血清保存方法1.如何保存血清?血清應(yīng)該在-20℃保存。如果一次無(wú)法用完一瓶,應(yīng)該無(wú)菌分裝后冷凍保存。注意避免反復(fù)凍融。2.為什么儲(chǔ)存在冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?有些胎牛血清產(chǎn)品沒(méi)有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。凍融方法正確解凍方法:將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時(shí),使之緩慢部分溶解,然后再放在室溫下使之全溶。注意:溶解過(guò)程中要每隔一段時(shí)間緩慢地?fù)u動(dòng)血清使之混勻。切記:避免37℃水浴。它們的效果十分重要,細(xì)胞需求它們組成核酸和蛋白質(zhì),缺少要導(dǎo)致細(xì)胞成長(zhǎng)不良乃至死亡。貴州牛血清批發(fā)商
可以起到營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用,動(dòng)物在代謝的進(jìn)程中所需的養(yǎng)分包含水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、糖類(lèi)、脂肪、氨基酸和纖維素等。這些成分動(dòng)物血清都能夠供給給體外培育的動(dòng)物細(xì)胞,但這些養(yǎng)分物質(zhì)(除水以外)的含量在動(dòng)物血清中所占的份額很少,并且首要的養(yǎng)分物質(zhì)在動(dòng)物細(xì)胞培育基的制造中現(xiàn)已增加了。所以,從這些視點(diǎn)看動(dòng)物細(xì)胞培育參加的動(dòng)物血清雖然能起到為培育的動(dòng)物細(xì)胞供給養(yǎng)分物質(zhì)的效果,但這并不是首要的效果。細(xì)胞貼壁鋪展在塑料培育基質(zhì)上所需因子來(lái)歷是動(dòng)物細(xì)胞培育的一個(gè)很重要的用途就是用取自燒傷患者皮膚的健康細(xì)胞進(jìn)行培育,能夠獲得許多本身的皮膚細(xì)胞,為大面積燒傷的患者移植。人工皮膚的制備需求培育的細(xì)胞貼附在薄膜上構(gòu)成皮膚組織,血清就為這個(gè)進(jìn)程供給所需因子。廣州牛血清廠家直銷(xiāo)血清分離質(zhì)量的好壞,直接影響到監(jiān)測(cè)結(jié)果,所以掌握畜禽的采集血分離血清的方法尤為重要。
1989年左右,也有國(guó)外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細(xì)胞(見(jiàn)《動(dòng)物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽(yáng)性反應(yīng)》),原因是牛血清中的白蛋白會(huì)干擾非洲豬瘟抗體的檢測(cè),造成假陽(yáng)性反應(yīng)。其他動(dòng)物源血清兔血清:兔血清通常從六個(gè)月或更小的動(dòng)物身上收集,可用于與BSA結(jié)合用作免疫細(xì)胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),質(zhì)量的山羊血清可用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。雞血清:從屠宰供人類(lèi)食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測(cè)定
豬血清(貨號(hào):C2500-0100/0500/1000)豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。//兔血清(貨號(hào):C2520-0100/0500)正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。//羊血清(貨號(hào):C2530-0010/0100/0500)用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。用作魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物。可成功地代替胎牛血清在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中長(zhǎng)期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。//雞血清(貨號(hào):C2550-0100/0500)適用于單抗研制、規(guī)?;囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。//驢血清(貨號(hào):C2540-0010/0100/0500)適用于單抗研制、免疫組化、規(guī)?;囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。碳水化合物,脂肪,生長(zhǎng)因子,礦物質(zhì)及微量元素。
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理.顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染.一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破壞而影響血清質(zhì)量.夏天在常溫下即可,冬天要在20-30℃下靜置30-45分鐘。河南豬血清購(gòu)買(mǎi)
注意:不要以過(guò)濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)檫@可能阻塞濾膜。貴州牛血清批發(fā)商
如何進(jìn)行血清滅活處理?血清請(qǐng)先按上述「血清應(yīng)如何融解」中的操作步驟融化和混勻,熱滅活時(shí)請(qǐng)將血清置于56℃水浴30分鐘。為盡量減少熱滅活對(duì)血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過(guò)大。比較好準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時(shí)將裝有血清和水的容器同時(shí)放入56℃水浴,在裝水的容器中放置溫度計(jì),加熱過(guò)程中不時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,當(dāng)溫度計(jì)顯示達(dá)到56℃左右,開(kāi)始計(jì)時(shí)。56℃水浴后,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。貴州牛血清批發(fā)商
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