘體損傷。
目前的ICSI注射方法是:假定成熟的MII卵母細(xì)胞的紡錘體靠近***極體,通過定位***極**置于6點或12點方向,在垂直于***極體的3點鐘方向注入精子。但事實上,紡錘體的位置不是固定不變的,***極體不能精細(xì)預(yù)測所有卵母細(xì)胞紡錘體的位置,約39%的紡錘體并不能通過***極體預(yù)測。傳統(tǒng)的ICSI注射很可能損壞紡錘體,若紡錘體損傷很可能導(dǎo)致卵母細(xì)胞死亡或染色體異常。因此,在ICSI注射時對紡錘體進行觀察,對于ICSI操作和受精結(jié)局都有非常重要的意義,可以顯著提高ICSI受精率,有大量文獻報道正常受精率在觀察到紡錘體的卵子中***高于未觀察到紡錘體的卵子(83.3% VS 77.2%)。
紡錘體儀還有什么作用?
紡錘體觀測儀還可以對一代受精后的卵母細(xì)胞受精情況進行評估,選擇未受精的卵母細(xì)胞進行補救ICSI***。 紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的形成和維持需要消耗大量能量。上海非侵入式成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿
紡錘體在細(xì)胞分裂中的精確調(diào)控是生物體發(fā)育的基礎(chǔ)。昆明MII期紡錘體胚胎發(fā)育
胞質(zhì)膜
在動物細(xì)胞的細(xì)胞分裂結(jié)束時,母細(xì)胞在一個被稱為“胞質(zhì)分裂”的過程中分裂成兩個子細(xì)胞和分區(qū)隔離的染色體。有絲分裂紡錘體控制胞質(zhì)膜上的“胞質(zhì)分裂”事件,但連接這兩個宏觀結(jié)構(gòu)的機制一直不清楚。Mark Petronczki及其同事提供了一個結(jié)構(gòu)和功能分析結(jié)果,他們發(fā)現(xiàn)**紡錘體蛋白(紡錘體中間區(qū)域和中間體中的一個蛋白復(fù)合物)是有絲分裂紡錘體與胞質(zhì)膜間所缺失的聯(lián)系環(huán)節(jié),這個聯(lián)系環(huán)節(jié)確保“胞質(zhì)分裂”過程的***結(jié)果。本文作者還發(fā)現(xiàn),**紡錘體蛋白的MgcRac***亞單元中的一個區(qū)域為一個“系繩”,它連接到胞質(zhì)膜中的磷酸肌醇脂質(zhì)上。 [4] 昆明MII期紡錘體胚胎發(fā)育
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