注意事項(xiàng)1.怎樣確定血清使用濃度?這個(gè)只能通過(guò)測(cè)試了。原則上血清添加量不要太多,通常分為5%、10%、20%幾檔。部分細(xì)胞原代提取時(shí)會(huì)使用20%血清,大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)時(shí)會(huì)使用5%~10%的血清濃度。至于某一株細(xì)胞適應(yīng)什么樣的血清濃度,還需要根據(jù)細(xì)胞特性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康淖鰷y(cè)試和調(diào)校。2.血清使用前需要離心嗎?其一,因?yàn)檠迦诮夂笥小靶鯛钗铩蔽龀?。如果沒(méi)有出現(xiàn)其他異常情況,或者血清只是用于細(xì)胞培養(yǎng),那么完全沒(méi)有必要離心去除。我們知道血清析出的“絮狀物”主要是血纖蛋白,其在血清中含量很高,而且高度不溶,在血清凍融過(guò)程中極易析出,但它也是完全無(wú)害的,甚至能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。另外,它還增強(qiáng)了血清黏性,為細(xì)胞提供了額外的機(jī)械緩沖。在其析出過(guò)程中,會(huì)粘附培養(yǎng)體系中其他成分,離心去除,反而會(huì)損失營(yíng)養(yǎng)成分。云海生物的胎牛血清具有良好的穩(wěn)定性,可以長(zhǎng)期保存,為您的實(shí)驗(yàn)提供持久的支持,節(jié)省您的時(shí)間和成本。湖南胎牛血清購(gòu)買(mǎi)
血清滅活和不滅活有什么不一樣?在回答這個(gè)問(wèn)題之前,我們先要弄清楚滅活究竟滅的是什么成分的活性。其實(shí)56℃、30min的處理只能去除補(bǔ)體和部分其他蛋白的活性。補(bǔ)體是免疫系統(tǒng)的一部分,在體內(nèi)可通過(guò)多條途徑被煥活,從而發(fā)揮調(diào)理吞噬、裂解細(xì)胞、介導(dǎo)炎癥、免疫調(diào)節(jié)和去除免疫復(fù)合物等多種作用。血清滅活的說(shuō)法早是在細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)發(fā)展初期,大部分實(shí)驗(yàn)室還在使用小牛血清甚至成體動(dòng)物血清,或者以前培養(yǎng)某些人源細(xì)胞時(shí)會(huì)添加人血清。因?yàn)檠骞w已與環(huán)境長(zhǎng)期接觸,體內(nèi)免疫系統(tǒng)已經(jīng)經(jīng)歷了一場(chǎng)又一場(chǎng)的戰(zhàn)斗,而保留了“豐厚的戰(zhàn)利品”——抗體、補(bǔ)體等,這些成分在體內(nèi)可以由免疫系統(tǒng)去除,但在體外的細(xì)胞培養(yǎng)中,可能會(huì)對(duì)部分細(xì)胞產(chǎn)生損傷。溫州新生牛血清訂購(gòu)無(wú)論是質(zhì)量還是服務(wù),云海生物都致力于做到更好,為您的科研事業(yè)保駕護(hù)航。
血清使用前需要離心嗎?其一,因?yàn)檠迦诮夂笥小靶鯛钗铩蔽龀?。如果沒(méi)有出現(xiàn)其他異常情況,或者血清只是用于細(xì)胞培養(yǎng),那么完全沒(méi)有必要離心去除。我們知道血清析出的“絮狀物”主要是血纖蛋白,其在血清中含量很高,而且高度不溶,在血清凍融過(guò)程中極易析出,但它也是完全無(wú)害的,甚至能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。另外,它還增強(qiáng)了血清黏性,為細(xì)胞提供了額外的機(jī)械緩沖。在其析出過(guò)程中,會(huì)粘附培養(yǎng)體系中其他成分,離心去除,反而會(huì)損失營(yíng)養(yǎng)成分。其二,實(shí)驗(yàn)要求純凈的培養(yǎng)體系。培養(yǎng)的細(xì)胞需要進(jìn)一步鑒定,如免疫熒光、流式、共聚焦拍照等,細(xì)胞表面如果有黏性較強(qiáng)的血纖蛋白,勢(shì)必會(huì)影響效果。那么,建議400g離心5min即可。如果需要進(jìn)行精密實(shí)驗(yàn),如分離外泌體等,那么就需要至少100000g離心1.5h以上。
血清的分類(lèi)動(dòng)物不同,分離出的血清也會(huì)有所不同。物種來(lái)源相同的血清,根據(jù)采集血時(shí)間、血源品質(zhì)也會(huì)分出不同的類(lèi)別。有些時(shí)候,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,還要對(duì)血清進(jìn)行一些特殊的加工。因此,市面上的血清種類(lèi)也越來(lái)越多。1牛血清根據(jù)采集血時(shí)間的不同,可分為以下幾種??:【胎牛血清】(FoetalBovineSerum,簡(jiǎn)稱(chēng)FBS):是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎。【新生牛血清】(NewbornCalfSerum,簡(jiǎn)稱(chēng)NBCS):0—7天內(nèi)(也有說(shuō)法是0—30天內(nèi));【小牛血清】(CalfSerum):采自出生30天——1年的小牛?!境膳Q濉浚ˋdultBovineSerum,簡(jiǎn)稱(chēng)ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。合格的血清產(chǎn)品,需要嚴(yán)格控制采集血時(shí)間點(diǎn),才能保證基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例:一旦牛胎齡過(guò)長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)逐漸發(fā)育完全,進(jìn)而使制備的血清中含有補(bǔ)體,影響血清品質(zhì)。另外胎牛中各類(lèi)生長(zhǎng)因子也會(huì)隨著生長(zhǎng)發(fā)育而逐漸喪失,進(jìn)一步使血清品質(zhì)下降。實(shí)驗(yàn)不是千篇一律的,根據(jù)不同的需求,有時(shí)候需要對(duì)血清進(jìn)行一些“定制化處理”。選擇云海生物的新生牛血清,就是選擇專(zhuān)業(yè)與放心,我們始終與您并肩,共創(chuàng)美好未來(lái)。
胎牛血清的主要作用:1、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)素,某些含量微小營(yíng)養(yǎng)物、低分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖;2、提供貼壁因子,是細(xì)胞貼壁、鋪展在玻璃或塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子的來(lái)源;3、提供蛋白酶抑制劑,中和剩余的胰蛋白酶的消化,使其失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害;4、提供pH緩沖,有酸堿緩沖液的作用,保護(hù)細(xì)胞不受傷害;(注:因此培養(yǎng)基加入胎牛血清后pH可能會(huì)發(fā)生變化,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況再次調(diào)節(jié)pH)5、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到祛毒作用。6、提供營(yíng)養(yǎng),內(nèi)含各種蛋白可提供細(xì)胞分裂所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到祛毒作用。(注:如培養(yǎng)基成分已經(jīng)較為豐富完善,例如DEME培養(yǎng)基,則血清提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作用不明顯。)我們的胎牛血清采用先進(jìn)的生產(chǎn)工藝,保證了其高純度和優(yōu)異的質(zhì)量。您可以放心使用,無(wú)需擔(dān)心任何質(zhì)量問(wèn)題。天津胎牛血清哪家好
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在4℃冰箱中的儲(chǔ)存:解凍后的血清,不宜在4℃冰箱中放置過(guò)久。血清在生產(chǎn)加工運(yùn)輸過(guò)程中,沒(méi)有添加外源抑菌成分。因此開(kāi)封后,如果長(zhǎng)期保存在使用頻率高且潔凈度差的4℃冰箱中,很容易染菌。如果配制為完全培養(yǎng)基,添加了雙抗,可以在一定程度上減少培養(yǎng)基污染的風(fēng)險(xiǎn),但是由于基礎(chǔ)培養(yǎng)基的添加,使得整體成分更為復(fù)雜,保存不當(dāng)則會(huì)使有效物質(zhì)活性降低。我們建議,添加了血清的培養(yǎng)基盡量做到現(xiàn)配現(xiàn)用;解凍后的血清不要長(zhǎng)期儲(chǔ)存在4℃冰箱中,盡可能不要超過(guò)7天。湖南胎牛血清購(gòu)買(mǎi)