血清出現(xiàn)沉淀的問題:血清非人工產(chǎn)品,有些東西沉淀出來系自然現(xiàn)象;纖維蛋白原、鹽析出,如磷酸鈣等;膽固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情況下還會增加:熱滅活、37℃培養(yǎng)(常常由此引發(fā)歧異)、反復(fù)凍融、熔化中沒有搖勻、gamma照射、長期存放在2-8°C。另外我們還發(fā)現(xiàn):血清加入到RPMI1640中時(shí),沉淀往往會發(fā)生或增加:pH升高時(shí),沉淀會增加;在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中,因?yàn)榕囵B(yǎng)基的蒸發(fā)也會導(dǎo)致沉淀的增加。如何避免血清中產(chǎn)生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì);(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。我們擁有完善的冷鏈運(yùn)輸系統(tǒng),確保馬血清在運(yùn)輸過程中始終保持活性,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。威海馬血清采購平臺
雞血清成分的分析將雞血通過離心技術(shù)分為血漿和血細(xì)胞,得到的血漿再進(jìn)行冷凍處理后,利用快速融解法除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原即是血清。血漿約占血液總量的55%,其中含8%的血漿蛋白,通過鹽析法可將其分為3類:白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原,其中纖維蛋白原所占比例比較好小,所以比較好終得到的血清為60%~80%。血清中有90%~91%的水,6.5%~8.5%的蛋白質(zhì),2%左右的低分子量蛋白質(zhì),近年來對血清中的低分子量蛋白質(zhì)研究較多,但在利用血清之前需要進(jìn)行過濾提純,除去血清中的血清蛋白和免疫球蛋白,然后對提純的低分子量蛋白進(jìn)行試驗(yàn),BjorhallK等人[2]對目前多種去除血清中大蛋白的方法進(jìn)行了分析研究,發(fā)現(xiàn)除蛋白的試劑盒更適用于試驗(yàn)使用,該試劑盒操作簡易、方便,因只供一次性使用,所以很大降低了樣品的交叉污染,其中多維親和層析柱還可同時(shí)除去多種大蛋白。因此,血清樣品利用之前要與多種技術(shù)相結(jié)合進(jìn)行預(yù)處理,之后再進(jìn)行相關(guān)研究。鄭州新生牛血清生產(chǎn)廠云海生物的雞血清,源自健康雞只,經(jīng)過嚴(yán)格篩選與提取,保證每一滴都純凈無比。
牛胎球蛋白的作用牛胎球蛋白是一種糖蛋白,它含多肽74%,己糖8.3%,氨基己糖5.5%,唾液酸8.7%,分子量為48.4kDa。牛胎球蛋白是由肝細(xì)胞分泌,體內(nèi)有抑制胰蛋白酶活性,也是成骨作用的抑制劑。在體外試驗(yàn)中,牛胎球蛋白具有促進(jìn)細(xì)胞貼壁、生長和分化的活性,可選擇性誘導(dǎo)某些細(xì)胞程序性死亡,增強(qiáng)人巨噬細(xì)胞的吞噬作用。有研究發(fā)現(xiàn),腫瘤細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中需要10個(gè)小時(shí)才能在塑料器皿上貼壁,而加入胎球蛋白后只需要2小時(shí)。懸浮細(xì)胞可內(nèi)吞攝取胎球蛋白,細(xì)胞內(nèi)鈣離子升高,促使外泌體從細(xì)胞內(nèi)分泌出來,從而介導(dǎo)細(xì)胞黏附。胎球蛋白是脊椎動物的血漿蛋白。具有高度同源性,在爬行動物、魚、鳥、有袋類動物和哺乳動物中大量存在。它也是胎牛血清中豐富的球蛋白。
很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采集血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。進(jìn)口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時(shí)間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀,當(dāng)然,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。當(dāng)然,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過程比較好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。我們的雞血清營養(yǎng)豐富,含有多種生長因子和必需營養(yǎng)物質(zhì),助力細(xì)胞培養(yǎng)更成功。
胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別胎牛血清是在母牛懷孕3-8個(gè)月的時(shí)候,通過剖腹,心臟密閉穿刺采集血獲取的胎牛的血清,豐富的營養(yǎng)因子能夠滿足科研客戶多種細(xì)胞類型的需求。新生牛血清是小牛生下來之后取血,根據(jù)采集血時(shí)間的不同,分為類標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清(特級新生牛血清)、優(yōu)級新生牛血清和標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清。其中有國內(nèi)廠家所謂的“胎牛血清”,實(shí)際上是類標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,是小牛出生2小時(shí)內(nèi)不吃母乳的情況下采集血獲得的血清。保存血清的方法:我們建議血清應(yīng)保存在-10℃至-20℃。若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。選擇云海生物,就是選擇了高質(zhì)量的豬血清,我們嚴(yán)格把控生產(chǎn)流程,確保每一滴血清都符合標(biāo)準(zhǔn)。淄博羊血清培養(yǎng)基
云海生物的馬血清,采用先進(jìn)的生產(chǎn)工藝提取,保留了血清中的天然成分,更貼近生理狀態(tài)。威海馬血清采購平臺
為什么要熱滅活丨血清?加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。煥活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,煥活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活丨血清。有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活丨血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。威海馬血清采購平臺