為什么要熱滅活丨血清?有必要熱滅活嗎?加熱可以滅活丨血清中的補體系統(tǒng),使補體去活化。通常未滅活的補體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放、煥活淋巴細胞和巨噬細胞,同時還能夠參與溶解細胞的過程。諸多研究表明大多數(shù)細胞的培養(yǎng)無須進行血清的熱滅活;而在免疫學(xué)研究和ES細胞、昆蟲細胞、平滑肌細胞的培養(yǎng)過程中,推薦使用熱滅活丨血清。實驗顯示,經(jīng)正確熱滅活處理的血清,對細胞的生長只有微小的促進或完全沒有促進作用,而通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,造成細胞生長速率降低。并且熱處理過的血清,沉淀物明顯增多,倒置顯微鏡下觀察呈“小黑點”,往往會使研究者誤以為是血清受到了污染,而把血清放于37℃中,沉淀物又會更增多,有會使研究者誤認為是微生物的分裂增殖。因此我們建議若非必須,可以不進行熱處理,既節(jié)省時間又確保質(zhì)量。在動物血清中存在豐厚的無機鹽,還具有許多緩沖物質(zhì),在培育基的酸堿度發(fā)生變化時起到緩沖效果。重慶動物血清生產(chǎn)廠
不管是國產(chǎn)還是進口血清,都是不測的(無四環(huán)素胎牛血去除外)。國外,的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含或含量極低;國內(nèi),的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對細胞培養(yǎng)極為不利,這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。血源市場上的血清血源主要分為中國、北美、南美和澳洲。1、國產(chǎn)血清質(zhì)量差,這是公認的,主要原因并不是生產(chǎn)廠家的責(zé)任,而是天然環(huán)境差和的大量使用。國內(nèi)環(huán)境污染嚴重,同時飼養(yǎng)過程中極其濫用,有毒有害物質(zhì)會大量殘留在血清中,比較終不利于細胞的生長。2、南美血清,來源很多,如Bioind的巴拿馬、Gibco的烏拉圭、巴西等,這些血清由于采集血的不可控性,質(zhì)量參差不齊,當(dāng)然,相對于國內(nèi)血清來說好的多。另外,國內(nèi)銷售的南美血清大多顏色鮮紅,如Sera Pro、Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,這可能和各國的采集血、生產(chǎn)工藝有關(guān)。寧波牛血清價格動物不同,分離出的血清也會有所不同。
為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見的混濁物。這些沉淀的產(chǎn)生不會影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。如何避免沉淀物的產(chǎn)生?我們建議您在使用血清的時候,注意下列操作:?解凍血清時,請按照上述逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時溫度變化太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。?解血清時,請隨時輕輕地將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。?請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,影響血清的質(zhì)量。?血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,無需做此步驟。?若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃、30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
內(nèi)含量越低,級別越高,以胎牛血清為例:血清中內(nèi)含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;血清中內(nèi)含量﹥10EU/ml,≤25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;血清中內(nèi)含量≥25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;不同廠家,不同批次的血清,內(nèi)數(shù)值也可能有較大差異,因此很多血清廠家在名稱上已不注明級別。但使用者仍可通過檢測報告,自行甄別挑選,*胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,其中大部分是已知的,小部分不清楚,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。*胎牛血清在細胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,抗體與培養(yǎng)細胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險也較低,是理想的細胞生長補充劑。*為避免不同供體間的個體差異,能夠更好保證實驗數(shù)據(jù)的連續(xù)性和穩(wěn)定,應(yīng)使用同批次血清作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、和各種生長因子、結(jié)合蛋白、促接觸和生長因子。
馬血清的作用:1.提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細胞生長需要的物質(zhì)。2.提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)()、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3.提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。4.提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。5.對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。動物血清供應(yīng)細胞生計和增殖所必需的生長調(diào)理因子。南通雞血清訂購
供應(yīng)蛋白酶克制劑,維護細胞免受死細胞開釋的蛋白酶的損害。重慶動物血清生產(chǎn)廠
關(guān)于熱滅活胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預(yù)免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養(yǎng)效果。若針對某些特殊試驗,對于胎牛血清一定要做熱滅活,國際上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。有下列情況者,對血清內(nèi)應(yīng)格外留意篩選:1.干細胞:干細胞對內(nèi)非常敏感,如果血清中內(nèi)≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。選擇質(zhì)量血清非常重要2.免疫細胞時:,過高的內(nèi)可誘導(dǎo)免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。重慶動物血清生產(chǎn)廠
山東云海生物科技有限公司成立于2015-03-09,同時啟動了以云海生物為主的豬血清,雞血清,馬血清,牛血清產(chǎn)業(yè)布局。是具有一定實力的精細化學(xué)品企業(yè)之一,主要提供豬血清,雞血清,馬血清,牛血清等領(lǐng)域內(nèi)的產(chǎn)品或服務(wù)。隨著我們的業(yè)務(wù)不斷擴展,從豬血清,雞血清,馬血清,牛血清等到眾多其他領(lǐng)域,已經(jīng)逐步成長為一個獨特,且具有活力與創(chuàng)新的企業(yè)。山東云海生物科技有限公司業(yè)務(wù)范圍涉及公司的主要產(chǎn)品為豬、雞、馬、羊、牛等動物血清,牛血清白蛋白、脫纖維牛、抗凝牛、羊全血。主要特點:原料充足、質(zhì)量可靠、無支原體、無特異性抗體、促細胞生長性能優(yōu)良?;谖覀兊膶S袆游镅寮夹g(shù),以及有關(guān)生命科學(xué)研究與應(yīng)用的其他技術(shù)和專業(yè)知識,以我國動物疫苗生產(chǎn)行業(yè)需求為導(dǎo)向,通過科學(xué)的研究和試驗使得產(chǎn)品與同類進口產(chǎn)品相比性價比更高。未來,我們將一如既往地加大對研發(fā)的投入,為疫苗、抗體蛋白、診斷試劑、等行業(yè)及科研市場的發(fā)展提供質(zhì)優(yōu)的原料和高效的服務(wù)。等多個環(huán)節(jié),在國內(nèi)精細化學(xué)品行業(yè)擁有綜合優(yōu)勢。在豬血清,雞血清,馬血清,牛血清等領(lǐng)域完成了眾多可靠項目。