血清出現沉淀的問題:血清非人工產品,有些東西沉淀出來系自然現象;纖維蛋白原、鹽析出,如磷酸鈣等;膽固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情況下還會增加:熱滅活、37℃培養(yǎng)(常常由此引發(fā)歧異)、反復凍融、熔化中沒有搖勻、gamma照射、長期存放在2-8°C。另外我們還發(fā)現:血清加入到RPMI1640中時,沉淀往往會發(fā)生或增加:pH升高時,沉淀會增加;在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中,因為培養(yǎng)基的蒸發(fā)也會導致沉淀的增加。如何避免血清中產生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的產生:(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質;(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。我們的胎牛血清經過嚴格的篩選和檢測,確保不含任何有害物質,為您的細胞培養(yǎng)提供專業(yè)的生長環(huán)境。日照胎牛血清批發(fā)商
為什么要熱滅活丨血清?加熱可以滅活補體系統(tǒng)。煥活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,煥活淋巴細胞和巨噬細胞,在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活丨血清。有必要做熱滅活嗎?實驗顯示,經過正確處理的熱滅活丨血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。海南馬血清廠家云海生物精選新生牛血清,嚴格把控生產環(huán)節(jié),確保每一滴血清都符合高標準要求。
很多血清客戶,會發(fā)現進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,和廠家的加工生產方式密切相關。國產的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環(huán)境都不好,從采集血、冷凍、運輸到生產會經過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產生。進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復凍融,生產后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀,當然,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。當然,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程比較好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
何謂熱滅活?有必要做熱滅活嗎?一般以56℃、30分鐘來處理已解凍的血清,因為這一加熱步驟可使補體去活性。補體所參與的反應有:溶細胞活性、平滑肌的收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放,可增強吞噬作用,促使淋巴細胞、巨噬細胞的趨化。實驗顯示,經過正確處理的熱滅活丨血清,對大多數的細胞而言是不需要的。因為,經過處理的血清對細胞生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。經過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會讓研究者誤以為是血清遭受污染。而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者認為是微生物的分裂擴增。因此,若非必須,可不做熱滅活。云海生物的雞血清,源自健康雞只,經過嚴格篩選與提取,保證每一滴都純凈無比。
1、牛血清的主要成分血清是一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已為人所知,但還有一部分尚不清楚,而且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。(1)蛋白質:是牛血清中主要成份之一。除白蛋白外還有包括球蛋白,胎球蛋白,脂蛋白等,(2)多肽:血小板促生長因子能促細胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細胞增殖因子。(3)激丨素:激丨素對細胞的作用是多方面的。(4)其他成份除上述外,血清中還含微量元素,脂肪酸,特殊離子,維生素等。我們的馬血清經過嚴格的質量控制,確保每批產品的穩(wěn)定性和一致性,讓您的實驗數據更加準確。浙江胎牛血清生產商
云海生物的羊血清產品具有的質量和純度,經過嚴格的篩選和提純過程,確保產品的高效性和安全性。日照胎牛血清批發(fā)商
4.血清分裝。4.1血清完全析出后,將血凝塊撈出丟棄并妥善處理。4.2將容器內的血清用注射器抽取后,或用漏斗直接分裝至空的生理鹽水瓶中。注意裝量不可太滿,一般以容量的80%為宜,即標稱500ml的實際裝400ml。4.3剩余血清若混有較多血細胞,仍可收集使用。如有離心機,也可經3000轉/分,經3分鐘離心取上清液.5.血清水浴滅活;加入“雙抗”。5.1將水浴鍋加水調至56℃。水線以淹沒血清的高水平線為宜。5.2血清置水浴鍋,經30分鐘水浴。5.3將血清冷卻,加入“雙抗”。建議按照每400ml血清添加青霉素1,000萬單位、鏈霉素300萬單位?,F在也有按照100ml血清添加2.5ml的5%恩諾沙星注射液的。二者皆可。日照胎牛血清批發(fā)商