為什么血清中會有沉淀生成,主要成分是什么,會對實驗有什么影響?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),胎球蛋白[1],脂蛋白,冷凝集素,玻連蛋白,磷酸鈣(顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復凍融,長期儲存于2-8℃或者室溫。預防:非必要,不用熱滅活;避免反復凍融;-20℃保存;4℃全融(期間間斷搖晃均勻);2000rpm離心5分鐘(不建議用0.2um濾膜過濾),取上清使用。血清存在批間差嗎?因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。每個批號的組分和百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。建議先進行批號測試,篩選出合適批號,購買半年甚至一年以上的用量,避免批間差造成實驗波動(胎牛血清在-20℃保存可達5年)。胎新生牛血清具有極好的穩(wěn)定性和保存性,可長期儲存并保持其生物活性。江西牛血清廠家
血清的主要成分,蛋白質類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉鐵蛋白(能結合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用)、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;多肽類主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子,主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細胞的生長和分裂也起著重要作用;激丨素類激丨素對細胞的作用是多方面的。包括:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關;類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結合,從而有胰島素同樣的作用:促生長激丨素:促進細胞增殖的效應;血清中含有微量該成分,它可能具有促細胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中的氫化可的松,在細胞密度較高時可能有抑制細胞生長和誘導細胞發(fā)生分化的作用。四川羊血清生產商馬血清是一種高質量的生物制品,具有極高的純度和生物活性。
胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別是什么?取血年齡不同:牛血清按照牛取血時間或牛齡可進行區(qū)分。胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡稱FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹得來的胎牛。國產胎牛血清(并無明確定義,但通常以此稱)的指的是出生4-6小時,且未進行哺乳(unsuckled)進食的牛,有時還稱作國產新生牛。新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡稱NBCS)指的是出生14天-3個月進行取血的牛。成年牛血清(AdultBovineSerum,簡稱ABS)指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛。以上取血牛齡的差異主要是受當地國家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因為牛血多為畜牧業(yè)副產業(yè),并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。組分與比例不同:這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、其他活性物質等組分與比例不同。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,細胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低。用途與用法不同:根據細胞所需生長條件可確定。
關于血清溶解正確的操作我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱24小時左右使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中,無論室溫的水或者37℃的水,因為在水浴中血清迅速熔化,很大的溫差(-20℃到37℃,溫差為57℃)極其容易造成血清產生沉淀。何謂熱滅活?一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和煥活。胎新生牛血清的價格合理,性價比高,是您實驗室的理想選擇。
關于熱滅活胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養(yǎng)效果。若針對某些特殊試驗,對于胎牛血清一定要做熱滅活,國際上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。血清中內毒丨素含量過高,更容易導致細胞“亞健康”,造成數據不準,或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導致試驗中斷失敗。血清中的內毒丨素越低越好。全球細胞培養(yǎng)學會均依據內毒丨素對血清的品質進行分級和命名。我們的胎牛血清具有高效的生產能力和穩(wěn)定的性能,能夠提高客戶的生產效率和降低成本。陜西動物血清批發(fā)
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血清檢測意義通過對免疫豬群進行抗體水平檢測,及時了解和跟蹤豬群免疫抗體水平,從而制定和調整免疫程序,對指導生產、控制疫病起著至關重要的作用。血清采集及保存1、血樣采集:用于檢測抗體的血清樣品,可用一次性注射器采集。一般,仔豬、保育豬采用前腔靜脈采集血,生長育肥豬、哺乳母豬和種公豬采用前腔靜脈或者耳靜脈采集血。采集血量一般3-5mL左右。注意血清中不要混入紅細胞,常見有血清呈深紅色,這是血清中混入了紅細胞并發(fā)生破裂之故,這可使一些檢測結果不準。2、血樣處理與保存:所采集血樣通過離心,分離出的血清保存在1.5mL離心管中。血清如一周內送檢,則可冷藏于4℃冰箱,若采集血后超過一周送檢,則放-20℃凍結保存,注意直至送檢前不要再融化。若豬場無離心機的,可選擇在室溫條件下傾斜45°放置,保證靜置30min(避免陽光直曬),嚴防發(fā)生溶血,用泡沫塑料、冰袋等材料進行包裝轉運至實驗室進行血清分離。江西牛血清廠家