科學家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能。例如,類風濕關節(jié)炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體,高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,可使類風濕關節(jié)炎惡化。通過上述介紹可以知道癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關的分子,神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子,因此,通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發(fā)生。隨著今后的研究發(fā)展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用,有望將外泌體應用在各種疾病醫(yī)治上。甚至可嘗試利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸到目標細胞中。有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。組織外泌體攝取
卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達譜有明顯差異,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標志物。多項研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數ai癥的多種病理條件下過度表達。尿液外泌體來源于泌尿系統相關的各種細胞,包括腎小球足細胞、腎小管細胞和膀胱等,因此尿液外泌體數目、形態(tài)和生化性質的改變往往反映泌尿系統疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進行轉錄組分析,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測ai癥患者狀態(tài)的潛力。b細胞外泌體干細胞外泌體通過改變細胞外基質,改變受體細胞的轉錄組和蛋白質組,調節(jié)細胞凋亡,生長,增殖和分化途徑。
外泌體(Exosome)介導瘤細胞的增殖過程。瘤細胞通過與自身微環(huán)境的信息交流促進瘤細胞的增殖,而外泌體(Exosome)可以充當這種信息載體。當細胞中出現基因突變時,外泌體(Exosome)會通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細胞,從而導致原病基因的喚醒、抗凋亡基因的表達,使瘤細胞獲得增殖特性。瘤細胞來源的外泌體(Exosome)還可以通過直接抑制免疫細胞,促進瘤細胞逃避免疫監(jiān)視,為瘤細胞在體內生長創(chuàng)造條件。然而,雖然當前外泌體生物學仍然不成熟,但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎研究進展和臨床轉化。
外泌體的形成始于細胞內陷,成熟于多囊泡胞內體,終于膜融合。細胞通過內吞作用產生小囊泡,小囊泡融合形成早期胞內體(earlyendosome),在多個蛋白的協同調控下,早期胞內體出芽形成含有多個腔內小囊泡的多泡體(multivesicularbodies,MVB),這個過程中這些腔內小囊泡(intraluminalvesicles,ILVs)會裝載各種核酸和蛋白質等分子,泡內體較后在GTPase家族中RAB酶的調節(jié)下與細胞膜融合。隨后,這些小囊泡會被釋放到細胞外,稱為外泌體。外泌體是通過細胞內吞細胞膜融合主動排除的物質,大小均勻,而微泡是由細胞直接出芽脫落生成,大小不均一。外泌體及其攜帶的組分參與肝臟細胞的增殖、再生和遷移等生理過程,在肝臟疾病和肝損傷中起著重要作用。
姜黃素的臨床應用也存在著問題,比如其水溶性差,在體內代謝快速以及易被快速清chu。利用鼠淋巴瘤細胞系(EL-4)的外泌體作為姜黃素的載體,可以提高姜黃素的溶解性、穩(wěn)定性以及生物利用度,將姜黃素和載有姜黃素的外泌體腹膜內注射到脂多糖(LPS)誘發(fā)的敗血性休克的小鼠模型中,結果顯示經外泌體運載的姜黃素可促進小鼠肺部抑制免疫反應的CD11b+Gr-1+細胞的凋亡而表現出抗yan癥的效果,而單純姜黃素的注射不能起到促進CD11b+Gr-1+細胞的凋亡效果(與注射PBS的對照組類似)。研究者還進行了目前常用的脂質體負載姜黃素,與外泌體負載姜黃素對比。脂質體和外泌體均具備作為姜黃素的載體的能力,但外泌體由于其更易被Gr-1+細胞吞噬,從而可以起到更好的zhiliao效果。神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子。遼寧外泌體NTA
外泌體的遺傳分子與肝臟病理息息相關,在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點或分子標志物。組織外泌體攝取
研究采用蔗糖密度梯度離心聯合2次PEG6000沉淀,極大地降低了外泌體的提取成本,且獲得的外泌體不僅表達外泌體公認的標志蛋白分子,同時也表達胎盤特異性蛋白分子,證明通過這種方法獲得的外泌體是胎盤來源外泌體。通過蔗糖密度梯度離心后得到的外泌體沉淀經蛋白質SDS-PAGE膠電泳,銀染后可見各蛋白分子條帶清晰可見,動態(tài)光散射分析粒徑,結果顯示獲得的外泌體顆粒粒徑大部分分布于28-91nm之間,與文獻報道外泌體顆粒大小相一致。胎盤外泌體經過PKH67熒光染料染色后,與細胞共孵育,熒光顯微鏡下觀察外泌體具備進入細胞的活性,進一步驗證了我們應用此種改良的分離方法可有效的獲得胎盤來源的外泌體。本研究通過蔗糖密度梯度離心聯合2次PEG6000沉淀成功分離得到母體血清中胎盤來源外泌體,并從蛋白標志分子、電鏡、粒徑及分布、進入細胞活性四方面對其進行了鑒定,為研究妊娠期間胎盤外泌體在正常妊娠及胎盤源性并發(fā)癥中的作用奠定了基礎。組織外泌體攝取
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