酶標(biāo)儀的發(fā)展歷程 酶標(biāo)儀的前世今生 1966年,美國的Nakane和Pierce及法國的Avrameas和Uriel同時報道了以新的標(biāo)記物——辣根過氧化酶(HRP)替代熒光素,定位組織中抗原的酶免疫組織化學(xué)技術(shù)(EIH)。1971年,Engvall和Perlmann在酶免疫組織化學(xué)的基礎(chǔ)上,又發(fā)展出一種酶標(biāo)固相免疫測定技術(shù),即酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),成為繼放射免疫分析技術(shù)、熒光免疫之后的第三大標(biāo)記免疫分析技術(shù)。70年代中期,隨著雜交瘤技術(shù)的發(fā)展,發(fā)明了單克隆抗體制備技術(shù),將其應(yīng)用于酶免疫測定中,提高了其靈敏度和特異性,使一步法雙抗體夾心法等酶免疫測定方法相繼出現(xiàn)。 酶免疫分析技術(shù)是將酶催化的放大作用與抗原、抗體特異性反應(yīng)相結(jié)合的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗體或抗原后,既不影響抗體或抗原的免疫反應(yīng)特異性,也不改變酶本身的催化活性,在相應(yīng)的反應(yīng)底物參與下,標(biāo)記的酶水解底物或顯色,或使供氫體由無色的還原型轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩难趸停溆猩a(chǎn)物可以通過肉眼、分光光度計或顯微鏡觀察或測定。上海穩(wěn)贏機電設(shè)備的全自動酶標(biāo)儀可以自動計算、分析樣品的數(shù)據(jù),并生成圖表、報告等結(jié)果。浙江本地酶標(biāo)儀共同合作
全自動酶標(biāo)儀的優(yōu)點全自動酶標(biāo)儀具有以下優(yōu)點:高精度:全自動酶標(biāo)儀采用先進的測試技術(shù),能夠準(zhǔn)確地測量樣品的吸光度,從而得到準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。高效率:全自動酶標(biāo)儀可以同時處理多個樣品,提高了實驗效率。自動化:全自動酶標(biāo)儀的各個系統(tǒng)都可以自動運行,減少了人為操作帶來的誤差,提高了實驗結(jié)果的可靠性。智能化:全自動酶標(biāo)儀具有先進的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng),可以自動計算、分析樣品的數(shù)據(jù),并生成圖表、報告等結(jié)果,使用戶可以更方便地進行數(shù)據(jù)整理和分析。安全性:全自動酶標(biāo)儀的設(shè)計和使用符合實驗室安全規(guī)范,能夠保證實驗過程的安全性。江西放心選酶標(biāo)儀設(shè)備全自動酶標(biāo)儀的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)可以自動計算、分析樣品的數(shù)據(jù),并生成圖表、報告等結(jié)果。
酶標(biāo)儀應(yīng)用在臨床檢驗、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應(yīng)用,使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越常見,同時促進了生殖健康技術(shù)水平提高。 國內(nèi)多家檢測機構(gòu),如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調(diào)酶標(biāo)儀的重要性,并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀,酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀,并提供酶標(biāo)儀測定的原始數(shù)據(jù),而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項目往往是一些實質(zhì)性的交叉?zhèn)魅竞筒∽儯ㄈ纾焊窝?、?yōu)生優(yōu)育等),判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn),由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝EIA試劑檢測是避免因輸血引起交叉?zhèn)魅疽l(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。
標(biāo)記的多樣化與多功能酶標(biāo)儀應(yīng)運而生 標(biāo)記物的多樣化,是免疫技術(shù)的發(fā)展和進步的一個方面。免疫檢測標(biāo)記物由本初的放射同位素,發(fā)展為安全無污染的辣根過氧化物酶(HRP)和磷酸酯酶,并進一步擴展到熒光素、稀土元素(目前主要是Eu)、上轉(zhuǎn)換等;底物溶液也對應(yīng)的由酶催化下產(chǎn)生顏色效應(yīng)的底物發(fā)展為產(chǎn)生光子或熒光信號,獲得更加靈敏和穩(wěn)定的信號和更寬的線性范圍,并相應(yīng)產(chǎn)生了更多檢測模式。 多種檢測模式整合在單臺儀器上,多功能酶標(biāo)儀就運用而生了,可實現(xiàn)對吸光度、時間分辨熒光(TRF)、化學(xué)發(fā)光(Lum)及非標(biāo)記檢測技術(shù)熒光偏振(FP) 、熒光強度(FI,F(xiàn)RET)等兩種或多種模式的檢測。此外,應(yīng)用于分子互作的BRET/NANO-BIT(生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù))、熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)(TR-FRET)和ALPHA等,近些年也被應(yīng)用于多功能酶標(biāo)儀中。而且多功能酶標(biāo)儀不限于微孔板檢測,還可內(nèi)置比色皿插槽。因此,酶標(biāo)儀目前已成為一個廣義的定義。上海穩(wěn)贏機電設(shè)備的酶標(biāo)儀是一種單通道自動進樣的酶標(biāo)儀工作原理圖。
中心定位 儀器會自動對酶標(biāo)孔進行中心定位,中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進行檢測時,儀器其實要進行35個點的測量,選取偏中間的5個點的均值為本孔的OD值。 光源的參照通道 參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。 用途和其它提示 用于ELISA試劑的測定,可用于各種實驗室,包括臨床實驗室。 質(zhì)量控制 質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制。 空白校正 有一些試劑盒的說明書將空白孔設(shè)置為空氣,其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的,請按照試劑盒的說明書要求進行。購買全自動酶標(biāo)儀推薦廠家上海穩(wěn)贏機電設(shè)備。湖北品牌酶標(biāo)儀銷售電話
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三、通道差與孔間差檢測 方法及其表達方式:①通道差檢測:取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染)以酶標(biāo)板架作載體,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200u*后置于8個通道的相應(yīng)位置,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(測定波長490nm,參比波長630或650nm,以下均相同)連續(xù)測三次,觀察其不同通道之間測量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。②孔間差的測量:選擇同一廠家、同一批號酶標(biāo)板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)0.065~0.070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長檢測,其誤差大小用±1.96s衡量。 四、零點飄移 方法:取八只小孔杯,分別置于八個通道的相應(yīng)位置,均加入200ul蒸餾水并調(diào)零,采用雙波長或單波長(490nm)每隔30min測定一次,觀察8個通道4h內(nèi)的吸光度變化。其與零點的差值即為零點飄移。浙江本地酶標(biāo)儀共同合作