用于免疫的動物作免疫用的動物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)量,如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因動物反應(yīng)良好,而且能夠提供足夠數(shù)量的血清,用于免疫的動物應(yīng)適齡,健壯,無感染性疾患,比較好為///雄性,此外還需十分注意動物的飼養(yǎng),以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔,最好用純種新西蘭兔,一組三只,兔的體重以2~3kg為宜。二、免疫途徑免疫途徑有多種多樣,如靜脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)內(nèi)注射等,一般常用皮下或背部多點皮內(nèi)注射,每點注射0.1ml左右。途徑的選擇決定于抗原的生物學(xué)特性和理化特性,如、酶、等生物學(xué)活性抗原,一般不宜采用靜脈注射。部分細胞原代提取時會使用20%血清,大部分細胞正常培養(yǎng)時會使用5%~10%的血清濃度。福建雞血清生產(chǎn)廠
動物不同,分離出的血清也會有所不同。物種來源相同的血清,根據(jù)采集血時間、血源品質(zhì)也會分出不同的類別。有些時候,根據(jù)實驗需求,還要對血清進行一些特殊的加工,因此,市面上的血清種類就變得五花八門了。牛來源的血清,可以細分為很多種:根據(jù)采集血時間分??合格的血清產(chǎn)品,需要嚴格控制采集血時間點,才能保證比較基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例:一旦牛胎齡過長,會導(dǎo)致補體系統(tǒng)逐漸發(fā)育完全,進而使制備的血清中含有補體,影響血清品質(zhì)。另外,胎牛中各類生長因子也會隨著生長發(fā)育而逐漸喪失,進一步使血清品質(zhì)下降。實驗不是千篇一律的,根據(jù)不同的需求,有時候需要對血清進行一些“定制化處理”。鄭州胎牛血清購買將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。
按物種分類馬血清10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的補充培養(yǎng)基。豬血清豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細胞培養(yǎng), 疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體), 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV), 用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中的標準陰性參考。兔血清正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。
抗血清的采集與保存家兔是很常用以產(chǎn)生抗體的動物,因此這里主要討論兔血的收集。羊等較大動物以頸靜脈、動脈取血,鼠等小動物取血可參閱有關(guān)資料。取兔血有兩種方法,一是耳緣靜脈或耳動脈放血,一是頸動脈入血,也可心臟采集血。取動脈或靜脈放血時,將免放入一個特造的木匣或籠內(nèi),耳露于箱(籠) 外,也可由另一人捉住兔身。剪去耳緣的毛,用少許二甲苯涂抹耳廓,30s后,耳血管擴張、充血。用手輕拉耳尖,以單面剃須刀或尖的手術(shù)刀片,快速切開動脈或靜脈,血液即流出,每次可收集30~40ml。然后用棉球壓迫止血,凝血后洗去二甲苯。二星期后,可在另一耳放血。此法可反復(fù)多次放血。頸動脈放血時,將免仰臥,固定于兔臺,剪去頸部的毛,切開皮膚,暴露頸動脈,插管,放血。放血過程中要嚴格按無菌要求進行。收集的血液置于室溫下1h左右,凝固后,置4°C下,過夜 (切勿冰凍) 析出血清,離心,4000rpm,10min。在無菌條件,吸出血清,分裝 (0.05~0.2ml) ,貯于-40°C以下冰箱,或凍干后貯存于4。C冰箱保存。包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析--云海生物。
佐劑由于不同個體對同一抗原的反應(yīng)性不同,而且不同抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)的能力也有強有弱,因此常常在注射抗原的同時,加入能增強抗原的抗原性物質(zhì),以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應(yīng),這種物質(zhì)稱為免疫佐劑。佐劑除了延長抗原在體內(nèi)的存留時間,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),使參與免疫反應(yīng)的免疫活性細胞增多,促進T細胞與B細胞的相互作用,從而增強機體對抗原的細胞免疫和抗體的產(chǎn)生。常用的佐劑是福氏佐劑(Freundadjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份羊毛脂與石臘油的比例,視需要可調(diào)整為1:2~9(V/V),這是不完全福氏佐劑,在每毫升不完全佐劑加入1~20mg卡介苗就成為完全佐劑。在對細胞和活疫苗進行支原體檢驗中,《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗用液體培養(yǎng)基的組成成分。北京豬血清品牌
豬血清,常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)--山東云海生物。福建雞血清生產(chǎn)廠
為什么存放于冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象?在2~8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時處于溶解狀態(tài),在凍融過程中會發(fā)生聚集,形成肉眼可見的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會影響血清的性能。可以400g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般比較常用的是0.22umPES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2~8°C條件下長時間放置。福建雞血清生產(chǎn)廠
山東云海生物科技有限公司正式組建于2015-03-09,將通過提供以豬血清,雞血清,馬血清,牛血清等服務(wù)于于一體的組合服務(wù)。旗下云海生物在精細化學(xué)品行業(yè)擁有一定的地位,品牌價值持續(xù)增長,有望成為行業(yè)中的佼佼者。我們強化內(nèi)部資源整合與業(yè)務(wù)協(xié)同,致力于豬血清,雞血清,馬血清,牛血清等實現(xiàn)一體化,建立了成熟的豬血清,雞血清,馬血清,牛血清運營及風(fēng)險管理體系,累積了豐富的精細化學(xué)品行業(yè)管理經(jīng)驗,擁有一大批專業(yè)人才。公司坐落于山東省青島市黃島區(qū)劉公島路71號5號樓,業(yè)務(wù)覆蓋于全國多個省市和地區(qū)。持續(xù)多年業(yè)務(wù)創(chuàng)收,進一步為當?shù)亟?jīng)濟、社會協(xié)調(diào)發(fā)展做出了貢獻。