湖南外泌體iTRAQ

除運輸藥物進行疾病zhiliao之外，外泌體還能進行免疫zhiliao，外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao。進行免疫調節(jié)時，外泌體通常運載TGF-β1、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質。在這些研究中，分泌外泌體的母代細胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹突細胞或者中流細胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤細胞作為母代細胞，通過熱處理的方式使淋巴瘤細胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子，如主要組織相容性復合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等，與未熱處理的鼠B淋巴瘤細胞分泌的外泌體相比，熱處理后分泌的外泌體可以增強對T細胞的激huo能力，從而增強這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力。臨床前研究的證據表明干細胞釋放的外泌體可作為心肌修復的潛在無細胞治理劑。湖南外泌體iTRAQ

在血液和大多數體液（如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等）中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿，miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs，但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解，因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平，腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質瘤診斷和預后的指標，特別對預測中流復發(fā)或轉移具有價值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺，刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。外泌體整理外泌體內主要含有核酸、蛋白質和脂質等，可作為疾病診斷標記物、調控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等。

外泌體富含蛋白質、脂質和核酸分子，這些分子具有來源細胞的特異性，所以通過分析中流細胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來源細胞表型及其生物學作用。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來源的蛋白類分子標志物。例如，乳腺ai、結腸ai和胰腺ai中均可檢測到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1（glypican1，GPC1）的表達，且與乳腺ai和結腸ai相比，GPC1對胰腺ai的早期診斷尤具價值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達增高則提示與中流進展相關。隨著蛋白組學技術的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來源的蛋白標志物其診斷特異性和敏感性分別可達到95％和90％。

外泌體在各種疾病的診斷和治理中的應用研究火熱。外泌體的復雜性，為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個多指標的診斷窗口。此外，能夠向病變細胞輸送功能性物質的特性使外泌體有潛力作為基因和藥物遞送的載體。有研究總結了從外泌體中篩選的生物標志物，可用于疾病的診斷、預后及治理。外泌體在生物液體中寬泛分布，包括血液、尿液、唾液、胸腹水、腦脊液、膽汁、乳汁以及淚液等，其復雜的內容物被認為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標志物，具有檢測包括病癥在內的許多病理狀況的潛力，可以用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測。干細胞外泌體有減少細胞凋亡、促進血管生成、抑制纖維化等重要生物學功能，在調控組織再生方面有好的前景。

Knepper等通過對透射電鏡得到的200個囊泡進行粒徑分析，結果表明尿液中外泌體的粒徑分布約為35～40nm，磷脂雙分子層厚度約為直徑的1/5～1/10。透射電鏡結合免疫金標記法能夠得到外泌體表面特征分子的信息，有助于揭示外泌體的產生機制與來源。動態(tài)光散射(dynamiclightscattering，DLS)和納米顆粒跟蹤分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis，NTA)都是利用光學手段獲得囊泡粒徑分布的方法。兩者的不同之處在于動態(tài)光散射通過檢測散射光的強度計算得到顆粒粒徑，而納米顆粒跟蹤分析通過追蹤單個粒子的運動軌跡計算得到樣品濃度、粒徑分布等信息。細胞外囊泡（EVs）表示了細胞間通訊的一個重要模式。湖南外泌體iTRAQ

外泌體介導的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。湖南外泌體iTRAQ

肺病細胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激種瘤血管的形成來促進種瘤的生長。據相關報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調節(jié)基質細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進種瘤血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過開啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內容物可以觸發(fā)上皮-間質轉化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加，促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖，遷移能力?？茖W家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能。湖南外泌體iTRAQ

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