ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒，是現(xiàn)在很多生物制藥廠和醫(yī)療實驗室常用的檢測設備，主要的試驗方法就是酶聯(lián)免疫吸附方法。 ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來的一種微量分析技術。酶標記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應的特異性，也不改變酶本身的活性。因為ELISA試劑盒價格低廉且準確性搞、反應時間短等優(yōu)點，所以適合大批量的檢測，一般常常用于食品安全檢測方面。 食品安全檢測ELISA試劑盒的操作原理： ELISA的操作步驟：樣品收集保存、試劑準備、溫育、洗板、顯色、比色、包被、加樣、加酶標抗體、終止反應、結果判定。 ELISA試劑盒需要遵循的3個要點： 1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面，并保持其免疫學活性; 2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性; 3.酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，可根據已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪制標準曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。酶標儀即酶聯(lián)免疫檢測儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器。北京什么是酶標儀價錢
酶標儀可分為單功能和多功能酶標儀。單功能酶標儀主要包括光吸收酶標儀、熒光酶標儀、化學發(fā)光酶標儀等。 光吸收酶標儀是對可見或紫外吸光度的檢測，即檢測被樣品吸收掉的光密度。早期的光吸收酶標儀可測定的OD值范圍普遍在0～2.5之間，現(xiàn)已拓寬到3.5以上，這有助于提高精密度和線性。當特定波長的光通過微孔板的待測溶液后，光能被吸收。被吸收的光能與待測物濃度呈一定的比例，從而實現(xiàn)對待測物定性或定量的檢測。光吸收檢測技術成熟、成本低、操作簡單，但是動態(tài)范圍窄，靈敏度較低。一般可見光或紫外光采用鎢燈及氘燈作為光源，而紫外/可見酶標儀可以將兩種光源切換。 熒光酶標儀是用來檢測熒光強度。通過激發(fā)光柵分光后特定波長的光照射到被熒光物質標定的樣品上，并通過發(fā)射光柵后到達檢測器。熒光酶標儀可以檢測多種類型的熒光，但熒光素容易受到背景干擾，現(xiàn)在更多的使用稀土元素作為標記物。熒光檢測靈敏度高，檢測信號相對穩(wěn)定。廣東科研酶標儀答疑解惑上海穩(wěn)贏機電設備的酶標儀用于醫(yī)學、生物學、免疫學等領域的研究和實驗中。
酶標儀應用在臨床檢驗、生物學研究、農業(yè)科學、食品和環(huán)境科學中，由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應用，使得酶標儀在生殖保健領域中應用越來越常見，同時促進了生殖健康技術水平提高。 國內多家檢測機構，如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調酶標儀的重要性，并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應使用酶標儀判讀，酶免試劑的質控也應使用酶標儀，并提供酶標儀測定的原始數據，而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項目往往是一些實質性的交叉?zhèn)魅竞筒∽儯ㄈ纾焊窝?、?yōu)生優(yōu)育等），判讀更要求嚴謹，由誤診引起的糾紛很難處理。另外，住院手術病人術前的丙肝EIA試劑檢測是避免因輸血引起交叉?zhèn)魅疽l(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段，正逐漸被許多單位所采用。
三、通道差與孔間差檢測 方法及其表達方式：①通道差檢測：取一只酶標板小孔杯(杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染)以酶標板架作載體，分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200u*后置于8個通道的相應位置，蒸餾水調零，采用雙波長(測定波長490nm，參比波長630或650nm，以下均相同)連續(xù)測三次，觀察其不同通道之間測量結果的一致性可用極差值來表示其通道差。②孔間差的測量：選擇同一廠家、同一批號酶標板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調0.065～0.070A)先后置于同一通道，蒸餾水調零，采用雙波長檢測，其誤差大小用±1.96s衡量。 四、零點飄移 方法：取八只小孔杯，分別置于八個通道的相應位置，均加入200ul蒸餾水并調零，采用雙波長或單波長(490nm)每隔30min測定一次，觀察8個通道4h內的吸光度變化。其與零點的差值即為零點飄移。衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調酶標儀的重要性。
方法: 一、濾光片波長精度檢查及其峰值測定 方法及其衡量的標準：用高精度紫外可見分光光度計(波長精度±0.3nm)對不同波長的濾光片進行光譜掃描，檢測值與標定值之差即為濾光片波長精度，其差值越接近于零且峰值越大表示濾光片的質量越好，波長精度越高。 二、靈敏度和準確度的監(jiān)測 方法：①靈敏度：配制6ug/ml重鉻酸鉀(干燥)溶液(0.05mo1/L硫酸溶解)，加入200ul重鉻酸鉀溶液于小孔杯中，以0.05mo1/L硫酸溶液作空白，于450nm(參比波長650nm)測定，其吸光度應≥0.01A。②準確度：準確配制：1mmo/L對硝基苯酚(提純品)水溶液，然后以10mmo1/L氫氧化鈉溶液25倍稀釋之，加入200ul稀釋液于小孔杯中，以10mmo1/LNaOH溶液作空白，于405nm(參比波長650nm)檢測，其吸光度應在0.4A(0.395～0.408A)左右。全自動酶標儀測試系統(tǒng)可以自動檢測樣品的吸光度；分析樣品的數據，并生成圖表、報告等結果。福建科研酶標儀共同合作
全自動酶標儀自動加樣、混合、分配等操作；酶標板處理系統(tǒng)可以自動清洗、涂覆、加背景液等操作。北京什么是酶標儀價錢
酶標儀的分類 1.光吸收酶標儀：是用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測，特定波長的光通過微孔板中的樣品后，光能量被吸收，而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關系，由此可以用來定性和定量的檢測，光吸收的檢測技術成熟，成本低，操作簡單，但是動態(tài)范圍窄，靈敏度比較低，特異性不強，一般可見光和紫外光分別采用鎢燈及氘燈作為光源，而紫外/可見酶標儀是可以將兩種光源進行切換，適應不同測量波長的需求。 2.熒光酶標儀：是用來進行熒光的檢測，通過激發(fā)光柵分光后的特定波長的光照射到被熒光物質標定的樣品上后,會發(fā)出波長更長的發(fā)射光，通過發(fā)射光柵后到達檢測器，熒光的強度與樣品的濃度呈一定的比例，熒光檢測靈敏度高，可實時檢測，使用方便，檢測模式多樣，但是容易受外界干擾，激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響，干擾檢測。北京什么是酶標儀價錢