江西CD9外泌體慢病毒包裝

來源: 發(fā)布時間:2024-02-06

外泌體普遍參與細胞間物質運輸與信息傳遞,調控細胞生理活動。同時,外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導正常細胞轉化、促進種瘤發(fā)生和轉移等作用;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送。外泌體相關數(shù)據(jù)庫有哪些?lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA,包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個物種的286個研究結果,涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類等信息。外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式。江西CD9外泌體慢病毒包裝

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Exosome(外泌體)是由活細胞分泌小囊泡,具有典型的脂質雙分子層結構;參與細胞之間的交流,物質的運輸以及正常生理過程的維持,此外還與疾病的產(chǎn)生有關。對分離的外泌體進行體外標記或示蹤,有助于對外泌體的功能進行進一步的研究。目前對于外泌體的標記方法有很多種,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67,PKH-26具有更長的半衰期,標記在兔紅細胞上的PKH26半衰期長達100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長期的體內(nèi)細胞跟蹤研究。植物外泌體提取試劑盒原理外泌體作為膜和細胞溶質蛋白、脂質和RNA細胞之間傳遞的載體。

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流式細胞技術針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測,能夠實現(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低,所以采用常規(guī)的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射,操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM),將可檢測的外泌體粒徑降至40nm,能夠在不連接beads的情況下實現(xiàn)每分鐘10000個外泌體的檢測,并且能夠結合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質的定量檢測,目前該儀器已商品化。

瘤轉移是病癥致死的首要原因。長久以來,對瘤轉移機理的研究一直聚焦于瘤與機體之間的相互作用。然而在近年來,由于外泌體被發(fā)現(xiàn)可以作為包括瘤在內(nèi)細胞之間信息傳遞的一種新方式,瘤轉移研究領域再度變得火熱起來。我所(瘤轉移的預警和預防研究所)以謝曉東博士為首的外泌體研究小組一直致力于研究瘤轉移與外泌體之間的聯(lián)系,已取得一系列成果。外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,可使類風濕關節(jié)炎惡化。

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除了siRNA和miRNA,mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運輸。研究表明,在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分離出來的外泌體含有中流細胞特異性的mRNA,而被愛潑斯坦-巴爾病毒(EBV)感ran的細胞分泌的外泌體中也含有EBV的潛伏期mRNA。因而,外泌體的這種運載mRNA的能力引起了中流研究者們的注意。近期,Saydam等率先報道了利用多泡體(含外泌體)負載mRNA/蛋白進行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質體2000或病毒載體對HEK-293細胞進行轉染,使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP,其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖轉移酶;EGFP:增強型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經(jīng)鞘瘤處,并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神經(jīng)鞘瘤的增長被明顯抑制。外泌體在組織修復領域均起著重要的作用,并且可以作為很好靶向給藥系統(tǒng)。浙江外泌體label free

外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合,進而喚醒靶細胞細胞內(nèi)的信號通路。江西CD9外泌體慢病毒包裝

在血液和大多數(shù)體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質瘤診斷和預后的指標,特別對預測中流復發(fā)或轉移具有價值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。江西CD9外泌體慢病毒包裝