常規(guī)細胞培養(yǎng)需要添加血清來維持細胞的增殖能力,盡管血清可以滿足一般細胞培養(yǎng)需求,但在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進行研究的實驗中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。透析是將血清循環(huán)通過中空纖維,并在血清中補充生理鹽水以維持滲透壓,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于關(guān)注小分子濃度的特殊研究,包括:研究蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細胞信號傳導(dǎo)和報告基因分析、報告基因細胞系的篩選等。血清分離質(zhì)量的好壞,直接影響到監(jiān)測結(jié)果,所以掌握畜禽的采集血分離血清的方法尤為重要。廣東豬血清
在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進行研究的實驗中,需要去除某些特定的背景成分,常用的去除方法有碳吸附,使用活性碳和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì)。活性炭能夠結(jié)合脂溶性分子,通過碳吸附可降低血清中許多***及生長因子的濃度,如雌二醇、皮質(zhì)醇、皮質(zhì)酮、孕酮、B類維生素、睪酮及T3、T4、前列腺素等。該血清適用于上述一些分子可能干擾實驗結(jié)果的實驗中,對于那些需要這些分子的細胞培養(yǎng),也可能降低細胞生長性能。適用于:培養(yǎng)干細胞、原代細胞、神經(jīng)細胞、人類細胞、人類骨髓細胞、白血病細胞、人類胚肺成纖維細胞、人類腦神經(jīng)細胞和瘤細胞等細胞。開封牛血清廠家直銷此沉淀可能包括磷酸鈣結(jié)晶,但不改變血清的性能,同樣血清熱滅活也會導(dǎo)致沉淀的形成。
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清.血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理.顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質(zhì)量.
抗血清的采集與保存家兔是很常用以產(chǎn)生抗體的動物,因此這里主要討論兔血的收集。羊等較大動物以頸靜脈、動脈取血,鼠等小動物取血可參閱有關(guān)資料。取兔血有兩種方法,一是耳緣靜脈或耳動脈放血,一是頸動脈入血,也可心臟采集血。取動脈或靜脈放血時,將免放入一個特造的木匣或籠內(nèi),耳露于箱(籠) 外,也可由另一人捉住兔身。剪去耳緣的毛,用少許二甲苯涂抹耳廓,30s后,耳血管擴張、充血。用手輕拉耳尖,以單面剃須刀或尖的手術(shù)刀片,快速切開動脈或靜脈,血液即流出,每次可收集30~40ml。然后用棉球壓迫止血,凝血后洗去二甲苯。二星期后,可在另一耳放血。此法可反復(fù)多次放血。頸動脈放血時,將免仰臥,固定于兔臺,剪去頸部的毛,切開皮膚,暴露頸動脈,插管,放血。放血過程中要嚴(yán)格按無菌要求進行。收集的血液置于室溫下1h左右,凝固后,置4°C下,過夜 (切勿冰凍) 析出血清,離心,4000rpm,10min。在無菌條件,吸出血清,分裝 (0.05~0.2ml) ,貯于-40°C以下冰箱,或凍干后貯存于4。C冰箱保存。所有指標(biāo)試劑盒均經(jīng)過近乎苛刻的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)。對不合格產(chǎn)品執(zhí)行零容忍--山東云海生物。
1989年左右,也有國外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽性反應(yīng)》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應(yīng)。其他動物源血清兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于與BSA結(jié)合用作免疫細胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),質(zhì)量的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定 至于某一株細胞適應(yīng)什么樣的血清濃度,還需要根據(jù)細胞特性、實驗?zāi)康淖鰷y試和調(diào)校。云南羊血清購買
所有的血清可能保留一些纖維蛋白原。廣東豬血清
2.取血方式不同胎牛血清:母牛懷孕3-8個月時,采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血清:分別是取自新生牛(小牛)、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分比較少;促細胞生長因子、促附因子、及其他活性物質(zhì)等組分也不同于其他幾類血清4.用途不同某些細胞的培養(yǎng)必須使用胎牛血清才行,如:干細胞、淋巴細胞、神經(jīng)細胞、星狀膠質(zhì)細胞等;而有些細胞需要小牛血清就可以,如:腫瘤細胞等。使用濃度也不同,一般在10%-15%,有特殊要求的濃度在20%廣東豬血清
山東云海生物科技有限公司一直專注于公司的主要產(chǎn)品為豬、雞、馬、羊、牛等動物血清,牛血清白蛋白、脫纖維牛、抗凝牛、羊全血。主要特點:原料充足、質(zhì)量可靠、無支原體、無特異性抗體、促細胞生長性能優(yōu)良?;谖覀兊膶S袆游镅寮夹g(shù),以及有關(guān)生命科學(xué)研究與應(yīng)用的其他技術(shù)和專業(yè)知識,以我國動物疫苗生產(chǎn)行業(yè)需求為導(dǎo)向,通過科學(xué)的研究和試驗使得產(chǎn)品與同類進口產(chǎn)品相比性價比更高。未來,我們將一如既往地加大對研發(fā)的投入,為疫苗、抗體蛋白、診斷試劑、等行業(yè)及科研市場的發(fā)展提供質(zhì)優(yōu)的原料和高效的服務(wù)。,是一家精細化學(xué)品的企業(yè),擁有自己**的技術(shù)體系。一批專業(yè)的技術(shù)團隊,是實現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的豬血清,雞血清,馬血清,牛血清。公司力求給客戶提供全數(shù)良好服務(wù),我們相信誠實正直、開拓進取地為公司發(fā)展做正確的事情,將為公司和個人帶來共同的利益和進步。經(jīng)過幾年的發(fā)展,已成為豬血清,雞血清,馬血清,牛血清行業(yè)出名企業(yè)。