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血清使用常見(jiàn)問(wèn)題1、血清保存的比較好方法?我們建議血清比較好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶,建議無(wú)菌分裝于適當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)冷凍備用。2、如何解凍血清,才能保證其質(zhì)量不會(huì)受損?我們建議將血清從冷凍箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解凍,然后在室溫下全融,解凍過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3、為什么血清在解凍后會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀?應(yīng)該怎樣處理?血清中絮狀沉淀產(chǎn)生的原因有很多,其中比較普遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,這也是造成沉淀的主要原因,但這些絮狀沉淀并不影響血清本身的質(zhì)量。欲去除沉淀,可采取自然沉降法或者將血清分裝于無(wú)菌離心管中,2000~3000rpm離心5min。一般不建議用過(guò)濾的方法去除絮狀沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)阻塞濾膜,造成過(guò)濾困難或無(wú)法過(guò)濾。畜禽采集血分離血清是疫病監(jiān)測(cè)、檢測(cè)、診斷和評(píng)估免疫效果的一項(xiàng)前提性工作。福建雞血清生產(chǎn)廠家
關(guān)于熱滅活胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗(yàn)中,通過(guò)加熱滅活掉血清中的補(bǔ)體,以避免對(duì)免疫試驗(yàn)的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會(huì)真正干預(yù)免疫試驗(yàn)。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長(zhǎng)因子的活性衰減,進(jìn)而影響細(xì)胞培養(yǎng)效果。若針對(duì)某些特殊試驗(yàn),對(duì)于胎牛血清一定要做熱滅活,國(guó)際上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。有下列情況者,對(duì)血清內(nèi)應(yīng)格外留意篩選:1.干細(xì)胞:干細(xì)胞對(duì)內(nèi)非常敏感,如果血清中內(nèi)≥3EU/ml時(shí),干細(xì)胞很容易死亡。選擇質(zhì)量血清非常重要2.免疫細(xì)胞時(shí):,過(guò)高的內(nèi)可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。無(wú)錫動(dòng)物血清訂購(gòu)血清,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。
樣品采集在采取豬血清時(shí),有幾個(gè)注意事項(xiàng),是要采取不同階段豬的血清,這樣才可以反應(yīng)在不同階段的抗體水平,從而判定抗體衰減規(guī)律,確定首免日齡,評(píng)價(jià)疫苗效果。第二是各個(gè)階段需要有一定的樣本數(shù)量,個(gè)別豬場(chǎng)在采集血樣時(shí),為了降低檢測(cè)成本,盲目減少血樣數(shù)量,從而導(dǎo)致沒(méi)有代表性,一般情況下,每個(gè)階段的樣本數(shù)量可以選擇4-6份。第三,每份樣品的血樣,不能低于1毫升,否則可能導(dǎo)致樣本太少難以開展檢測(cè)。第四,采集的樣本,盡量在冷藏狀態(tài)嚇保存。
國(guó)產(chǎn)血清、大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。微生物包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病毒等。隨著國(guó)內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,大多也能去除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,又無(wú)法過(guò)濾,很難徹底去除,但對(duì)血清質(zhì)量影響不大,特別是BVDV,在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而優(yōu)級(jí)胎牛血清中基本都控制的很好。免疫球蛋白國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè)。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出采集血的時(shí)的牛齡情況,國(guó)產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。有些時(shí)候,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,還要對(duì)血清進(jìn)行一些特殊的加工。
如何挑選適合細(xì)胞生長(zhǎng)的血清?原代或是正常細(xì)胞株建議使用BI特級(jí)胎牛血清,對(duì)生長(zhǎng)條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用特用特級(jí)胎牛血清,或胚胎干細(xì)胞特用胎牛血清。由于血清有批間差異,細(xì)胞種類不同,我們建議客戶購(gòu)買前可先申請(qǐng)?jiān)囉脴悠?,通過(guò)篩選得到滿意的血清批號(hào),之后根據(jù)項(xiàng)目需求可進(jìn)行批量囤貨,以保證該項(xiàng)目所需血清質(zhì)量的一致性,可排除不同批號(hào)血清對(duì)于實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的影響。如何正確保存血清?需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月,若一次無(wú)法用完一瓶,建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。碳水化合物,脂肪,生長(zhǎng)因子,礦物質(zhì)及微量元素。上海馬血清批發(fā)商
巧在人們發(fā)現(xiàn)這些成分不耐受高溫,所以才有了熱滅活處理。福建雞血清生產(chǎn)廠家
雞血清成分的分析將雞血通過(guò)離心技術(shù)分為血漿和血細(xì)胞,得到的血漿再進(jìn)行冷凍處理后,利用快速融解法除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原即是血清。血漿約占血液總量的55%,其中含8%的血漿蛋白,通過(guò)鹽析法可將其分為3類:白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原,其中纖維蛋白原所占比例比較好小,所以比較好終得到的血清為60%~80%。血清中有90%~91%的水,6.5%~8.5%的蛋白質(zhì),2%左右的低分子量蛋白質(zhì),近年來(lái)對(duì)血清中的低分子量蛋白質(zhì)研究較多,但在利用血清之前需要進(jìn)行過(guò)濾提純,除去血清中的血清蛋白和免疫球蛋白,然后對(duì)提純的低分子量蛋白進(jìn)行試驗(yàn)。BjorhallK等人[2]對(duì)目前多種去除血清中大蛋白的方法進(jìn)行了分析研究,發(fā)現(xiàn)除蛋白的試劑盒更適用于試驗(yàn)使用,該試劑盒操作簡(jiǎn)易、方便,因只供一次性使用,所以很大降低了樣品的交叉污染,其中多維親和層析柱還可同時(shí)除去多種大蛋白。因此,血清樣品利用之前要與多種技術(shù)相結(jié)合進(jìn)行預(yù)處理,之后再進(jìn)行相關(guān)研究。福建雞血清生產(chǎn)廠家
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